小反芻獸疫是（Peste des petits ruminants，PPR）由小反芻獸疫病毒（Peste des petits ruminantsvirus，PPRV）引起的小反芻動物的一種接觸性傳染性疾病，發(fā)病率和死亡率分別可高達100%和90%。自1942年首次發(fā)現后，PPR傳播迅速，給流行地區(qū)帶來重大經濟損失。該病無特效治療方法，主要以疫苗免疫預防為主。目前廣泛應用的PPR弱毒疫苗雖然具有良好的效果，但不能區(qū)分自然感染和疫苗免疫，干擾PPR的血清學監(jiān)測。而標記疫苗（differentiate infected from vaccinatedanimals vaccine，DIVA疫苗）則可以彌補這一缺點，因此標記疫苗（DIVA疫苗）的研究具有重要的意義。 PPRV屬于副粘病毒科（Paramyxoviridae）麻疹病毒屬（Morbillivirus），基因組為不分節(jié)段的負鏈RNA，其核衣殼（nucleocapsid，N）蛋白是PPRV含量最豐富和免疫原性最強的結構蛋白，動物機體感染后可引起強烈的抗體反應進而產生高滴度抗體，該抗體雖不具有中和病毒的能力，但具有重要的診斷意義。... 

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【學位級別】：碩士

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摘要
Abstract
圖目錄
英文縮略表
第一章 文章綜述
    1.1 小反芻獸疫概述
        1.1.1 PPR 流行病學
        1.1.2 PPR 危害
    1.2 PPRV 生物學特性
        1.2.1 PPRV 形態(tài)結構
        1.2.2 PPRV 基因組結構特點
        1.2.3 PPRV N 蛋白
    1.3 PPRV 疫苗研究進展
        1.3.1 PPRV 疫苗研究
        1.3.2 PPRV 反向遺傳操作研究進展
    1.4 研究的目的和意義
第二章 試驗部分
    2.1 實驗材料
        2.1.1 病毒與細胞
        2.1.2 質粒
        2.1.3 試驗動物和高免血清
        2.1.4 主要試劑和儀器
        2.1.5 引物設計合成
    2.2 方法
        2.2.1 表達外源表位基因的重組病毒基因組全長 cDNA 的構建
        2.2.2 融合外源表位對 N 蛋白功能的影響
        2.2.3 表達融合外源表位 N 蛋白的重組病毒的拯救
        2.2.4 重組病毒的 RT-PCR 鑒定
        2.2.5 蛋白免疫印跡檢測
        2.2.6 間接免疫熒光試驗
        2.2.7 重組病毒的生長動力學分析
        2.2.8 重組病毒 rPPRV/GFP/5B19 的小鼠免疫試驗
    2.3 結果
        2.3.1 表達外源表位基因的重組病毒基因組全長 cDNA 的構建
        2.3.2 融合外源表位對 N 蛋白功能的影響
        2.3.3 表達融合外源表位重組病毒的拯救及 RT-PCR 鑒定
        2.3.4 蛋白免疫印跡檢測
        2.3.5 間接免疫熒光試驗
        2.3.6 重組病毒的生長動力學分析
        2.3.7 重組病毒 rPPRV/GFP/5B19 的小鼠免疫試驗結果
    2.4 討論
第三章 全文結論
參考文獻
附錄
致謝
作者簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]我國首例小反芻獸疫診斷報告[J]. 王志亮,包靜月,吳曉東,劉雨田,李林,劉佩蘭,趙永剛,劉春菊,肖肖.  中國動物檢疫. 2007(08)
[2]一步法實時定量RT-PCR檢測小反芻獸疫病毒方法的建立[J]. 包靜月,李林,王志亮,李金明,劉春菊,肖肖.  中國動物檢疫. 2007(08)



本文編號：3709667