豬源輸血傳播病毒（Torque Teno virus，TTV）在世界大部分豬場都有較高的感染率。人源TTV感染人后，會發(fā)生重型肝炎等癥狀；圓環(huán)病毒2型（Circovirus type2，PCV2）是影響和誘發(fā)豬死亡和發(fā)病的重要病原之一。為了解石河子及北屯地區(qū)豬源TTV及PCV2的感染情況，并進一步研究豬源TTV與圓環(huán)病毒2型間是否存在協(xié)同影響的作用，本研究對在石河子地區(qū)及北屯地區(qū)豬源樣品進行了TTV和PCV2的基因檢測，并對流行毒株的基因型進行了分析。 研究中采用康為世紀公司的血液基因組小量提取試劑盒，對石河子屠宰場隨機采集的206份豬抗凝血液、北屯地區(qū)屠宰場采集的72豬抗凝血液，及石河子周邊豬場采集的不同日齡仔豬抗凝血液50份、母豬的抗凝血液10份進行DNA提取。根據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)合成了三對引物，建立了用于檢測TTV1、TTV2及PCV2的聚合酶鏈反應(yīng)（PolymeraseChain Reaction，PCR）檢測方法，在此基礎(chǔ)上，對反應(yīng)條件進行了優(yōu)化，建立了檢測TTV1和PCV2的雙重PCR檢測方法。利用本研究建立的PCR檢測方法，對采集樣品進行檢查，同時選取部分陽性樣品，對PCR... 

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英語字母縮寫和中英文全稱對照表
前言
文獻綜述
    1 TTV 研究進展
        1.1 TTV 的分類及病原特點
            1.1.2 TTV 的病原特點
        1.2 TTV 的檢測方法
            1.2.1 TTV 的 PCR 檢測
            1.2.2 TTV 的基因分型
            1.2.3 TTV 的原位雜交檢測法
        1.3 TTV 致病性
        1.4 TTV 傳播途徑
        1.5 TTV 流行情況研究
        1.6 TTV 病毒的治療
    2 豬圓環(huán)病毒 2 型
        2.1 豬圓環(huán)病毒 2 型分類及病原特點
            2.1.1 豬圓環(huán)病毒 2 型分類
            2.1.2 豬圓環(huán)病毒 2 型病原特點
        2.2 PCV2 檢測技術(shù)
            2.2.1 PCV2 的 PCR 檢測
            2.2.2 PCV2 的原位雜交技術(shù)
            2.2.3 PCV2 的 ELISA 檢測
        2.3 PCV2 的致病性
        2.4 豬圓環(huán)病毒病的臨床表現(xiàn)
        2.5 PCV2 傳播途徑
        2.6 PCV2 流行情況
        2.7 PCV2 防治方法
    3 TTV 與 PCV2 混合感染研究
第一章 石河子及北屯地區(qū) TTV 的 PCR 檢測及不同日齡 TTV 的感染情況對比
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 血液樣品
            1.1.2 主要儀器設(shè)備
            1.1.3 主要試劑
        1.2 主要方法
            1.2.1 引物設(shè)計
            1.2.2 總 DNA 提取
            1.2.3 PCR 擴增
            1.2.4 PCR 產(chǎn)物鑒定
            1.2.5 回收純化 DNA 片段
            1.2.6 連接反應(yīng)
            1.2.7 感受態(tài)細胞制備
            1.2.8 連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化
            1.2.9 序列測定分析
    2 結(jié)果
        2.1 PCR 檢測結(jié)果
        2.2 陽性克隆 PCR 檢測結(jié)果
        2.3 序列分析結(jié)果
        2.4 不同日齡仔豬及母豬感染率調(diào)查
    3 分析與討論
第二章 石河子及北屯地區(qū) PCV2 型 PCR 檢測及基因型分析
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 樣品采集
            1.1.2 主要試劑
            1.1.3 主要儀器設(shè)備
        1.2 主要方法
            1.2.1 引物設(shè)計
            1.2.2 總 DNA 提取
            1.2.3 PCR 擴增
            1.2.4 PCR 產(chǎn)物鑒定
            1.2.5 回收純化 DNA 片段
            1.2.6 連接反應(yīng)
            1.2.7 連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化
            1.2.9 序列測定
            1.2.10 臨床剖檢
    2 結(jié)果
        2.1 PCR 檢測結(jié)果
        2.2 測序結(jié)果
        2.3 同源性分析結(jié)果
        2.4 進化樹分析結(jié)果
        2.5 臨床剖檢豬場中發(fā)現(xiàn)的突然死亡的仔豬
    3 討論與結(jié)論
第三章 TTV1 與 PCV2 雙重 PCR 檢測方法的建立
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 血液樣品
            1.1.2 實驗室使用器材
            1.1.3 主要試劑
        1.2 主要方法
            1.2.1 引物設(shè)計
            1.2.2 總 DNA 提取
            1.2.3 PCR 擴增
            1.2.4 雙重 PCR 檢測方法的建立
            1.2.5 PCR 產(chǎn)物鑒定
            1.2.6 回收純化 DNA 片段
            1.2.7 感受態(tài)細胞制備
            1.2.8 連接反應(yīng)
            1.2.9 連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化
            1.2.10 序列測定
            1.2.11 敏感性試驗
    2 結(jié)果
        2.1 PCR 檢測結(jié)果
            2.1.2 雙重 PCR 反應(yīng)條件的優(yōu)化結(jié)果
            2.1.3 雙重 PCR 的靈敏度試驗
            2.1.4 雙重 PCR 的重復性試驗
            2.1.5 臨床應(yīng)用
    3 討論
全文總結(jié)
參考文獻
附錄
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]豬圓環(huán)病毒PCR診斷方法建立及標準制訂[D]. 王東方.河南農(nóng)業(yè)大學 2008



本文編號：3679567