牛結(jié)核外周血IFN-γ體外釋放試驗刺激原的篩選與鑒定
發(fā)布時間:2022-02-23 03:03
牛結(jié)核。˙ovine tuberculosis, bTB)是由牛分枝桿菌(Mycobacterium bovis, M. bovis)等感染引起的一種人獸共患慢性消耗性傳染病,該病被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列入需通報的動物疫病之一。M. bovis擁有廣泛的宿主,而牛是最敏感的宿主之一,它不僅能在動物之間傳播,還能從動物傳染給人,牛結(jié)核病的流行直接影響了畜牧業(yè)的生產(chǎn)力及人類的生命健康。因此,簡單、快速、準(zhǔn)確的牛結(jié)核診斷方法對于該病的防控具有重要的意義。IFN-y試驗是一種體外T細胞免疫檢測試驗。傳統(tǒng)用于IFN-y試驗的刺激原是結(jié)核菌素純蛋白衍生物(PPD),由于PPD成分復(fù)雜,包含很多廣泛分布的分枝桿菌抗原,使診斷易存在假陽性的結(jié)果。由于PPD在生產(chǎn)過程中存在定性定量的困難,難以保證批次間的穩(wěn)定性,所以使用PPD作為刺激原的IFN-y試驗其特異性及穩(wěn)定性有待進一步提高。結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌等致病性分枝桿菌特異性抗原蛋白,如ESAT6、CFP10和TB7.7(也稱Rv2654c)等成分明確、制備簡單、且易于質(zhì)控,將其用于IFN-y檢測時可以提高檢測的特異性及重復(fù)實驗的穩(wěn)定性。本研...
【文章來源】:揚州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
符號說明
第一章 綜述
1 牛結(jié)核病概述
1.1 牛結(jié)核病病原
1.2 流行病學(xué)
1.3 對人類健康的威脅
2 牛結(jié)核診斷的研究進展
2.1 細菌學(xué)檢查
2.2 分子生物學(xué)診斷
2.3 免疫學(xué)方法
3 診斷抗原研究進展
3.1 RD區(qū)抗原
3.2 其他抗原
參考文獻
第二章 結(jié)核分枝桿菌CFP10-ESAT6-TB7.7的融合表達、純化和鑒定
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果
2.1 目的基因擴增和重組質(zhì)粒的鑒定
2.2 融合蛋白的SDS-PAGE分析
2.3 融合蛋白的Western blot分析
2.4 夾心ELISA檢測特異性IFN-γ和IL-4細胞因子
2.5 淋巴細胞增殖實驗
2.6 間接ELISA檢測免疫小鼠血清中特異性抗體水平
3 討論
參考文獻
第三章 牛結(jié)核外周血IFN-γ體外釋放試驗刺激原的篩選
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果
3 討論
參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
本文編號:3640738
【文章來源】:揚州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
符號說明
第一章 綜述
1 牛結(jié)核病概述
1.1 牛結(jié)核病病原
1.2 流行病學(xué)
1.3 對人類健康的威脅
2 牛結(jié)核診斷的研究進展
2.1 細菌學(xué)檢查
2.2 分子生物學(xué)診斷
2.3 免疫學(xué)方法
3 診斷抗原研究進展
3.1 RD區(qū)抗原
3.2 其他抗原
參考文獻
第二章 結(jié)核分枝桿菌CFP10-ESAT6-TB7.7的融合表達、純化和鑒定
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果
2.1 目的基因擴增和重組質(zhì)粒的鑒定
2.2 融合蛋白的SDS-PAGE分析
2.3 融合蛋白的Western blot分析
2.4 夾心ELISA檢測特異性IFN-γ和IL-4細胞因子
2.5 淋巴細胞增殖實驗
2.6 間接ELISA檢測免疫小鼠血清中特異性抗體水平
3 討論
參考文獻
第三章 牛結(jié)核外周血IFN-γ體外釋放試驗刺激原的篩選
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果
3 討論
參考文獻
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本文編號:3640738
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