仔豬腹瀉是仔豬消化功能紊亂的綜合癥狀，會引發(fā)繼發(fā)感染，致使仔豬抵抗力降低，死亡率增高，嚴重危害著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。本研究以健康和腹瀉仔豬糞便為研究對象，利用傳統(tǒng)培養(yǎng)技術(shù)，對仔豬腸道總細菌，雙歧桿菌，乳酸桿菌，腸球菌，大腸桿菌進行計數(shù)；利用PCR-DGGE技術(shù)對腸道菌群和乳酸桿菌菌群多樣性進行分析；并從健康仔豬的新鮮糞便中分離篩選乳酸桿菌。同時對所篩選菌株進行耐酸，耐膽鹽，產(chǎn)乳酸能力和對大腸桿菌、沙門氏菌有無抑制作用進行檢測，篩選出性能優(yōu)良的益生乳酸桿菌。 1、腹瀉組與健康組相比，腸道菌群中的總細菌數(shù)，雙歧桿菌數(shù)，乳酸桿菌數(shù)均有下降，其中21日齡仔豬腸道總細菌數(shù)差異極顯著，21日齡仔豬腸道乳酸桿菌數(shù)以及7、21日齡仔豬腸道雙歧桿菌數(shù)差異顯著。大腸桿菌數(shù)，腹瀉組較健康組均有上升，但差異不顯著。腸球菌數(shù)，7日齡仔豬腹瀉組較健康組有所上升，其它日齡組仔豬腹瀉組較健康組均有所下降，但差異都不顯著。 2、仔豬腸道菌群復雜程度與菌群失調(diào)嚴重程度關(guān)系密切且與日齡有關(guān)，不同日齡健康仔豬腸道菌群的DGGE指紋圖譜隨著日齡的增加逐漸變得復雜，聚類分析表明斷奶前后基本分為兩個族。腹瀉組DGGE指紋圖譜... 

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 腸道微生物與宿主消化道的關(guān)系
    1.2 動物腸道正常菌群的功能
        1.2.1 腸道菌群對腸道發(fā)育的影響
        1.2.2 營養(yǎng)與消化功能
        1.2.3 腸道菌群的生物拮抗作用
        1.2.4 免疫作用
    1.3 研究腸道菌群的分子生物學新技術(shù)
        1.3.1 變性/溫度梯度凝膠電泳
        1.3.2 其它分子生物學技術(shù)
    1.4 仔豬腸道菌群形成
    1.5 益生乳酸桿菌對仔豬腸道菌群的影響
    1.6 本研究的背景及意義
第二章 健康與腹瀉仔豬腸道菌群差異研究
    2.1 材料
        2.1.1 儀器設(shè)備
        2.1.2 藥品、酶及引物
        2.1.3 試劑
    2.2 方法
        2.2.1 樣品采集
        2.2.2 細菌計數(shù)
        2.2.3 仔豬腸道菌群的 PCR-DGGE 菌群多樣性分析方法的建立
        2.2.4 仔豬腸道菌群 DGGE 指紋圖譜分析
        2.2.5 仔豬腸道乳酸桿菌的 PCR-DGGE 菌群多樣性分析方法的建立
        2.2.6 仔豬腸道乳酸桿菌 DGGE 指紋圖譜分析
        2.2.7 乳酸桿菌 DGGE 指紋圖譜特殊條帶割膠測序
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 細菌計數(shù)結(jié)果
        2.3.2 腸道總細菌 DNA 的提取
        2.3.3 樣品中總細菌的 16S rDNA PCR 擴增及瓊脂糖凝膠電泳檢測
        2.3.4 健康和腹瀉仔豬腸道菌群 DGGE 指紋圖譜分析結(jié)果
        2.3.5 不同豬場健康和腹瀉仔豬腸道菌群 DGGE 及 DGGE 指紋圖譜分析結(jié)果
        2.3.6 仔豬腸道乳酸桿菌 16S rDNA 套式 PCR 擴增及瓊脂糖凝膠電泳檢測
        2.3.7 不同日齡健康和腹瀉仔豬腸道乳酸桿菌 DGGE 指紋圖譜分析結(jié)果
        2.3.8 目的條帶割膠、回收、克隆、測序結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 豬源乳酸桿菌的分離鑒定及篩選
    3.1 材料
        3.1.1 儀器設(shè)備
        3.1.2 藥品
        3.1.3 試劑
        3.1.4 指示菌
    3.2 方法
        3.2.1 樣品的采集
        3.2.2 乳酸桿菌的分離、鏡檢和純化
        3.2.3 乳酸桿菌抗逆性篩選
        3.2.4 乳酸桿菌的屬、種生化鑒定
        3.2.5 乳酸桿菌益生特性研究
        3.2.6 菌種的保存
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 分離乳酸桿菌結(jié)果
        3.3.2 乳酸桿菌耐酸性試驗結(jié)果
        3.3.3 乳酸桿菌耐膽鹽試驗結(jié)果
        3.3.4 乳酸桿菌屬、種的生化鑒定
        3.3.5 乳酸桿菌產(chǎn)乳酸試驗結(jié)果
        3.3.6 乳酸桿菌體外拮抗試驗結(jié)果
    3.4 討論與小結(jié)
第四章 全文結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3708058