β-伴大豆球蛋白（β-Conglycinin）是大豆中最主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子之一，它的存在在很大程度上影響了大豆制品在飼料中的應(yīng)用。本試驗旨在研究經(jīng)過胃蛋白酶、黑曲霉酸性蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶處理之后β-Conglycinin的水解度、分子量分布、分子結(jié)構(gòu)和免疫原性的變化情況，從而為開發(fā)低致敏性大豆產(chǎn)品提供理論基礎(chǔ)。 結(jié)合等電點和硫酸銨分段鹽析的方法粗提β-Conglycinin，通過瓊脂糖凝膠（SephroseCL-6B）層析體系、純化β-Conglycinin，制備的β-Conglycinin樣品純度＞90%。 采用體外模擬消化的方法，利用胃蛋白酶、黑曲霉酸性蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶對分離純化的β-Conglycinin進(jìn)行消化。按照酶與底物比（E/S）為1:50的比例混合，然后水�。�37℃，100rpm）消化，反應(yīng)時間分別為0.5、1、15、30、60和120min。制備出可滿足后續(xù)試驗所需的酶解產(chǎn)物。 SDS-PAGE結(jié)果顯示：在酶與底物1:50條件下，胃蛋白酶和黑曲霉酸性蛋白酶單酶消化β-Conglycinin，α亞基對酶的敏感性較強(qiáng)，其次是α′亞基，而β亞基則有... 

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 大豆抗原蛋白的分類
    1.2 β-Conglycinin 的理化性質(zhì)
    1.3 β-Conglycinin 的抗?fàn)I養(yǎng)作用
    1.4 降低/消除β-Conglycinin 致敏性的方法
    1.5 本研究課題的主要研究內(nèi)容及意義
第二章 材料與方法
    2.1 試驗材料
    2.2 試驗所用溶液/試劑及配制
    2.3 試驗方法
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 β-Conglycinin 的分離純化鑒定結(jié)果
    3.2 蛋白酶活力的測定
    3.3 SDS-PAGE 分析酶解處理后β-Conglycinin 亞基的變化
    3.4 不同蛋白酶處理β-Conglycinin 水解度（DH%）的變化
    3.5 傅里葉紅外光譜（FT-IR）分析酶解β-Conlycinin 二級結(jié)構(gòu)的變化
    3.6 抗β-Conglycinin 特異性抗體的制備
    3.7 酶解對具有免疫原性的β-Conglycinin 含量的影響
第四章 討論
    4.1 β-Conglycinin 的分離純化
    4.2 SDS-PAGE 分析酶解處理后β-Conglycinin 亞基的變化
    4.3 不同蛋白酶處理β-Conglycinin 水解度的變化
    4.4 FT-IR 分析β-Conglycinin 二級結(jié)構(gòu)的變化
    4.5 酶解對β-Conglycinin 免疫原性的影響
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]金銀花水提物治療卵清蛋白過敏小鼠的實驗研究[D]. 李斐.重慶醫(yī)科大學(xué) 2004

碩士論文
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[2]大豆中主要抗原物質(zhì)對犢牛的影響[D]. 孫澤威.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003
[3]大豆對母豬和仔豬生產(chǎn)性能及免疫反應(yīng)的影響[D]. 詹冬玲.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002
[4]利用外源蛋白酶失活大豆中抗原蛋白的研究[D]. 賈振寶.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002



本文編號：3720571