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藏豬源纖維素分解菌株的篩選鑒定及酶學(xué)特性研究

發(fā)布時間:2022-07-29 20:58
  藏豬是我國特有的草食型豬種,具有耐粗飼、抗病等優(yōu)良特性,為了探究藏豬的食草機理、分離高效的纖維素分解菌株,本研究選取8月齡健康藏豬和太湖豬(對照)的盲腸內(nèi)容物作為試驗材料,采用改良羧甲基纖維素鈉(CMC)培養(yǎng)基初篩,并結(jié)合酶活復(fù)篩,獲得了一株藏豬源的高效纖維素分解菌株BY-3;通過單因素設(shè)計和響應(yīng)面試驗對菌株BY-3的發(fā)酵條件和發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化,并研究了粗酶液的酶學(xué)特性,為揭示藏豬的食草機理,以及該菌株及其纖維素酶的工業(yè)利用提供了試驗依據(jù)。研究結(jié)果如下:1、本試驗先后采用改良CMC平板初篩和酶活復(fù)篩,篩選出一株藏豬源的纖維素分解菌,經(jīng)理化指標(biāo)和分子生物學(xué)鑒定后,將其命名為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis) BY-3。2、通過測定菌株生長曲線和酶活的關(guān)系,B. subtilis BY-3在振蕩培養(yǎng)6h后進入對數(shù)期,在21h后逐漸進入穩(wěn)定期;纖維素酶的生產(chǎn)高峰出現(xiàn)在發(fā)酵培養(yǎng)后24h左右,最大酶活為1.603±0.039U/mL。3、采用單因素試驗確定了菌株BY-3的最佳發(fā)酵條件:接種量3%、發(fā)酵溫度42℃、轉(zhuǎn)速220rpm、裝劑量50mL/250mL。4、利用單因素設(shè)計... 

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
文獻綜述
    第一章 木質(zhì)纖維素概況及常見的預(yù)處理技術(shù)
        1.1 木質(zhì)纖維素的結(jié)構(gòu)
        1.2 木質(zhì)纖維素預(yù)處理技術(shù)
    第二章 纖維素酶概況及其應(yīng)用
        2.1 纖維素酶的組成
        2.2 纖維素酶的結(jié)構(gòu)和作用機理
            2.2.1 纖維素酶的結(jié)構(gòu)
            2.2.2 纖維素的作用機理
        2.3 影響纖維素酶活力的因素
        2.4 產(chǎn)纖維素酶的微生物
        2.5 微生物纖維素酶的生產(chǎn)
            2.5.1 纖維素酶的合成機理
            2.5.2 常見的纖維素酶生產(chǎn)方式
        2.6 纖維素酶的分類
            2.6.1 耐熱纖維素酶
            2.6.2 耐鹽纖維素酶
            2.6.3 耐酸纖維素酶
            2.6.4 耐堿纖維素酶
        2.7 纖維素酶的應(yīng)用
            2.7.1 纖維素酶在養(yǎng)殖業(yè)上的應(yīng)用
            2.7.2 纖維素酶在環(huán)保上的應(yīng)用
            2.7.3 纖維素酶在食品工業(yè)上的應(yīng)用
            2.7.4 纖維素酶在紡織、洗滌工業(yè)上的應(yīng)用
        2.8 本文研究的目的意義
試驗研究
    第三章 藏豬源纖維素分解菌的篩選、鑒定
        3.1 引言
        3.2 材料與方法
            3.2.1 材料
            3.2.2 方法
        3.3 結(jié)果與分析
            3.3.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
            3.3.2 纖維素分解菌的篩選
            3.3.3 菌株的種屬鑒定
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
    第四章 B. subtilis BY-3 的發(fā)酵優(yōu)化
        4.1 引言
        4.2 材料與方法
            4.2.1 纖維底物
            4.2.2 緩沖液及 DNS 顯色液
            4.2.3 CMCase 活性測定
            4.2.4 發(fā)酵條件優(yōu)化
            4.2.5 發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化
        4.3 結(jié)果與分析
            4.3.1 發(fā)酵條件優(yōu)化
            4.3.2 發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化
        4.4 討論
        4.5 小結(jié)
    第五章 粗酶液的酶學(xué)性質(zhì)研究
        5.1 引言
        5.2 材料與方法
            5.2.1 試驗材料
            5.2.2 DNS 顯色液與緩沖液
            5.2.3 CMCase 活性測定
            5.2.4 酶學(xué)性質(zhì)分析
        5.3 結(jié)果與分析
            5.3.1 不同 pH 和溫度對粗酶液 CMCase 活性的影響
            5.3.2 粗酶液的酸堿穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性
            5.3.3 粗酶液對不同纖維底物的降解作用
            5.3.4 酶動力學(xué)分析
            5.3.5 粗酶液的抑菌性研究
        5.4 討論
        5.5 小結(jié)
主要結(jié)論
創(chuàng)新點
進一步研究的問題
參考文獻
附錄
致謝
作者簡介


【參考文獻】:
期刊論文
[1]低溫產(chǎn)纖維素酶菌株的篩選、鑒定及纖維素酶學(xué)性質(zhì)[J]. 穆春雷,武曉森,李術(shù)娜,馬鳴超,李俊,沈德龍,朱寶成.  微生物學(xué)通報. 2013(07)
[2]一株纖維素降解菌的分離、鑒定及對玉米秸稈的降解特性[J]. 吳文韜,鞠美庭,劉金鵬,劉博群,佟樹敏.  微生物學(xué)通報. 2013(04)
[3]藏豬食草機理的研究——藏豬腸道微生物的多樣性分析[J]. 肖文萍,劉海艷,趙海波,白龍,彭甲銀,劉雪青,王建剛,宋宇軒,曹斌云.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2013(03)
[4]一株腸源枯草芽孢桿菌的生長、抗逆和產(chǎn)酶特性分析[J]. 汪海峰,王井亮,王翀,周明.  中國畜牧雜志. 2012(17)
[5]生物乙醇生產(chǎn)及纖維素酶的開發(fā)進展[J]. 楊利平,蔡水文,羅玲,劉輝.  西部資源. 2012(03)
[6]響應(yīng)面法優(yōu)化海洋枯草芽孢桿菌HS-A38增殖發(fā)酵培養(yǎng)基[J]. 張歡,叢麗娜,侯英敏,王丹,謝三群.  大連工業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2012(01)
[7]一株片煙中纖維素降解菌的篩選鑒定及其初步應(yīng)用研究[J]. 王瑩,范堅強,包可翔,王金華,王志.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2011(08)
[8]纖維素酶在反芻動物飼料中的應(yīng)用[J]. 肖宇,林英庭.  中國奶牛. 2011(07)
[9]真菌降解木質(zhì)纖維素的功能基因組學(xué)研究進展[J]. 田朝光,馬延和.  生物工程學(xué)報. 2010(10)
[10]響應(yīng)面法優(yōu)化固定粘紅酵母細胞條件及生物轉(zhuǎn)化制L-苯丙氨酸[J]. 李銘,楊亞力,楊順楷.  應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報. 2010(02)

博士論文
[1]纖維素酶基因重組野生型乳酸桿菌表達系統(tǒng)的構(gòu)建[D]. 李旺.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010



本文編號:3667173

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