為了研究4F2hc在奶牛乳腺中的表達(dá)模式及調(diào)控方式,進(jìn)一步明確氨基酸在奶牛乳腺上皮細(xì)胞中的跨膜轉(zhuǎn)運過程,本研究采用Western blotting和實時熒光定量PCR技術(shù)檢測了4F2hc在泌乳期和干奶期奶牛乳腺組織中的表達(dá)變化;在體外培養(yǎng)的泌乳期奶牛乳腺上皮細(xì)胞中添加亮氨酸,采用Western blotting和實時熒光定量PCR技術(shù)檢測其對奶牛乳腺上皮細(xì)胞中4F2hc表達(dá)的影響;采用雷帕霉素抑制劑抑制mTOR信號通路,使用Western blotting方法檢測mTOR信號抑制后奶牛乳腺上皮細(xì)胞中4F2hc表達(dá)以及乳蛋白合成的變化。結(jié)果顯示,在泌乳期的奶牛乳腺組織中4F2hc的mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著或極顯著高于干奶期（P<0.05,P<0.01）;在體外培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞中添加亮氨酸可以極顯著提高乳腺上皮細(xì)胞中4F2hc的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平（P<0.01）;亮氨酸刺激可以激活細(xì)胞內(nèi)的mTOR信號通路（P<0.05）,而雷帕霉素處理則可以顯著抑制mTOR信號分子的磷酸化并極顯著抑制亮氨酸誘導(dǎo)的4F2hc的表達(dá)（P<0.05,P<0.0... 

【文章來源】：中國畜牧獸醫(yī). 2020,47(08)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑及儀器
    1.2 不同生理時期奶牛乳腺組織的獲取
    1.3 奶牛乳腺上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)
    1.4 實時熒光定量PCR
    1.5 Western blotting檢測蛋白的表達(dá)
    1.6 統(tǒng)計分析
2 結(jié) 果
    2.1 不同生理階段奶牛乳腺組織中4F2hc基因的表達(dá)差異
    2.2 亮氨酸對奶牛乳腺上皮細(xì)胞4F2hc基因表達(dá)的調(diào)控
    2.3 亮氨酸調(diào)控4F2hc表達(dá)的信號通路分析
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Amino acids and mammary gland development:nutritional implications for milk production and neonatal growth[J]. Reza Rezaei,Zhenlong Wu,Yongqing Hou,Fuller W.Bazer,Guoyao Wu.  Journal of Animal Science and Biotechnology. 2016(04)
[2]L型氨基酸轉(zhuǎn)運載體1對奶牛乳腺中β-酪蛋白表達(dá)的影響[J]. 邢偉楠,段曉宇,楊洋,侯曉明,林葉.  中國畜牧獸醫(yī). 2016(10)
[3]L型氨基酸轉(zhuǎn)運載體1及其配體在奶牛乳腺中的協(xié)同表達(dá)研究[J]. 林葉,侯曉明.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2014(02)



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