試驗(yàn)旨在探究染色質(zhì)重建因子BRG1（Brahma-related gene1）介導(dǎo)異亮氨酸（Isoleucine,Ile）在奶牛乳腺上皮細(xì)胞中影響乳合成分子機(jī)理。在細(xì)胞中添加不同濃度Ile,采用甘油三酯試劑盒、脂滴染色檢測奶牛乳腺上皮細(xì)胞（Bovine mammary epithelial cells,BMECs）中乳脂肪含量變化,Western blot檢測乳蛋白含量變化及乳合成相關(guān)信號通路分子（S6K1和SREBP-1c）表達(dá)水平變化;添加磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制劑LY294002與最適濃度Ile后,檢測乳合成調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白表達(dá);檢測添加最適濃度Ile同時敲低BRG1對乳蛋白、乳脂肪合成相關(guān)信號通路分子影響。結(jié)果表明,Ile以劑量依賴性方式促進(jìn)BMECs乳合成。BRG1正向調(diào)控S6K1磷酸化和SREBP-1c表達(dá)。Ile顯著上調(diào)BRG1蛋白水平,而抑制PI3K途徑后BRG1蛋白水平顯著下降,且Western blot結(jié)果顯示添加Ile通過PI3K途徑調(diào)控S6K1磷酸化和SREBP-1c蛋白表達(dá)。綜上,染色質(zhì)重建因子BRG1可介導(dǎo)Ile通過調(diào)控S6K1磷酸化和SREBP-1c表... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑與儀器
    1.2 材料
    1.3 Ile對BMECs乳合成調(diào)節(jié)及其相關(guān)信號通路的影響
        1.3.1 Western blot檢測
        1.3.2 甘油三酯檢測
        1.3.3 脂滴染色
    1.4 Ile介導(dǎo)BRG1對乳蛋白、乳脂肪及其相關(guān)信號調(diào)節(jié)分子的影響
    1.5 PI3K對乳合成相關(guān)調(diào)節(jié)信號通路的影響
    1.6 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 Ile對BMECs乳合成的調(diào)節(jié)
    2.2 Ile對BMECs乳合成相關(guān)信號分子途徑的影響
    2.3 干擾BRG1對乳蛋白和乳脂肪合成相關(guān)信號分子的影響
    2.4 PI3K對BMECs乳合成調(diào)節(jié)相關(guān)信號通路的影響
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]METTL3對乳腺上皮細(xì)胞中乳蛋白和乳脂肪合成的影響[J]. 李冬,黃鑫,李姍姍,于萌萌,李萌,張明輝,高學(xué)軍.  中國畜牧獸醫(yī). 2017(05)
[2]奶牛乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系中疑似干/祖細(xì)胞的鑒定[J]. 郝雨蒙,趙鋒,張娜,陳丹,李慶章.  中國畜牧獸醫(yī). 2016(08)
[3]異亮氨酸對大鼠空腸形態(tài)和抗菌肽表達(dá)的影響[J]. 任曼,呂照勇,史凱,李倩倩,周可柔,吳修磊,李升和.  安徽科技學(xué)院學(xué)報(bào). 2016(04)



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