山羊的養(yǎng)殖是動物農(nóng)業(yè)支柱產(chǎn)業(yè)之一。近年來,隨著人們飲食結(jié)構(gòu)的調(diào)整,營養(yǎng)價值高、有益于身體健康的食品越來越受到歡迎。羊肉營養(yǎng)價值高使羊肉市場需求量的增加,因此提高山羊繁殖率成為滿足山羊需求市場的關(guān)鍵。綿羊、山羊的繁殖率普遍較低限制了山羊大規(guī)模的養(yǎng)殖。成活羔羊數(shù)是影響繁殖性能因素之一。有關(guān)研究報道,胎盤的正常生長和發(fā)育起到關(guān)鍵的作用,胎盤是胎體營養(yǎng)供應(yīng)的源泉,對胎體的正常生長發(fā)育至關(guān)重要。PHLDA2（pleckstrin homology-like domain, family A, member2,又稱為IPL或TSSC3）,編碼含有PH （pleckstrin homology）同源域的小型細胞質(zhì)蛋白,具有調(diào)節(jié)細胞信號、包內(nèi)運輸?shù)裙δ�。研究表�?在人和鼠中,PHLDA2基因為母源表達的印記基因,調(diào)控胎盤的生長發(fā)育和糖原儲存。因此,對山羊PHLDA2基因相關(guān)研究具有重要意義。本研究采用RACE方法克隆了山羊PHLDA2基因cDNA全長并進行了詳細的生物信息學分析,同時構(gòu)建了該基因在不同組織中表達譜；通過RT-PCR產(chǎn)物直接測序法分析了該基因在F1代胎盤組織的印記狀況,采用巢式PCR法克... 

【文章來源】：西南大學重慶市211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 文獻綜述
    1.1 基因組印記的研究進展
        1.1.1 基因組印記及其發(fā)現(xiàn)
        1.1.2 印記基因的特征
        1.1.3 印記基因的可能的機制
        1.1.4 印記基因進化理論
        1.1.5 DNA甲基化研究方法
    1.2 基因組印記的生物學意義
        1.2.1 印記基因與胎兒胎盤的生長發(fā)育
        1.2.2 印記基因與相關(guān)遺傳疾病
        1.2.3 基因組印記與動物克隆
        1.2.4 印記基因與家畜遺傳育種
    1.3 PHLDA2基因研究進展
第2章 緒論
    2.1 研究目的和意義
    2.2 研究范圍和內(nèi)容
    2.3 技術(shù)路線
第3章 材料和方法
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 主要儀器與設(shè)備
        3.1.3 主要試劑、試劑盒和培養(yǎng)基
        3.1.4 常用試劑及其配制
        3.1.5 常用生物信息學網(wǎng)站和分析軟件
    3.2 實驗方法
        3.2.1 總RNA提取、完整性檢測、濃度測定和cDNA的制備
        3.2.2 山羊PHLDA2基因cDNA克隆
        3.2.3 PHLDA2基因生物信息學分析
        3.2.4 PHLDA2基因組織表達譜構(gòu)建
        3.2.5 山羊PHLDA2基因在胎盤組織印記分析
        3.2.6 山羊PHLDA2啟動子克隆和序列分析
        3.2.7 PHLDA2基因甲基化分析
第4章 結(jié)果和分析
    4.1 山羊總RNA提取
    4.2 山羊PHLDA2基因的克隆及生物信息學分析
        4.2.1 山羊PHLDA2基因克隆
        4.2.2 山羊PHLDA2基因生物信息學分析
    4.3 PHLDA2基因組織表達譜分析
        4.3.1 PHLDA2基因標準曲線繪制
    4.4 PHLDA2基因在胎盤組織印記分析
        4.4.1 基因組DNA的提取
        4.4.2 山羊胎盤PHLDA2基因印記狀態(tài)分析結(jié)果
    4.5 山羊PHLDA2基因啟動子克隆和生物信息學分析
        4.5.1 山羊PHLDA2基因啟動子序列獲得
        4.5.2 山羊PHLDA2基因序列分析
    4.6 PHLDA2基因啟動子和第一外顯子區(qū)域甲基化分析
        4.6.1 山羊PHLDA2基因啟動子區(qū)域甲基化繪制
        4.6.2 山羊PHLDA2基因第一外顯子區(qū)域甲基化繪制
第5章 討論
    5.1 山羊PHLDA2基因克隆與組織表達譜分析
        5.1.1 山羊PHLDA2基因克隆
        5.1.2 PHLDA2基因組織表達譜分析
    5.2 PHLDA2基因胎盤印記狀態(tài)分析
    5.3 山羊PHLDA2基因啟動子克隆和甲基化分析
        5.3.1 山羊PHLDA2基因啟動子生物信息學分析
        5.3.2 山羊PHLDA2基因甲基化分析
參考文獻
附錄
致謝
發(fā)表論文及參加課題一覽表


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]豬印記基因的研究現(xiàn)狀及其應(yīng)用前景[J]. 周泉勇,唐艷強,趙書紅.  豬業(yè)科學. 2010(07)
[3]綿羊基因組印記遺傳研究進展[J]. 張立嶺.  中國草食動物. 2001(04)



本文編號：3639400