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豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌的臨床調(diào)查及三聯(lián)基因工程疫苗的構(gòu)建和應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2022-02-26 17:49
  豬鏈球菌2型(Streptococcus suis serotype2,SS2)是一種重要的人獸共患病病原,不僅給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大損失,還為人類公共衛(wèi)生帶來(lái)一定的安全隱患。副豬嗜血桿菌病(Glasser’s disease)也是豬場(chǎng)的一種常發(fā)疾病,以高死亡率為特征,嚴(yán)重制約著全球養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。本研究的臨床調(diào)查也表明,豬鏈球菌和副豬嗜血桿菌為目前豬場(chǎng)分離的兩大主要細(xì)菌病原,給豬場(chǎng)的正常生產(chǎn)帶來(lái)較大危害,因此臨床預(yù)防這兩種病原具有重要意義。目前臨床預(yù)防細(xì)菌病原,應(yīng)用較多的為滅活苗,滅活苗具有安全性好、免疫持續(xù)期長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn),但也存在著接種劑量大,接種次數(shù)多,豬的應(yīng)激反應(yīng)大等缺點(diǎn),而且針對(duì)不同病原還需進(jìn)行分批多次免疫,加大了人力物力成本。因此研究出一種廉價(jià)高效同時(shí)能預(yù)防多種病原的新型疫苗具有重要意義。本研究采用目前運(yùn)用比較成熟的偽狂犬基因缺失株TK-/gE-/LacZ+為載體,利用同源重組的原理,選取實(shí)驗(yàn)室前期篩選的針對(duì)豬鏈球菌和副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis,HPS)具有良好保護(hù)力的新型抗原基因Sao、HP0197、HPS06257以及palA,... 

【文章來(lái)源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌的臨床調(diào)查及三聯(lián)基因工程疫苗的構(gòu)建和應(yīng)用


載體pMD18-Tsimple結(jié)構(gòu)圖譜

結(jié)構(gòu)圖,載體,結(jié)構(gòu)圖,偽狂犬病毒


SV40polyA以及hCMV—M.C.S—BGHpolyA,共兩個(gè)表達(dá)盒。其兩側(cè)分別含有偽狂犬病毒的同源序列CgD, gl, gE, Jin (見(jiàn)圖3-2);\/ Simple Vector M ?— T^iowng s?o\ (2.692 bp)塌圖3-1載體pMD18-Tsimple結(jié)構(gòu)圖譜Fig. 3-1 Structure of the vector pMD18-T simple11

示意圖,轉(zhuǎn)移載體,示意圖,構(gòu)建策略


構(gòu)建策略:本實(shí)驗(yàn)重組轉(zhuǎn)移載體的構(gòu)建分兩步進(jìn)行,以pIE/06257/0197的構(gòu)建為例(圖3-3)。首先Bgm與Xho I分別雙酶切PMD-0197及pIECMV’,回收目的片段0197及酶切的轉(zhuǎn)移載體pIECMV’,然后連接轉(zhuǎn)化,挑取正確的陽(yáng)性克隆構(gòu)建17

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[10]一規(guī);i場(chǎng)的呼吸道綜合征的診斷與控制[J]. 周小兵,鄒廣彬,尹勁虎,曹慧,李衛(wèi)東,李林,韓建立.  畜牧與獸醫(yī). 2006(06)

博士論文
[1]口蹄疫病毒Lpro和3Cpro調(diào)控宿主抗病毒天然免疫反應(yīng)的分子機(jī)制研究[D]. 王蕩.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]副豬嗜血桿菌突變菌株的構(gòu)建及生物學(xué)特性的研究[D]. 吳娟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



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