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牛結(jié)核外周血IFN-γ體外釋放試驗(yàn)刺激原的篩選與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2022-02-23 03:03
  牛結(jié)核。˙ovine tuberculosis, bTB)是由牛分枝桿菌(Mycobacterium bovis, M. bovis)等感染引起的一種人獸共患慢性消耗性傳染病,該病被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列入需通報(bào)的動(dòng)物疫病之一。M. bovis擁有廣泛的宿主,而牛是最敏感的宿主之一,它不僅能在動(dòng)物之間傳播,還能從動(dòng)物傳染給人,牛結(jié)核病的流行直接影響了畜牧業(yè)的生產(chǎn)力及人類的生命健康。因此,簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的牛結(jié)核診斷方法對(duì)于該病的防控具有重要的意義。IFN-y試驗(yàn)是一種體外T細(xì)胞免疫檢測(cè)試驗(yàn)。傳統(tǒng)用于IFN-y試驗(yàn)的刺激原是結(jié)核菌素純蛋白衍生物(PPD),由于PPD成分復(fù)雜,包含很多廣泛分布的分枝桿菌抗原,使診斷易存在假陽(yáng)性的結(jié)果。由于PPD在生產(chǎn)過(guò)程中存在定性定量的困難,難以保證批次間的穩(wěn)定性,所以使用PPD作為刺激原的IFN-y試驗(yàn)其特異性及穩(wěn)定性有待進(jìn)一步提高。結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌等致病性分枝桿菌特異性抗原蛋白,如ESAT6、CFP10和TB7.7(也稱Rv2654c)等成分明確、制備簡(jiǎn)單、且易于質(zhì)控,將其用于IFN-y檢測(cè)時(shí)可以提高檢測(cè)的特異性及重復(fù)實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性。本研... 

【文章來(lái)源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
符號(hào)說(shuō)明
第一章 綜述
    1 牛結(jié)核病概述
        1.1 牛結(jié)核病病原
        1.2 流行病學(xué)
        1.3 對(duì)人類健康的威脅
    2 牛結(jié)核診斷的研究進(jìn)展
        2.1 細(xì)菌學(xué)檢查
        2.2 分子生物學(xué)診斷
        2.3 免疫學(xué)方法
    3 診斷抗原研究進(jìn)展
        3.1 RD區(qū)抗原
        3.2 其他抗原
    參考文獻(xiàn)
第二章 結(jié)核分枝桿菌CFP10-ESAT6-TB7.7的融合表達(dá)、純化和鑒定
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 目的基因擴(kuò)增和重組質(zhì)粒的鑒定
        2.2 融合蛋白的SDS-PAGE分析
        2.3 融合蛋白的Western blot分析
        2.4 夾心ELISA檢測(cè)特異性IFN-γ和IL-4細(xì)胞因子
        2.5 淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.6 間接ELISA檢測(cè)免疫小鼠血清中特異性抗體水平
    3 討論
    參考文獻(xiàn)
第三章 牛結(jié)核外周血IFN-γ體外釋放試驗(yàn)刺激原的篩選
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號(hào):3640738

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