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致病性維氏氣單胞菌多重PCR檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2022-02-20 22:01
  維氏氣單胞菌(Aeromonas veronii)為氣單胞菌屬中近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的新種。對(duì)人有一定的致病性,同時(shí)對(duì)感染水生動(dòng)物并引發(fā)疾病的報(bào)道也逐漸增多,因此,A.veronii是一種人-獸-魚(yú)共患病原菌,應(yīng)當(dāng)受到水產(chǎn)界與醫(yī)學(xué)界的重視。而目前,國(guó)內(nèi)有A. veronii的研究尚處于起步階段,而有關(guān)檢測(cè)方法更鮮有報(bào)道。因此,本研究以框鏡鯉致病性A.veronii CY0806和A.v國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株ATCC35624等為實(shí)驗(yàn)材料,利用PCR技術(shù)對(duì)A. veronii16S rRNA基因、氣溶素(Aer)基因、細(xì)胞毒性腸毒素(act)基因和核酸酶(exu)基因同時(shí)擴(kuò)增,從而建立高效、快捷的A.veronii檢測(cè)方法。參照GenBank收錄的維氏氣單胞菌16SrRNA基因、氣溶素(Aer)基因、細(xì)胞毒性腸毒素(act)基因、核酸酶(exu)基因的序列,設(shè)計(jì)合成4對(duì)特異性引物,以A. veronii國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株ATCC35624DNA為模板,分別進(jìn)行單一PCR,并優(yōu)化退火溫度,將優(yōu)化的PCR產(chǎn)物經(jīng)回收、連接、轉(zhuǎn)化,并測(cè)序,測(cè)序結(jié)果提呈NCBI進(jìn)行BLAST分析,結(jié)果顯示所得的片段序列與維氏氣單胞菌同源性在1... 

【文章來(lái)源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 維氏氣單胞菌的病原
        1.1 維氏氣單胞菌的病原
        1.2 維氏氣單胞菌的研究現(xiàn)狀
    第二章 維氏氣單胞菌的毒力因子及研究進(jìn)展
        2.1 維氏氣單胞菌的毒力因子
        2.2 維氏氣單胞菌的流行病學(xué)
        2.3 維氏氣單胞菌的疫苗研究
        2.4 維氏氣單胞菌檢測(cè)方法的研究進(jìn)展
        2.5 多重PCR反應(yīng)的原理及特點(diǎn)
        2.6 本研究的目的與意義
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第一章 維氏氣單胞菌相關(guān)毒力基因的克隆與序列分析
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 維氏氣單胞菌多重PCR檢測(cè)方法的建立
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第三章 維氏氣單胞菌多重PCR技術(shù)的應(yīng)用
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào):3635889

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