羊傳染性膿皰�。–ontagious Ecthyma）,又被稱(chēng)作羊口瘡,是羊傳染性膿皰病毒（Orf virus,ORFV）引起導(dǎo)致的綿羊、山羊以及野生小型反芻獸的一種急性、高度接觸性傳染病。被該病感染的動(dòng)物的口唇部,乳房部,生殖器官部位等最易受到侵害,在患處出現(xiàn)皮膚破潰,水皰,結(jié)痂等。羊傳染性膿皰病還是一種人獸共患病,不僅給羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,還同時(shí)威脅著相關(guān)人員的生命健康。羊傳染性膿皰病目前尚無(wú)特效治療藥物,接種疫苗是最有效的防控手段。但是由于羊傳染性膿皰病毒特有的免疫逃避機(jī)制,現(xiàn)在市售的滅活疫苗和弱毒疫苗在免疫保護(hù)效果等方面還有許多不足。而基因缺失疫苗作為一種新型疫苗,在羊傳染性膿皰病的疫苗開(kāi)發(fā)上擁有非常廣闊的前景。同源重組基因敲除技術(shù)是常用的構(gòu)建基因缺失株的方法,但傳統(tǒng)的同源重組方法成功率低下,耗費(fèi)時(shí)間極長(zhǎng)。在本研究中,我們利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)事先在基因缺失的目標(biāo)區(qū)域引起DNA的雙鏈斷裂（DSBs）,使得目標(biāo)區(qū)域發(fā)生同源重組的概率大大提高。我們通過(guò)PCR擴(kuò)增,寡核苷酸序列合成,載體連接等方法構(gòu)建了同源重組穿梭質(zhì)粒pUC57-vv7.5-EGFP-ORF... 

【文章頁(yè)數(shù)】：91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
英文縮略詞表
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第1章 羊傳染性膿皰病毒研究進(jìn)展
        1.1 病原學(xué)
        1.2 流行病學(xué)
        1.3 臨床癥狀
        1.4 診斷
        1.5 防治
    第2章 羊傳染性膿皰病毒疫苗研究現(xiàn)狀
        2.1 羊傳染性膿皰病發(fā)病機(jī)制研究
        2.2 疫苗研究進(jìn)展
    第3章 同源重組和CRSPR/Cas9 技術(shù)
        3.1 同源重組技術(shù)
        3.2 CRISPR/Cas9 系統(tǒng)
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第1章 基于CRISPR/Cas9 基因編輯技術(shù)構(gòu)建ORFV009基因缺失株
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第2章 ORFV009基因缺失株對(duì)羔羊的免疫效果評(píng)價(jià)
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3657849