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豬IFN-α基因在干酪乳酸桿菌中的分泌表達(dá)

發(fā)布時間:2022-07-02 16:09
  豬α干擾素(IFN-a)作為一種有效抗病毒細(xì)胞因子,能迅速干擾病毒的復(fù)制,可有效地防止傳染病的發(fā)生,是豬體抵御病原入侵的重要早期防御系統(tǒng)之一。目前,利用基因工程技術(shù)研制和開發(fā)的重組豬IFN-α已上市,在臨床實踐中具有顯著的抗病毒功能,對于豬的多種病毒性傳染病,如流行性腹瀉、豬瘟、藍(lán)耳病、傳染性胃腸炎等都有一定防治效果。干酪乳酸桿菌是存在于人和動物腸道內(nèi)正常的益生菌,是一種公認(rèn)的具有GRAS (Generally Regarded As Safe)有益微生物,擁有天然的抗菌作用。乳酸桿菌是至今發(fā)現(xiàn)的唯一沒有致病性的一個菌種,一些經(jīng)過篩選的干酪乳酸桿菌株可直接口服,能夠耐受胃液中的強(qiáng)酸和小腸上段的膽鹽,因此干酪乳酸桿菌可作為一種口服遞送載體來運送外源蛋白,而且該菌在人和動物體內(nèi)占絕對優(yōu)勢,以它為表達(dá)系統(tǒng)較其它菌株更易達(dá)到較高的表達(dá)量。本研究擬將豬IFN-a基因?qū)敫衫胰樗釛U菌中,從而獲得能表達(dá)豬IFN-a的干酪乳酸桿菌。這樣的菌株集抗病毒、抗菌作用于一身,并可通過口服途徑飼喂動物,臨床應(yīng)用十分方便。本試驗首先人工合成了150bp(包括SP上游的酶切位點Nde I及下游的酶切位點依次為(?)... 

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
中文摘要
文獻(xiàn)綜述
引言
試驗一 乳酸桿菌整合型表達(dá)質(zhì)粒pMJ67-SP-IFN-α的構(gòu)建
    1 材料與方法
    2 結(jié)果與分析
    3 結(jié)論與討論
試驗二 乳酸桿菌復(fù)制型表達(dá)質(zhì)粒pIAbeta8-plac-SP-IFN-α的構(gòu)建
    1 材料與方法
    2 結(jié)果與分析
    3 結(jié)論與討論
試驗三 豬IFN-α基因在干酪乳酸桿菌中的表達(dá)
    1 材料與方法
    2 結(jié)果與分析
    3 結(jié)論與討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
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