鴨腸炎病毒（Duck enteritis virus,DEV）也稱(chēng)鴨瘟病毒（Duck plague virus,DPV）或鴨1型皰疹病毒（Anatid herpesvirus 1,AHV-1）,具有廣泛的組織嗜性,是目前威脅和危害水禽養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的重要病原之一,但其感染機(jī)制尚未完全清楚。Cofilin是一種存在于真核細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白解聚因子,調(diào)控細(xì)胞骨架的組裝,參與細(xì)胞遷移、粘附、分裂和凋亡等生命活動(dòng)。研究表明,cofilin調(diào)控的宿主細(xì)胞內(nèi)肌動(dòng)蛋白重排能影響病原體的感染過(guò)程。但目前尚未見(jiàn)到有關(guān)cofilin在DEV感染過(guò)程中作用及其分子機(jī)制研究的文獻(xiàn)報(bào)道。因此,本研究擬在前期基礎(chǔ)上,首先采用熒光定量PCR檢測(cè)分析DEV感染對(duì)cofilin基因轉(zhuǎn)錄的影響,然后通過(guò)cofilin RNA干擾分析DEV增殖情況,以期為進(jìn)一步闡明DEV致病機(jī)制提供重要的理論數(shù)據(jù)。1.鴨Cofilin2克隆分析及熒光定量PCR方法建立根據(jù)GenBank雞源cofilin2基因（NM₀01004406.1）序列設(shè)計(jì)引物,RT-PCR方法擴(kuò)增鴨源cofilin2全基因序列,生物信息學(xué)分析三... 

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Summary
縮略詞
文獻(xiàn)綜述
實(shí)驗(yàn)研究
    第一章 鴨Cofilin2克隆分析及熒光定量PCR方法建立
        1 材料
            1.1 菌株和動(dòng)物
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
        2 方法
            2.1 Cofilin2全基因克隆分析
            2.2 Cofilin2 FQ-PCR質(zhì)粒制備
            2.3 Cofilin2 FQ-PCR檢測(cè)方法的建立
        3.結(jié)果
            3.1 Cofilin2全基因克隆
            3.2 Cofilin2基因生物信息學(xué)分析
            3.3 Cofilin2 FQ-PCR質(zhì)粒制備
            3.4 Cofilin FQ-PCR檢測(cè)方法的建立
        4 討論
            4.1 關(guān)于cofilin家族的研究
            4.2 關(guān)于cofilin2基因的研究
            4.3 關(guān)于cofilin2分子克隆分析
            4.4 關(guān)于熒光定量PCR技術(shù)
    第二章 Cofilin在DEV感染鴨組織中的轉(zhuǎn)錄
        1 材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
        2 方法
            2.1 樣品制備
            2.2 DEV感染檢測(cè)
            2.3 FQ-PCR檢測(cè)cofilin的轉(zhuǎn)錄
        3 結(jié)果
            3.1 DEV感染檢測(cè)及cofilin總RNA檢測(cè)
            3.2 Cofilin FQ-PCR產(chǎn)物特異性分析
            3.3 Cofilin2基因在DEV感染鴨中的轉(zhuǎn)錄
        4 討論
            4.1 關(guān)于鴨腸炎病毒的研究
            4.2 關(guān)于cofilin在正常鴨組織轉(zhuǎn)錄的研究
            4.3 關(guān)于DEV對(duì)cofilin轉(zhuǎn)錄影響的研究
    第三章 cofilin在DEV復(fù)制過(guò)程的作用
        1 材料
            1.1 毒株和動(dòng)物
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
        2 方法
            2.1 cofilin-shRNA構(gòu)建
            2.2 cofilin-shRNA篩選
            2.3 cofilin-shRNA干擾下DEV增殖動(dòng)態(tài)
        3 結(jié)果
            3.1 cofilin-shRNA構(gòu)建
            3.2 cofilin-shRNA篩選
            3.3 cofilin-shRNA干擾下DEV增殖動(dòng)態(tài)
        4 討論
            4.1 關(guān)于RNA干擾
            4.2 關(guān)于cofilin與病原感染
            4.3 關(guān)于cofilin對(duì)DEV病毒感染的作用
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄一 攻讀學(xué)位期間參與科研項(xiàng)目
附錄二 各種培養(yǎng)基、溶液及試劑的配制
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鴨腸炎病毒感染鴨脾臟的轉(zhuǎn)錄組分析[J]. 吳良濤,鄭敏,華敏,萬(wàn)潤(rùn),程振濤,周碧君,文明.  病毒學(xué)報(bào). 2017(03)
[2]山羊BMPR-IB基因編碼蛋白結(jié)構(gòu)及功能的生物信息學(xué)分析[J]. 楊佳棟,劉月琴,張英杰.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2017(05)
[3]奶牛乳頭狀瘤病理學(xué)診斷及病原分子檢測(cè)研究[J]. 賀志昊,劉賢俠,喬軍,孟慶玲,張?jiān)俪?楊海波,陳創(chuàng)夫,都曼·努爾坎杰.  石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013(06)
[4]蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)的多核學(xué)習(xí)方法[J]. 連云涓,熊惠霖.  計(jì)算機(jī)應(yīng)用. 2013(S1)
[5]鴨腸炎病毒核衣殼蛋白受體的篩選與鑒定[J]. 張荷,毛君婷,楊穎,王開(kāi)功,周碧君,文明.  病毒學(xué)報(bào). 2012(01)
[6]鴨腸炎病毒核衣殼蛋白密碼子偏愛(ài)性分析[J]. 高穎,代淑燕,張荷,程振濤,周碧君,文明.  山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào). 2011(02)
[7]鴨腸炎病毒核衣殼蛋白基因的克隆與原核表達(dá)[J]. 代淑燕,寨鴻瑞,文明,劉忠偉,周碧君.  生物技術(shù). 2008(04)
[8]鴨瘟病毒弱毒株在免疫雛鴨體內(nèi)的分布和排毒規(guī)律[J]. 程安春,汪銘書(shū),劉菲,宋涌,袁桂萍,韓曉英,徐超,廖永洪,文明,周偉光,賈仁勇.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(03)
[9]熒光定量PCR技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 韓俊英,曾瑞萍.  國(guó)外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊(cè). 2000(03)
[10]熱激誘導(dǎo)煙草懸浮細(xì)胞的凋亡[J]. 陳浩明,顏長(zhǎng)輝,姜曉芳,夏慧莉,朱海珍,吳逸,戴堯仁.  科學(xué)通報(bào). 1999(02)

博士論文
[1]DEV基因文庫(kù)構(gòu)建、核衣殼蛋白基因的發(fā)現(xiàn)及克隆與表達(dá)[D]. 文明.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3721118