藏豬是我國特有的高原放牧型食草豬種，分析藏豬胃腸道微生物特性，研究藏豬的食草機(jī)理，對(duì)于發(fā)展我國節(jié)糧型養(yǎng)豬業(yè)意義十分重大。本試驗(yàn)以藏豬胃腸道內(nèi)容物為試驗(yàn)材料，篩選出一株纖維素降解菌，對(duì)所產(chǎn)纖維素酶進(jìn)行了純化和酶學(xué)特性研究。主要研究結(jié)果如下： 1.采用麩皮培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)后，從12株纖維素酶活性菌中得到一株透明圈直徑和酶活力均最高的菌株，經(jīng)形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)鑒定，命名為枯草芽孢桿菌BY-4。 2.通過比較分析發(fā)現(xiàn)，小麥秸稈、麩皮、玉米秸稈都能夠很好地誘導(dǎo)菌株BY-4產(chǎn)生纖維素酶，其中麩皮為最佳碳源，在48h酶產(chǎn)量達(dá)到最高，酶活為8.6U/mL，其次為小麥秸稈，酶活為7.1U/mL。粗酶液對(duì)本試驗(yàn)選用的底物均具有降解作用，其中對(duì)麩皮和小麥秸稈的消化作用最強(qiáng)，相對(duì)酶活分別為108.1±14.2、90.3±5.3，同時(shí)，該纖維素酶也能夠降解微晶纖維素產(chǎn)生還原糖，相對(duì)酶活達(dá)41.8±2.4。應(yīng)用掃描電鏡從形態(tài)學(xué)角度驗(yàn)證了粗酶液對(duì)麩皮和小麥秸稈的消化作用。 3.發(fā)酵上清液經(jīng)HiTrap Phenyl HP疏水作用層析、HiPrep16/60Sephacryl S-100凝膠過濾層... 

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
文獻(xiàn)綜述
    第一章 纖維素及纖維素酶研究進(jìn)展
        1.1 纖維素介紹
        1.2 纖維素酶的組成和降解機(jī)理
        1.3 纖維素酶研究新方法
        1.4 纖維素酶的純化研究
    第二章 產(chǎn)纖維素酶微生物和纖維素酶在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用
        2.1 產(chǎn)纖維素酶的微生物
        2.2 纖維素酶在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用
            2.2.1 纖維素酶應(yīng)用于飼料工業(yè)的作用機(jī)理
            2.2.2 纖維素酶在畜牧行業(yè)的應(yīng)用方式
試驗(yàn)研究
    第三章 藏豬源纖維素酶產(chǎn)生菌的分離鑒定
        3.1 引言
        3.2 材料與方法
            3.2.1 試驗(yàn)材料
            3.2.2 試驗(yàn)方法
        3.3 結(jié)果
            3.3.1 纖維素酶產(chǎn)生菌的篩選
            3.3.2 菌株鑒定
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
    第四章 不同碳源對(duì)產(chǎn)酶量的影響及粗酶液對(duì)底物的降解能力
        4.1 引言
        4.2 材料與方法
            4.2.1 試驗(yàn)材料
            4.2.2 試驗(yàn)方法
        4.3 結(jié)果
            4.3.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
            4.3.2 不同碳源對(duì)產(chǎn)酶量的影響
            4.3.3 纖維素酶對(duì)不同底物的分解作用
            4.3.4 掃描電鏡觀察酶處理前后麩皮及小麥秸稈形態(tài)變化
        4.4 討論
        4.5 小結(jié)
    第五章 纖維素酶的純化和酶學(xué)特性研究
        5.1 引言
        5.2 材料和方法
            5.2.1 試驗(yàn)材料
            5.2.2 試驗(yàn)方法
        5.3 結(jié)果
            5.3.1 纖維素酶的分離純化
            5.3.2 SDS-PAGE 和酶譜分析
            5.3.3 纖維素酶酶學(xué)特性研究
        5.4 討論
        5.5 小結(jié)
    第六章 纖維素酶基因的克隆和序列分析
        6.1 引言
        6.2 材料與方法
            6.2.1 試驗(yàn)材料
            6.2.2 試驗(yàn)方法
        6.3 結(jié)果
            6.3.1 纖維素酶基因擴(kuò)增
            6.3.2 內(nèi)切葡聚糖酶基因序列分析
        6.4 討論
        6.5 小結(jié)
結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
進(jìn)一步研究的問題
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]藏香豬源纖維素分解菌的分離鑒定及酶學(xué)特性分析[J]. 楊偉平,孟凡旭,馬麗,姬生躍,曹斌云.  動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2014(03)
[2]乳酸菌和纖維素酶對(duì)直穗鵝觀草青貯的改善效果[J]. 韓立英,玉柱,周禾.  草業(yè)科學(xué). 2013(09)
[3]纖維素酶在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 袁翠林,王利華.  飼料研究. 2013(05)
[4]藏豬食草機(jī)理的研究——藏豬腸道微生物的多樣性分析[J]. 肖文萍,劉海艷,趙海波,白龍,彭甲銀,劉雪青,王建剛,宋宇軒,曹斌云.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(03)
[5]風(fēng)味蛋白酶水解合浦珠母貝肉制備抗菌肽人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)法優(yōu)化工藝[J]. 吳燕燕,宮曉靜,李來好,楊賢慶.  食品科學(xué). 2011(20)
[6]我國農(nóng)業(yè)秸稈的現(xiàn)狀與利用方法[J]. 劉耀堂,李曉夢.  北方環(huán)境. 2011(07)
[7]纖維素復(fù)合酶制劑處理玉米秸稈飼喂肉牛增重效果研究[J]. 李豐成.  中國牛業(yè)科學(xué). 2011(04)
[8]一株片煙中纖維素降解菌的篩選鑒定及其初步應(yīng)用研究[J]. 王瑩,范堅(jiān)強(qiáng),包可翔,王金華,王志.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2011(08)
[9]纖維素酶及相關(guān)基因克隆的研究進(jìn)展[J]. 曾盈宇,陳介南,何鋼,張偉濤,詹鵬.  湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(12)
[10]含氰廢水處理方法的進(jìn)展與評(píng)述[J]. 薛文平,薛福德,姜莉莉,付瑞娟,褚亮亮,王曉霞,馬洪杰.  黃金. 2008(04)

碩士論文
[1]一株新的纖維分解菌的分離及纖維素酶的克隆與表達(dá)[D]. 劉海艷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[2]一株生孢噬纖維菌的分離純化、鑒定及降解纖維素濾紙過程的研究[D]. 張影.東北師范大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3720919