為了解豬偽狂犬病毒（PRV）流行變異株的病原學(xué)特性及分子遺傳變異特點(diǎn),從江蘇揚(yáng)州市某發(fā)病豬場采集病料,經(jīng)無菌處理后接種BHK-21細(xì)胞并連續(xù)傳代,分離獲得1株病毒。通過細(xì)胞病變觀察、PCR鑒定、電鏡觀察和動物感染試驗(yàn),證明該毒株為偽狂犬病毒,將其命名為YZ株。利用PCR擴(kuò)增、測序,獲得YZ株的gB與gE基因序列,基因同源性分析與遺傳進(jìn)化分析表明:YZ株gB與gE基因與我國豬偽狂犬變異毒株同源性均在99.2%以上,且位于同一進(jìn)化分支,提示該毒株與流行于我國的豬偽狂犬變異毒株親緣關(guān)系較近。進(jìn)一步研究YZ株的致病性,將該毒株P(guān)5代細(xì)胞培養(yǎng)液人工感染60日齡PRV陰性健康豬。結(jié)果表明:試驗(yàn)豬在感染病毒后出現(xiàn)發(fā)熱、嘔吐、腹瀉、咳嗽、呼吸困難和神經(jīng)癥狀,發(fā)病率達(dá)100%。感染豬剖檢病變?yōu)槟X組織水腫出血、肝臟組織表面出現(xiàn)灰白色壞死灶。綜上, PRV-YZ株遺傳進(jìn)化分析與致病性研究表明該毒株為豬偽狂犬變異毒株。這一研究可為江蘇省PRV的流行病學(xué)、遺傳進(jìn)化分析以及免疫防控提供參考。 

【文章來源】：揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2020,41(05)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 病料、細(xì)胞及試驗(yàn)動物
    1.2 試劑
    1.3 方法
        1.3.1 病毒分離鑒定
            1) 病料處理:
            2) 病毒分離純化:
        1.3.2 病毒鑒定
            1) PCR鑒定:
            2) 病毒粒子透射電鏡(TEM)觀察:
        1.3.3 動物感染試驗(yàn)
            1) 小鼠與家兔接種試驗(yàn):
            2) 60日齡仔豬接種試驗(yàn)與病理學(xué)觀察:
        1.3.4 基因進(jìn)化分析
            1) gE與gB基因的PCR擴(kuò)增、克隆與基因測序:
            2) 基因遺傳進(jìn)化樹分析:
2 結(jié)果與分析
    2.1 病毒分離結(jié)果
    2.2 動物感染試驗(yàn)結(jié)果
    2.3 基因進(jìn)化分析結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2012年—2013年我國集約化豬場豬偽狂犬病病毒感染情況的調(diào)查[J]. 張顯浩,陳瑞愛,李冰,蔡佳躍,裴仉福,劉好朋,賀東生.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(03)
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[3]免疫后發(fā)病仔豬中偽狂犬病毒的分離和鑒定[J]. 童武,張青占,鄭浩,劉飛,姜一峰,單同領(lǐng),周艷君,童光志.  中國動物傳染病學(xué)報. 2013(03)
[4]豬偽狂犬病病毒魯A株的分離鑒定[J]. 范偉興,胡敬東,吳加強(qiáng),袁秀芳,張志,劉文強(qiáng),陳溥言,趙宏坤.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2003(06)
[5]豬偽狂犬病病毒鄂A株的分離鑒定[J]. 陳煥春,方六榮,何啟蓋,金梅林,索緒峰,吳美洲.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 1998(02)

博士論文
[1]豬源多殺性巴氏桿菌的分子流行病學(xué)與致病性研究[D]. 湯細(xì)彪.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010

碩士論文
[1]2005年、2006年江蘇地區(qū)豬高熱病病例中PCV2、PPV、PRV、PRRSV和CSFV感染的多重PCR檢測及PRRSV分離株部分基因序列分析[D]. 葉俊平.揚(yáng)州大學(xué) 2007



本文編號：3635563