豬流行性腹瀉病毒（Porcine Epidemic Diarrhea Virus, PEDV）是引發(fā)豬流行性腹瀉（Porcine Epidemic Diarrhea, PED）的原因。其屬于冠狀病毒科，冠狀病毒屬。PED對于不同年齡段及不同品種的豬都容易感染，是豬的一種擁有高度接觸性的毀滅性的傳染病，以哺乳仔豬最為嚴(yán)重，死亡率可達(dá)100%。其主要的臨床癥狀以食欲不振、水樣腹瀉、嘔吐、脫水，最后的酸中毒為基本特征。該病給養(yǎng)豬業(yè)形成了極度嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，在我國及世界各養(yǎng)豬國家普遍分布。近年來，本病在我省發(fā)生率明顯升高，因此，本研究對江西省不同地區(qū)的豬場進(jìn)行PEDV感染及流行情況進(jìn)行調(diào)查，并對流行毒株序列進(jìn)行相關(guān)分析。 本實驗利用MEGA5.0比較GenBank上所提供的PEDV-S基因序列，查找出其中最保守的序列，再應(yīng)用DNAStar軟件中的PrimemSelect按引物設(shè)計原則設(shè)計出一對引物，擴(kuò)增長度為1139bp。通過條件優(yōu)化反應(yīng)，首先建立PEDV-S基因的RT-PCR擴(kuò)增方法，結(jié)果退火溫度以57.9℃條件為最優(yōu)；利用該法對收集的134份江西地區(qū)疑似仔豬病毒性腹瀉的糞便或小腸組織... 

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
Abstract
第一部分：文獻(xiàn)綜述
    1.1 豬流行性腹瀉病毒的研究進(jìn)展
        1.1.1 病毒的分類和形態(tài)特征
        1.1.2 病毒的理化特性
        1.1.3 PEDV 的分子生物學(xué)特性
        1.1.4 PEDV 的致病性
    1.2 豬流行性腹瀉病診斷方法的研究進(jìn)展
        1.2.1 病毒的分離與鑒定
        1.2.2 微量血清中和實驗
        1.2.3 免疫熒光法
        1.2.4 免疫電鏡法
        1.2.5 RT-PCR 法
        1.2.6 ELISA 法
    1.3 豬流行性腹瀉的預(yù)防和治療
    1.4 本實驗研究的目的和意義
第二部分 豬流行性腹瀉病毒 S 基因 RT-PCR 擴(kuò)增方法建立
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 PEDV RT-PCR 反應(yīng)最適退火溫度的確定
        2.2.2 引物濃度范圍的確定
        2.2.3 敏感性實驗
        2.2.4 特異性實驗
        2.2.5 臨床樣品的檢測結(jié)果
    2.3. 小結(jié)與討論
第三部分 豬流行性腹瀉病毒的分子流行病學(xué)調(diào)查
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 PEDV S 基因的 RT-PCR 擴(kuò)增結(jié)果：
        3.2.2 PCR 產(chǎn)物的克隆與鑒定
        3.2.3 測序結(jié)果與分析
    3.3 小結(jié)與討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3691257