單增李斯特菌（Listeriamonocytogenes, Lm）是一種重要的食源性病原菌,自1926年Murray等從家兔體內(nèi)首次分離到本病原后,現(xiàn)已呈世界性分布。2002年被WHO列為僅次于大腸桿菌0157、沙門氏菌、志賀氏菌后的第四大重要的食源性致病菌,能引起人和動(dòng)物腦膜炎、敗血癥、流產(chǎn)和單核細(xì)胞增多等癥狀,發(fā)病率雖低,但死亡率高達(dá)30%-70%。不同來源的菌株致病性差異大,有些菌株致病性很強(qiáng),而另一些菌株毒力較弱甚至無致病性。 抗生素的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展為人類健康做出了巨大的貢獻(xiàn)。然而,近20來,越來越多的證據(jù)表明,畜牧養(yǎng)殖業(yè)濫用抗生素對(duì)于細(xì)菌耐藥性的出現(xiàn)和耐藥基因的傳播起著重要作用。目前,細(xì)菌耐藥性和食品安全問題業(yè)已引起全球的普遍關(guān)注。一向被認(rèn)為對(duì)所有抗生素敏感的李斯特菌屬,也表現(xiàn)出向多重耐藥發(fā)展的趨勢(shì)。李斯特菌�。╨isteriosis）相對(duì)罕見然而一旦發(fā)生,病死率很高,耐藥菌株的感染導(dǎo)致治療困難,治療期延長,直接醫(yī)療負(fù)擔(dān)加重。因而準(zhǔn)確及時(shí)地早期診斷及合理的抗生素治療顯得尤為重要。 為分析Lm不同毒力菌株重要毒力因子的表達(dá)差異,擴(kuò)增、克隆了N21和Lmo0586這兩株不... 

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 單增李斯特菌概述
    1.2 Lm第一毒力島
        1.2.1 毒力調(diào)控蛋白(PrfA)
        1.2.2 溶血素蛋白LLO(hly)
        1.2.3 磷脂酶C(plcA、plcB)
        1.2.4 Mpl蛋白(mpl)
        1.2.5 肌動(dòng)蛋白聚集蛋白(ActA)
    1.3 李斯特桿菌藥物敏感性
        1.3.1 對(duì)青霉素的敏感性
        1.3.2 對(duì)甲氧芐啶的敏感性
        1.3.3 對(duì)鏈霉素的敏感性
        1.3.4 對(duì)紅霉素的敏感性
        1.3.5 對(duì)多種藥物共同敏感性
    1.4 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 菌種來源
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 相關(guān)培養(yǎng)液的配制
        2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        2.1.5 主要生物分析軟件
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 克隆內(nèi)參基因gyrB
        2.2.2 李斯特菌毒力基因熒光定量PCR方法建立
        2.2.3 不同毒力菌株毒力基因表達(dá)量水平檢測
        2.2.4 藥物敏感性試驗(yàn)
3 結(jié)果
    3.1 內(nèi)參基因gyrB克隆結(jié)果
        3.1.1 PCR擴(kuò)增結(jié)果
        3.1.2 重組質(zhì)粒PCR鑒定結(jié)果
    3.2 建立LIPI-1標(biāo)準(zhǔn)曲線
    3.3 兩種毒力菌株mRNA相對(duì)表達(dá)量檢測
    3.4 藥物敏感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 討論
    4.1 第一毒力島基因表達(dá)差異分析
    4.2 藥物敏感性差異分析及影響因素分析
        4.2.1 耐藥出現(xiàn)的原因分析
        4.2.2 藥敏實(shí)驗(yàn)的影響因素分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀專業(yè)碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[4]單核細(xì)胞增多性李斯特菌PCR和PCR-ELISA檢測方法的建立[D]. 譚炳乾.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
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碩士論文
[1]單核增生李斯特菌對(duì)于宿主抗病毒能力的影響[D]. 苗曉莉.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2011
[2]產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌actA/plcB雙缺失突變株的構(gòu)建[D]. 劉瑾.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]食源性單核增生性李斯特氏菌LIPI-1基因分布和致病力研究[D]. 閻雪.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[4]單核細(xì)胞增生李斯特菌毒力基因actA轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制的初步研究和缺失突變株的構(gòu)建[D]. 張曉莉.華中師范大學(xué) 2009
[5]單核細(xì)胞增生性李斯特菌Mpl蛋白的原核表達(dá)及免疫原性研究[D]. 王璐璐.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2009
[6]淡水水產(chǎn)品中單增李斯特菌雙重PCR檢測及基因分型[D]. 朱堂明.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3718443