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表達(dá)水皰性口炎病毒G蛋白重組新城疫病毒的研究

發(fā)布時間:2022-08-23 17:01
  水皰性口炎(Vesicular stomatitis, VS)是由水皰性口炎病毒(VSV)引起的急性、人獸共患的病毒性傳染病。由于其傳播性強(qiáng)、對多種動物及人都具有感染性且傳播性強(qiáng),可嚴(yán)重影響多種家畜健康及畜產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量,對畜牧業(yè)造成了巨大的損失;VSV也是人類健康的隱形殺手之一,可引發(fā)其他疾病的繼發(fā)感染,威脅人類健康。OIE將VS列為法定必須通報傳染病,我國將VS列為國家級動物檢疫二類疫病,而且尚無有效的針對VSV的商品化疫苗。因此,對VS新型疫苗的探索和研究,對防制VS侵入我國、保障畜牧公共生產(chǎn)安全及促進(jìn)生物基礎(chǔ)研究均具有重要價值。 VSV是典型的彈狀病毒,為單股負(fù)鏈RNA病毒,屬于彈狀病毒科(Rhabdoviridae)、水皰病毒屬Vesiculovirus),其代表株為新澤西(New Jersey, NJ)和印第安納(Indiana, IN)株。VSV基因組主要編碼N-P-M-G-L5個結(jié)構(gòu)蛋白,其中位于病毒粒子囊膜中的G蛋白(GP)是其最主要的免疫原性蛋白,它不僅可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性的中和抗體,而且可誘發(fā)機(jī)體細(xì)胞免疫應(yīng)答及干擾素的產(chǎn)生,從而使動物體產(chǎn)生對抗VSV的有... 

【文章頁數(shù)】:43 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
圖目錄
英文縮略表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 水皰性口炎及其疫苗現(xiàn)狀
        1.1.1 水皰性口炎流行特點及流行現(xiàn)狀
        1.1.2 水泡性口炎致病機(jī)理及發(fā)病特征
        1.1.3 水皰性口炎的診斷與防控措施
        1.1.4 水皰性口炎疫苗的現(xiàn)狀
    1.2 水皰性口炎病毒的分子生物學(xué)特性
        1.2.1 VSV的形態(tài)特征及基因組結(jié)構(gòu)
        1.2.2 水皰性口炎的病原特性
        1.2.3 VSV的主要免疫原
        1.2.4 VSV GP的結(jié)構(gòu)特點及功能
    1.3 NDV作為疫苗載體的應(yīng)用及研究進(jìn)展
        1.3.1 NDV載體系統(tǒng)的構(gòu)成
        1.3.2 NDV作為疫苗載體的優(yōu)勢
        1.3.3 NDV重組疫苗的安全性評估
        1.3.4 NDV載體在新型疫苗研制中的應(yīng)用
        1.3.5 NDV載體的發(fā)展前景
    1.4 研究的目的及意義
第二章 實驗材料、方法及結(jié)果
    2.1 材料
        2.1.1 病毒株與細(xì)胞系
        2.1.2 質(zhì)粒
        2.1.3 雞胚、實驗動物和高免血清
        2.1.4 主要試劑及儀器
    2.2 方法
        2.2.1 VSV G基因的序列擴(kuò)增及分析
        2.2.2 表達(dá)VSV-GP的重組NDV基因組cDNA的構(gòu)建
        2.2.3 重組病毒的拯救及RT-PCR鑒定
        2.2.4 VSV-GP的表達(dá)鑒定及細(xì)胞定位
        2.2.5 rLa-VSV-G的致病性分析
        2.2.6 rLa-VSV-G的雞胚生長動力學(xué)特征分析
        2.2.7 rLa-VSV-G在小鼠中安全性試驗
        2.2.8 rLa-VSV-G在小鼠中免疫效力檢測
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 VSV-G基因的序列擴(kuò)增及分析
        2.3.2 表達(dá)VSV-GP的重組NDV基因組cDNA克隆的構(gòu)建及重組病毒的拯救
        2.3.3 rLa-VSV-G的RT-PCR鑒定
        2.3.4 VSV-GP的表達(dá)鑒定及細(xì)胞定位
        2.3.5 rLa-VSV-G的致病性分析
        2.3.6 rLa-VSV-G的雞胚生長動力學(xué)特征分析
        2.2.7 rLa-VSV-G在小鼠中安全性試驗
        2.3.8 rLa-VSV-G對小鼠的免疫實驗
第三章 討論
第四章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]新城疫病毒載體研究進(jìn)展[J]. 孫玉章,母連志,丁壯.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(11)
[4]新城疫病毒反向遺傳載體的構(gòu)建及其外源基因表達(dá)的研究進(jìn)展[J]. 曹軍平,胡順林.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2009(01)
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[7]新城疫病毒的分子生物學(xué)及應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 周倫江,莊向生,陳少鶯.  中國家禽. 2006(20)
[8]水皰性口炎病毒糖蛋白基因的克隆和表達(dá)[J]. 孫成群,彭金美,吳東來,童光志,仇華吉,孔憲剛.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2005(04)

碩士論文
[1]水皰性口炎病毒印第安納株反向遺傳操作系統(tǒng)的建立及重組病毒的構(gòu)建[D]. 溫志遠(yuǎn).內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號:3678149

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