禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生�。≧eticuloendotheliosis,RE）是嚴重危害養(yǎng)禽業(yè)的傳染性腫瘤病之一,也是重要的免疫抑制病。禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒（Reticuloendotheliosisvirus,REV）感染主要造成網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞增生,誘發(fā)機體免疫抑制和矮小綜合征等,同時REV能污染馬立克氏病病毒疫苗、禽痘病毒疫苗等生物制品,從而降低疫苗的免疫效果。目前,REV常和馬立克氏病病毒、白血病病毒、傳染性貧血病病毒、傳染性法氏囊病病毒等禽的免疫抑制性病毒混合感染,使疾病的發(fā)生更為嚴重,且有加重趨勢。隨著我國養(yǎng)殖業(yè)的集約化發(fā)展,REV感染造成的損失已經(jīng)嚴重影響了養(yǎng)禽業(yè)的經(jīng)濟效益,所以,有必要對REV感染及致病機制進行深入研究。目前,對REV的研究主要局限在基因組的插入整合、混合感染、疫苗污染等方面,但病毒編碼蛋白的功能及其在感染和致病過程中與宿主蛋白之間相互作用等方面的研究鮮有報道,有待于開展。病毒與宿主相互作用在病毒感染過程中發(fā)揮重要作用,研究REV與宿主相互作用有助于了解病毒的復制機制。在本實驗室的前期研究中,采用蛋白質(zhì)組學方法并結(jié)合雙向電泳技術,獲得了REV感染SPF雞的脾臟... 

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒
        1.1.1 病原學
        1.1.2 流行病學
        1.1.3 臨床癥狀與病理變化
        1.1.4 免疫抑制
        1.1.5 鑒別診斷
        1.1.6 防治
    1.2 宿主波形蛋白（vimentin）研究進展
        1.2.1 Vimentin蛋白分子結(jié)構
        1.2.2 Vimentin蛋白的分子生物學功能
        1.2.3 Vimentin與病毒相互作用研究進展
    1.3 本研究的目的和意義
第二章 REV感染對宿主波形蛋白表達的影響
    摘要
    2.1 材料和方法
        2.1.1 病毒、細胞、抗體、質(zhì)粒和試劑
        2.1.2 主要儀器設備
        2.1.3 引物設計與合成
        2.1.4 REV復壯與鑒定
        2.1.5 雞源Vimentin基因的克隆與分析
        2.1.6 Vimentin Real time PCR的建立
        2.1.7 Vimentin在雞組織中的分布檢測
        2.1.8 REV感染對vimentin表達的影響
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 REV的復壯與鑒定
        2.2.2 雞源vimentin基因的克隆與序列分析
        2.2.3 雞源vimentin基因Real time PCR的建立
        2.2.4 波形蛋白vimentin在雞組織中的分布
        2.2.5 REV感染上調(diào)vimentin的表達
    2.3 討論
第三章 宿主波形蛋白對REV復制影響的研究
    摘要
    3.1 材料和方法
        3.1.1 病毒、細胞、抗體、試劑
        3.1.2 主要儀器設備
        3.1.3 引物設計與合成
        3.1.4 靶向vimentin的siRNA篩選
        3.1.5 Vimentin下調(diào)表達對REV復制的影響
        3.1.6 Acrylamide對CEF細胞活性的影響
        3.1.7 破壞vimentin結(jié)構對REV復制的影響
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 靶向vimentin的有效siRNA的篩選
        3.2.2 下調(diào)vimentin的表達抑制REV復制
        3.2.3 Acrylamide對CEF細胞活性的影響
        3.2.4 抑制vimentin功能抑制REV的復制
    3.3 討論
第四章 宿主波形蛋白影響REV復制的機制研究
    摘要
    4.1 材料和方法
        4.1.1 細胞、抗體、試劑
        4.1.2 主要儀器設備
        4.1.3 引物設計與合成
        4.1.4 REV PR蛋白原核表達
        4.1.5 REV PR切割活性的鑒定
        4.1.6 REV PR對vimentin原核蛋白的切割活性分析
        4.1.7 PR對vimentin真核蛋白的切割活性分析
        4.1.8 PR對細胞中vimentin分布的影響
        4.1.9 REV感染對細胞中vimentin分布的影響
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 REV PR和p18-p30蛋白的原核表達及純化
        4.2.2 PR切割活性的鑒定
        4.2.3 PR酶活性最佳反應條件的優(yōu)化
        4.2.4 PR切割vimentin原核表達蛋白
        4.2.5 PR DTG基序影響切割vimentin蛋白
        4.2.6 PR活性功能區(qū)域的確定
        4.2.7 PR切割vimentin真核表達蛋白
        4.2.8 PR蛋白影響細胞中vimentin的分布
        4.2.9 REV感染影響vimentin蛋白的分布
    4.3 討論
第五章 全文結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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[7]SPF雛雞感染REV后免疫器官免疫功能的動態(tài)變化[J]. 李廣興,楊麗萍,楊貴君,劉忠貴.  中國獸醫(yī)學報. 2000(04)
[8]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病的組織病理學和超微結(jié)構的動態(tài)變化[J]. 郁曉嵐,徐福南,蔡寶祥,陳溥言.  南京農(nóng)業(yè)大學學報. 1989(02)
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博士論文
[1]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒LAMP檢測方法及感染性分子克隆的建立[D]. 鄧小蕓.東北農(nóng)業(yè)大學 2011

碩士論文
[1]2010-2012年廣西雞三種腫瘤病病毒的流行病學研究及其在商品馬立克活疫苗中污染的檢測[D]. 曾婷婷.廣西大學 2012



本文編號：3654721