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產(chǎn)抗菌脂肽GD菌株篩選及脂肽分離、鑒定與應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2022-12-05 00:54
  抗菌脂肽本質(zhì)上屬于抗菌肽的一種,是部分芽孢桿菌及非芽孢桿菌在生長繁殖過程中由細(xì)菌非核糖體產(chǎn)生的一類環(huán)狀脂肽化合物,具有抗菌范圍廣、抗菌效果好、不易產(chǎn)生耐藥性等諸多特點(diǎn),是一類綠色、安全、高效的抗生素替代品,目前,越來越多的科研工作者將研究方向轉(zhuǎn)移到此類抗菌物質(zhì)的研發(fā)上。本研究在核查分離保存的微生物資源時(shí),篩選并獲得了一株對病原菌具有明顯抑殺作用的枯草芽孢桿菌GD菌株,圍繞該菌株及其抗菌活性物質(zhì)進(jìn)行了一系列研究,包括對枯草芽孢桿菌GD菌株常規(guī)生理生化及16S rDNA基因鑒定;對產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)進(jìn)行了分離、純化、鑒定;同時(shí)對其作用機(jī)理及理化因素影響、安全評價(jià)、動(dòng)物試驗(yàn)和產(chǎn)業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)工藝等初步研究。研究結(jié)果表明:該菌株產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物具有良好的抑菌效果,是一類綠色環(huán)保、安全高效的抗菌脂肽類化合物。 1、為了獲得產(chǎn)抗菌物質(zhì)的芽孢桿菌菌株作為后續(xù)研究對象,本實(shí)驗(yàn)采用雞源大腸桿菌02作為指示菌,對研究所分離、保存的29株芽孢桿菌的代謝產(chǎn)物進(jìn)行了抑菌效果檢測,獲得了4株抑菌圈在15mm以上芽孢桿菌;在此基礎(chǔ)上,對其抗菌活性進(jìn)行了抑菌譜的測定及理化因素穩(wěn)定性試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)一株芽孢桿菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)對... 

【文章頁數(shù)】:107 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
文獻(xiàn)綜述
    前言
    1 抗菌脂肽與抗菌肽
    2 抗菌脂肽研究進(jìn)展(一)
        2.1 抗菌脂肽與產(chǎn)生菌株
        2.2 抗菌脂肽合成機(jī)制
    3 抗菌脂肽研究進(jìn)展(二)
        3.1 發(fā)酵工藝與分離純化
        3.2 抗菌脂肽結(jié)構(gòu)、特征
        3.3 脂肽化合物質(zhì)量指紋譜分析
        3.4 抗菌脂肽作用機(jī)理
    4 抗菌脂肽的應(yīng)用
        4.1 新型抗菌藥物
        4.2 新型飼料添加劑
    5 研究目的與主要內(nèi)容
        5.1 目的與意義
        5.2 主要內(nèi)容
    參考文獻(xiàn)
第一章 產(chǎn)抗菌物質(zhì)GD菌株鑒定及理化因素對其抗菌活性影響
    1.1 材料與方法
        1.1.1 材料
        1.1.2 方法
    1.2 結(jié)果與分析
        1.2.1 菌株篩選
        1.2.2 理化因素對GD菌株代謝產(chǎn)物抑菌效果影響
        1.2.3 GD菌株鑒定
    1.3 討論
    參考文獻(xiàn)
第二章 GD菌株產(chǎn)脂肽化合物分離、純化與鑒定
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 GD菌株抗菌物質(zhì)TLC層析結(jié)果
        2.2.2 GD菌株脂肽HPLC分離純化結(jié)果
        2.2.3 菌株GD脂肽粗提物幾個(gè)主峰的含量比較
        2.2.4 菌株GD脂肽類化合物的相對分子質(zhì)量分析
    2.3 討論
    參考文獻(xiàn)
第三章 GD菌株產(chǎn)脂肽化合物體外抑菌效果研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果和分析
        3.2.1 MIC測定結(jié)果
        3.2.2 對雞源大腸桿菌O_2生長曲線的影響
        3.2.3 對雞源大腸桿菌O_2菌體細(xì)胞膜通透性的影響
        3.2.4 對雞源大腸桿菌O_2顯微特征的影響觀察
        3.2.5 對雞源大腸桿菌O_2細(xì)胞代謝的影響
    3.3 討論
    參考文獻(xiàn)
第四章 脂肽化合物安全評價(jià)及動(dòng)物應(yīng)用效果評價(jià)
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 急性毒性
        4.2.2 亞急性毒性試驗(yàn)
    4.3 討論
    參考文獻(xiàn)
第五章 抗菌脂肽發(fā)酵工藝的初步研究
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 培養(yǎng)基成分篩選結(jié)果
        5.2.2 發(fā)酵工藝參數(shù)篩選結(jié)果
        5.2.3 擴(kuò)大發(fā)酵規(guī)模驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
    5.3 討論
    參考文獻(xiàn)
研究成果及創(chuàng)新
英文縮略詞
在讀博士學(xué)位期間發(fā)表的文章
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]納豆菌抗菌脂肽對副溶血弧菌的抑菌機(jī)理[J]. 劉喚明,孫力軍,王雅玲,徐德峰,劉陽,陳宏,唐曉山.  食品科學(xué). 2012(15)
[2]納豆菌脂肽對金黃色葡萄球菌抑菌機(jī)理的研究[J]. 劉喚明,孫力軍,王雅玲,徐德峰,劉陽,陳宏,唐曉山.  食品工業(yè)科技. 2012(11)
[3]枯草芽孢桿菌對植物病害生物防治的作用機(jī)理[J]. 趙新林,趙思峰.  湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(15)
[4]Bacillus amyloliquefaciens ES-2發(fā)酵產(chǎn)抗菌脂肽消泡劑的篩選及脂肽的提取和純化[J]. 魏浩,陸兆新,呂鳳霞,翟亞楠,郭昊,郝慧,別小妹.  中國生物工程雜志. 2011(02)
[5]枯草芽孢桿菌抗菌脂肽對嗜水氣單胞菌抑菌效果[J]. 楊麗莉,呂鳳霞,別小妹,何義進(jìn),王恬,陸兆新.  食品科學(xué). 2011(01)
[6]抗菌脂肽對肉雞生產(chǎn)性能和免疫機(jī)能的影響[J]. 都海明,戚廣州,王建軍,張旭暉,陸兆新,王恬.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2010(05)
[7]抗菌肽的研究與應(yīng)用[J]. 鄭加蘭.  江西飼料. 2010(01)
[8]培養(yǎng)基對解淀粉芽孢桿菌ES-2菌株產(chǎn)抗菌脂肽的影響[J]. 孫力軍,陸兆新,別小妹,呂鳳霞,方傳記.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(10)
[9]淀粉液化芽孢桿菌抗菌脂肽發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件的優(yōu)化[J]. 方傳記,陸兆新,孫力軍,別小妹,呂鳳霞,黃現(xiàn)青.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(02)
[10]抗菌肽的特性及其在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 胡國良,黃興國,楊承劍,王超,范志勇.  中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2007(06)

博士論文
[1]脂肽生物表面活性劑的發(fā)酵生產(chǎn)及其結(jié)構(gòu)、性質(zhì)研究[D]. 丁立孝.浙江大學(xué) 2004



本文編號:3709338

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