MHC不同基因型哈薩克綿羊人工感染細粒棘球絳蟲蟲卵后小腸、肝臟差異表達基因的篩選
發(fā)布時間:2022-12-04 08:28
細粒棘球蚴病,俗稱包蟲病,是細粒棘球絳蟲的幼蟲寄生于人、綿羊等中間宿主所致的一種人畜共患病。綿羊是細粒棘球絳蟲最適宜的中間宿主,感染包蟲病后生長發(fā)育緩慢,其毛、肉和奶的產(chǎn)量均嚴重受到影響,且患病綿羊肝、肺不能食用。最新調(diào)查顯示,新疆存欄綿羊4000多萬只,飼養(yǎng)數(shù)達6000多萬只,而包蟲病患病率達到50%,這給畜牧業(yè)的健康發(fā)展以及廣大農(nóng)牧民的生產(chǎn)創(chuàng)收帶來嚴重影響。 本研究前期做了大量的關(guān)于綿羊主要組織相容性復(fù)合體基因(MHC基因)與包蟲病抗性、易感性的相關(guān)研究,對新疆三個主要綿羊品種:中國美利奴羊、多浪羊及哈薩克羊MHC-DRB1基因外顯子2進行PCR-RFLP檢測,成功篩選出哈薩克綿羊與包蟲病抗性相關(guān)的單倍型MHC-DRB1MvaIbc-SacIIab-Hin1Iab,之后對帶有該單倍型的綿羊(抗性組)和不帶該單倍型的綿羊(非抗性組)進行人工攻蟲,發(fā)現(xiàn)抗性組綿羊包蟲病發(fā)病率比非抗性組綿羊低且差異顯著。在此基礎(chǔ)上,本文著重對前期篩選的具有包蟲病抗性和非抗性的哈薩克綿羊的感染機制及其差異進行分析。 依據(jù)前期研究,本研究采用PCR-RFLP方法對250只哈薩克綿羊進行了相應(yīng)抗...
【文章頁數(shù)】:124 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
縮略詞表
前言
第一篇 文獻綜述
第一章 家畜棘球蚴病 ( 包蟲病 ) 概述
1. 病原學(xué)
2. 診斷
2.1 中間宿主(家畜)棘球蚴病的診斷
2.1.1 活體檢驗
2.1.2 宰后剖檢
2.2 終末宿主棘球絳蟲成蟲的診斷
3. 流行病學(xué)
3.1 世界范圍的流行
3.2 我國包蟲病流行情況
3.3 新疆包蟲病流行情況
4.包蟲病的防控現(xiàn)狀
4.1 世界包蟲病的防控現(xiàn)狀
4.2 我國包蟲病的防控現(xiàn)狀
4.3 新疆包蟲病的防控現(xiàn)狀
5. 小結(jié)與展望
第二章 中間宿主感染包蟲病的免疫應(yīng)答研究進展
1. 宿主的先天性免疫
1.1 動物對包蟲病的先天性免疫受遺傳因素的影響
1.2 人感染包蟲病后的先天抗性與易感性受遺傳因素的影響
2. 宿主的后天免疫
2.1 宿主感染包蟲病后早期免疫應(yīng)答
2.1.1 原發(fā)性感染
2.1.2 繼發(fā)性感染
2.2 宿主感染包蟲病后后期的免疫應(yīng)答
2.2.1 包囊形成期
2.2.2 宿主抑制包囊的形成
3. 小結(jié)與展望
第三章 基因芯片及其在寄生蟲病上的研究應(yīng)用
1. 基因芯片概述
2. 基因芯片在寄生蟲病上的研究應(yīng)用
2.1 基因芯片在瘧原蟲上的研究進展
2.2 基因芯片在血吸蟲病上的研究進展
2.3 基因芯片在包蟲病上的研究進展
2.4 基因芯片在綿羊寄生蟲病上的研究進展
3. 小結(jié)
第二篇 試驗研究
第四章 哈薩克綿羊不同MHC基因型個體人工感染細粒棘球絳蟲蟲卵后早期機體免疫指標的差異分析
1. 材料與方法
1.1 實驗材料
1.1.1 實驗動物及病變臟器
1.1.2 試劑與儀器
1.1.3 試劑的配制
1.2 實驗方法
1.2.1 哈薩克綿羊MHC-DRB1exon2包蟲病抗性、非抗性基因型個體的篩選
1.2.2 實驗綿羊人工感染細粒棘球絳蟲動物模型的建立
1.2.3 哈薩克綿羊不同MHC-DRB1基因型個體人工感染細粒棘球絳蟲后早期機體免疫指標的測定
1.3 數(shù)據(jù)處理
1.3.1 哈薩克綿羊MHC-DRB1exon2包蟲病抗性、非抗性基因型個體的篩選
1.3.2 綿羊人工感染細粒棘球絳蟲后早期免疫指標的數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析
2. 實驗結(jié)果與分析
2.1 MHC-DRB1exon2包蟲病抗性、非抗性相關(guān)的哈薩克綿羊個體篩選
2.2 人工模型的建立
2.3 哈薩克綿羊不同MHC-DRB1基因型個體人工感染細粒棘球絳蟲后早期機體免疫指標差異分析
2.3.1 抗體的差異分析
2.3.2 細胞因子的差異分析
2.3.3 趨化因子的差異分析
3. 討論
3.1 抗體的差異分析
3.2 細胞因子的差異分析
3.3 趨化因子的差異分析
4. 小結(jié)
第五章 MHC不同基因型綿羊感染細粒棘球絳蟲后小腸差異表達基因的篩選
1. 材料與方法
1.1 實驗材料
1.1.1 實驗動物
1.1.2 小腸采集
1.1.3 試劑配制
1.2 方法
1.2.1 組織學(xué)切片的制作
1.2.2 免疫組化實驗步驟
1.2.3 小腸組織RNA提取
1.2.4 總RNA純化
1.2.5 基因芯片雜交實驗
1.2.6 熒光定量對基因芯片檢測結(jié)果的驗證
2. 結(jié)果與分析
2.1 MHC免疫組化切片觀測結(jié)果
2.2 總RNA提取
2.3 芯片實驗
2.3.1 基因芯片質(zhì)控參數(shù)及檢出率
2.3.2 差異表達統(tǒng)計
2.3.3 GO富集分析
2.3.4 KEGG代謝通路分析結(jié)果
2.4 熒光定量PCR結(jié)果統(tǒng)計
2.4.1 熒光定量溶解曲線檢測
2.4.2 熒光定量柱狀圖分析
3 討論
3.1 免疫組化結(jié)果討論
3.2 基因芯片結(jié)果分析討論
第六章 MHC不同基因型綿羊感染細粒棘球絳蟲蟲卵后肝臟差異表達基因的篩選
1. 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實驗動物
1.1.2 肝臟采集
1.2 方法
1.2.1 肝臟組織RNA提取
1.2.2 基因芯片檢測
1.2.3 熒光定量PCR對基因芯片檢測結(jié)果驗證
2. 結(jié)果與分析
2.1 綿羊感染細粒棘球絳蟲后各時間點的感染結(jié)果
2.2 總RNA提取
2.3 基因芯片質(zhì)控參數(shù)及檢出率
2.4 綿羊感染細粒棘球絳蟲后肝臟組織差異表達基因統(tǒng)計
2.4.1 綿羊感染細粒棘球絳蟲后8周肝臟組織差異表達基因統(tǒng)計
2.4.2 Go富集結(jié)果
2.4.3 KEGG結(jié)果與分析
2.5 綿羊感染細粒棘球絳蟲后24周結(jié)果統(tǒng)計與分析
2.5.1 綿羊感染細粒棘球絳蟲后24周差異表達基因統(tǒng)計
2.5.2 Go富集結(jié)果
2.5.3 KEGG結(jié)果
2.6 熒光定量PCR結(jié)果統(tǒng)計
2.6.1 熒光定量溶解曲線檢測
2.6.2 熒光定量柱狀圖分析
3. 討論
3.1 綿羊感染細粒棘球絳蟲后8周肝臟組織部分差異表達基因分析
3.2 綿羊感染細粒棘球絳蟲后24周肝臟組織部分差異表達基因分析
全文結(jié)論及創(chuàng)新點
全文結(jié)論
創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
附表1 MHC不同基因型哈薩克綿羊人工感染細粒棘球絳蟲后小腸差異表達基因
附表2 MHC不同基因型哈薩克綿羊人工感染細粒棘球絳蟲8周后肝臟組織差異表達基因
附表3 MHC不同基因型哈薩克綿羊人工感染細粒棘球絳蟲后24周肝臟組織差異表達基因
致謝
作者簡介
導(dǎo)師評閱表
【參考文獻】:
期刊論文
[1]新疆包蟲病流行現(xiàn)狀與防控對策[J]. 李曉軍,王文明,趙莉,石保新,張文寶,閆昊,王光雷,張?zhí)m江,張旭,劉志強,努爾,古努爾,米曉云,張壯志. 草食家畜. 2012(04)
[2]兩種MHC-DRB1單倍型哈薩克綿羊細粒棘球六鉤蚴侵染期小腸消減文庫的構(gòu)建[J]. 杜鑫立,惠文巧,趙博,郭玉強,馬軍德,馬世俊,木葉沙爾·巴吐爾,劉賢俠,賈斌. 石河子大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2012(05)
[3]哈薩克綿羊肝包蟲病的B超圖像分析與診斷[J]. 布威麥爾耶姆·阿卜來提,趙博,惠文巧,劉賢俠,杜鑫立,高樹,申紅,賈斌. 石河子大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2012(04)
[4]棘球絳蟲分子分類學(xué)研究進展[J]. 郝桂英. 中國畜牧獸醫(yī). 2012(05)
[5]四川省家畜包蟲病流行病學(xué)調(diào)查報告[J]. 郭莉,陽愛國,張壯志,侯巍,陳冬,文豪,毛光瓊,周建玉,吳宣. 中國獸醫(yī)雜志. 2012(02)
[6]中國新疆地區(qū)維吾爾族人群殺傷細胞免疫球蛋白樣受體基因多態(tài)性研究[J]. 林國躍,王彥斌,張和平,武陽,孟偉. 中國組織工程研究. 2012(05)
[7]NK細胞受體及作用機制[J]. 馬茜,葉鳴宇,汪洋. 現(xiàn)代免疫學(xué). 2011(06)
[8]胃癌患者外周血微轉(zhuǎn)移指標的檢測及意義[J]. 費建東,聶雙發(fā),胡曉峰,梁峰,郭飛,安永鑄. 中國老年學(xué)雜志. 2011(22)
[9]四川省家畜包蟲病防治現(xiàn)狀及防控對策探討[J]. 郭莉,陽愛國,侯巍,陳冬,文豪,毛光瓊. 草業(yè)與畜牧. 2011(11)
[10]人類補體C8結(jié)構(gòu)與功能研究進展[J]. 劉麗莎,鐘天鷹. 醫(yī)學(xué)綜述. 2011(16)
博士論文
[1]MiR-376a在肝細胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機制研究[D]. 鄭永霞.第二軍醫(yī)大學(xué) 2012
[2]不同終末宿主對日本血吸蟲感染適宜性的差異分析[D]. 楊健美.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[3]中國美利奴和哈薩克綿羊MHC-DRB1外顯子2多態(tài)性與包蟲病抗性研究[D]. 李仁燕.石河子大學(xué) 2011
[4]新疆多浪羊和中國美利奴羊MHC-DRB1、DQB1基因SSCP多態(tài)性與包蟲病抗性研究[D]. 杜迎春.石河子大學(xué) 2010
[5]我國內(nèi)蒙古東北部三種泡狀棘球絳蟲感染引起宿主體內(nèi)基因差異表達的研究[D]. 程喆.廈門大學(xué) 2008
[6]中國美利奴羊和多浪羊DRB1、DQB1基因多態(tài)性與包蟲病抗性關(guān)聯(lián)分析[D]. 申紅.石河子大學(xué) 2008
[7]IFN-α刺激相關(guān)細胞蛋白TIIMPSC和S24v2的功能分析[D]. 劉龍丁.中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2007
碩士論文
[1]SARS-CoV N蛋白通過AHSG介導(dǎo)對小鼠糖脂代謝的影響[D]. 張春梅.安徽大學(xué) 2012
[2]PLAG1和PLA2G2A在肝癌中的異常表達[D]. 洪雙雙.鄭州大學(xué) 2011
[3]AHSG基因的原核表達及其在原發(fā)性肝癌診斷中的價值[D]. 任鵬飛.鄭州大學(xué) 2010
[4]泡球蚴感染小鼠肝臟基因表達譜的分析[D]. 謝文娟.新疆大學(xué) 2010
[5]VCL、PPA1、AR在前列腺癌中的表達及相關(guān)性研究[D]. 朱利勇.中南大學(xué) 2009
[6]細粒棘球蚴Eg95基因的克隆、原核表達及抗體制備[D]. 賈如.合肥工業(yè)大學(xué) 2009
本文編號:3707924
【文章頁數(shù)】:124 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
縮略詞表
前言
第一篇 文獻綜述
第一章 家畜棘球蚴病 ( 包蟲病 ) 概述
1. 病原學(xué)
2. 診斷
2.1 中間宿主(家畜)棘球蚴病的診斷
2.1.1 活體檢驗
2.1.2 宰后剖檢
2.2 終末宿主棘球絳蟲成蟲的診斷
3. 流行病學(xué)
3.1 世界范圍的流行
3.2 我國包蟲病流行情況
3.3 新疆包蟲病流行情況
4.包蟲病的防控現(xiàn)狀
4.1 世界包蟲病的防控現(xiàn)狀
4.2 我國包蟲病的防控現(xiàn)狀
4.3 新疆包蟲病的防控現(xiàn)狀
5. 小結(jié)與展望
第二章 中間宿主感染包蟲病的免疫應(yīng)答研究進展
1. 宿主的先天性免疫
1.1 動物對包蟲病的先天性免疫受遺傳因素的影響
1.2 人感染包蟲病后的先天抗性與易感性受遺傳因素的影響
2. 宿主的后天免疫
2.1 宿主感染包蟲病后早期免疫應(yīng)答
2.1.1 原發(fā)性感染
2.1.2 繼發(fā)性感染
2.2 宿主感染包蟲病后后期的免疫應(yīng)答
2.2.1 包囊形成期
2.2.2 宿主抑制包囊的形成
3. 小結(jié)與展望
第三章 基因芯片及其在寄生蟲病上的研究應(yīng)用
1. 基因芯片概述
2. 基因芯片在寄生蟲病上的研究應(yīng)用
2.1 基因芯片在瘧原蟲上的研究進展
2.2 基因芯片在血吸蟲病上的研究進展
2.3 基因芯片在包蟲病上的研究進展
2.4 基因芯片在綿羊寄生蟲病上的研究進展
3. 小結(jié)
第二篇 試驗研究
第四章 哈薩克綿羊不同MHC基因型個體人工感染細粒棘球絳蟲蟲卵后早期機體免疫指標的差異分析
1. 材料與方法
1.1 實驗材料
1.1.1 實驗動物及病變臟器
1.1.2 試劑與儀器
1.1.3 試劑的配制
1.2 實驗方法
1.2.1 哈薩克綿羊MHC-DRB1exon2包蟲病抗性、非抗性基因型個體的篩選
1.2.2 實驗綿羊人工感染細粒棘球絳蟲動物模型的建立
1.2.3 哈薩克綿羊不同MHC-DRB1基因型個體人工感染細粒棘球絳蟲后早期機體免疫指標的測定
1.3 數(shù)據(jù)處理
1.3.1 哈薩克綿羊MHC-DRB1exon2包蟲病抗性、非抗性基因型個體的篩選
1.3.2 綿羊人工感染細粒棘球絳蟲后早期免疫指標的數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析
2. 實驗結(jié)果與分析
2.1 MHC-DRB1exon2包蟲病抗性、非抗性相關(guān)的哈薩克綿羊個體篩選
2.2 人工模型的建立
2.3 哈薩克綿羊不同MHC-DRB1基因型個體人工感染細粒棘球絳蟲后早期機體免疫指標差異分析
2.3.1 抗體的差異分析
2.3.2 細胞因子的差異分析
2.3.3 趨化因子的差異分析
3. 討論
3.1 抗體的差異分析
3.2 細胞因子的差異分析
3.3 趨化因子的差異分析
4. 小結(jié)
第五章 MHC不同基因型綿羊感染細粒棘球絳蟲后小腸差異表達基因的篩選
1. 材料與方法
1.1 實驗材料
1.1.1 實驗動物
1.1.2 小腸采集
1.1.3 試劑配制
1.2 方法
1.2.1 組織學(xué)切片的制作
1.2.2 免疫組化實驗步驟
1.2.3 小腸組織RNA提取
1.2.4 總RNA純化
1.2.5 基因芯片雜交實驗
1.2.6 熒光定量對基因芯片檢測結(jié)果的驗證
2. 結(jié)果與分析
2.1 MHC免疫組化切片觀測結(jié)果
2.2 總RNA提取
2.3 芯片實驗
2.3.1 基因芯片質(zhì)控參數(shù)及檢出率
2.3.2 差異表達統(tǒng)計
2.3.3 GO富集分析
2.3.4 KEGG代謝通路分析結(jié)果
2.4 熒光定量PCR結(jié)果統(tǒng)計
2.4.1 熒光定量溶解曲線檢測
2.4.2 熒光定量柱狀圖分析
3 討論
3.1 免疫組化結(jié)果討論
3.2 基因芯片結(jié)果分析討論
第六章 MHC不同基因型綿羊感染細粒棘球絳蟲蟲卵后肝臟差異表達基因的篩選
1. 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實驗動物
1.1.2 肝臟采集
1.2 方法
1.2.1 肝臟組織RNA提取
1.2.2 基因芯片檢測
1.2.3 熒光定量PCR對基因芯片檢測結(jié)果驗證
2. 結(jié)果與分析
2.1 綿羊感染細粒棘球絳蟲后各時間點的感染結(jié)果
2.2 總RNA提取
2.3 基因芯片質(zhì)控參數(shù)及檢出率
2.4 綿羊感染細粒棘球絳蟲后肝臟組織差異表達基因統(tǒng)計
2.4.1 綿羊感染細粒棘球絳蟲后8周肝臟組織差異表達基因統(tǒng)計
2.4.2 Go富集結(jié)果
2.4.3 KEGG結(jié)果與分析
2.5 綿羊感染細粒棘球絳蟲后24周結(jié)果統(tǒng)計與分析
2.5.1 綿羊感染細粒棘球絳蟲后24周差異表達基因統(tǒng)計
2.5.2 Go富集結(jié)果
2.5.3 KEGG結(jié)果
2.6 熒光定量PCR結(jié)果統(tǒng)計
2.6.1 熒光定量溶解曲線檢測
2.6.2 熒光定量柱狀圖分析
3. 討論
3.1 綿羊感染細粒棘球絳蟲后8周肝臟組織部分差異表達基因分析
3.2 綿羊感染細粒棘球絳蟲后24周肝臟組織部分差異表達基因分析
全文結(jié)論及創(chuàng)新點
全文結(jié)論
創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
附表1 MHC不同基因型哈薩克綿羊人工感染細粒棘球絳蟲后小腸差異表達基因
附表2 MHC不同基因型哈薩克綿羊人工感染細粒棘球絳蟲8周后肝臟組織差異表達基因
附表3 MHC不同基因型哈薩克綿羊人工感染細粒棘球絳蟲后24周肝臟組織差異表達基因
致謝
作者簡介
導(dǎo)師評閱表
【參考文獻】:
期刊論文
[1]新疆包蟲病流行現(xiàn)狀與防控對策[J]. 李曉軍,王文明,趙莉,石保新,張文寶,閆昊,王光雷,張?zhí)m江,張旭,劉志強,努爾,古努爾,米曉云,張壯志. 草食家畜. 2012(04)
[2]兩種MHC-DRB1單倍型哈薩克綿羊細粒棘球六鉤蚴侵染期小腸消減文庫的構(gòu)建[J]. 杜鑫立,惠文巧,趙博,郭玉強,馬軍德,馬世俊,木葉沙爾·巴吐爾,劉賢俠,賈斌. 石河子大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2012(05)
[3]哈薩克綿羊肝包蟲病的B超圖像分析與診斷[J]. 布威麥爾耶姆·阿卜來提,趙博,惠文巧,劉賢俠,杜鑫立,高樹,申紅,賈斌. 石河子大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2012(04)
[4]棘球絳蟲分子分類學(xué)研究進展[J]. 郝桂英. 中國畜牧獸醫(yī). 2012(05)
[5]四川省家畜包蟲病流行病學(xué)調(diào)查報告[J]. 郭莉,陽愛國,張壯志,侯巍,陳冬,文豪,毛光瓊,周建玉,吳宣. 中國獸醫(yī)雜志. 2012(02)
[6]中國新疆地區(qū)維吾爾族人群殺傷細胞免疫球蛋白樣受體基因多態(tài)性研究[J]. 林國躍,王彥斌,張和平,武陽,孟偉. 中國組織工程研究. 2012(05)
[7]NK細胞受體及作用機制[J]. 馬茜,葉鳴宇,汪洋. 現(xiàn)代免疫學(xué). 2011(06)
[8]胃癌患者外周血微轉(zhuǎn)移指標的檢測及意義[J]. 費建東,聶雙發(fā),胡曉峰,梁峰,郭飛,安永鑄. 中國老年學(xué)雜志. 2011(22)
[9]四川省家畜包蟲病防治現(xiàn)狀及防控對策探討[J]. 郭莉,陽愛國,侯巍,陳冬,文豪,毛光瓊. 草業(yè)與畜牧. 2011(11)
[10]人類補體C8結(jié)構(gòu)與功能研究進展[J]. 劉麗莎,鐘天鷹. 醫(yī)學(xué)綜述. 2011(16)
博士論文
[1]MiR-376a在肝細胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機制研究[D]. 鄭永霞.第二軍醫(yī)大學(xué) 2012
[2]不同終末宿主對日本血吸蟲感染適宜性的差異分析[D]. 楊健美.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[3]中國美利奴和哈薩克綿羊MHC-DRB1外顯子2多態(tài)性與包蟲病抗性研究[D]. 李仁燕.石河子大學(xué) 2011
[4]新疆多浪羊和中國美利奴羊MHC-DRB1、DQB1基因SSCP多態(tài)性與包蟲病抗性研究[D]. 杜迎春.石河子大學(xué) 2010
[5]我國內(nèi)蒙古東北部三種泡狀棘球絳蟲感染引起宿主體內(nèi)基因差異表達的研究[D]. 程喆.廈門大學(xué) 2008
[6]中國美利奴羊和多浪羊DRB1、DQB1基因多態(tài)性與包蟲病抗性關(guān)聯(lián)分析[D]. 申紅.石河子大學(xué) 2008
[7]IFN-α刺激相關(guān)細胞蛋白TIIMPSC和S24v2的功能分析[D]. 劉龍丁.中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2007
碩士論文
[1]SARS-CoV N蛋白通過AHSG介導(dǎo)對小鼠糖脂代謝的影響[D]. 張春梅.安徽大學(xué) 2012
[2]PLAG1和PLA2G2A在肝癌中的異常表達[D]. 洪雙雙.鄭州大學(xué) 2011
[3]AHSG基因的原核表達及其在原發(fā)性肝癌診斷中的價值[D]. 任鵬飛.鄭州大學(xué) 2010
[4]泡球蚴感染小鼠肝臟基因表達譜的分析[D]. 謝文娟.新疆大學(xué) 2010
[5]VCL、PPA1、AR在前列腺癌中的表達及相關(guān)性研究[D]. 朱利勇.中南大學(xué) 2009
[6]細粒棘球蚴Eg95基因的克隆、原核表達及抗體制備[D]. 賈如.合肥工業(yè)大學(xué) 2009
本文編號:3707924
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