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SS2、SS7、SS9表面結(jié)合多肽篩選及在鑒定分型抑菌方面的研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-19 01:01
  豬鏈球菌Streptococcus suis, SS)屬于革蘭氏陽性菌,是危害養(yǎng)豬行業(yè)的一個(gè)重要傳染性病原菌。近年來,此病在我國(guó)造成的危害日益加大,不僅給養(yǎng)殖業(yè)造成重大損失,同時(shí)給公共衛(wèi)生安全帶來了嚴(yán)重威脅。目前,對(duì)于SS的預(yù)防與治療主要是采用抗生素療法,但由于長(zhǎng)期濫用抗生素,導(dǎo)致耐藥菌株出現(xiàn)的比例越來越大,同時(shí)對(duì)于該病的有效防控形勢(shì)也越來越嚴(yán)峻。而要全面控制該病,前提需要對(duì)SS分離菌做出準(zhǔn)確的鑒定。本試驗(yàn)以SS2、SS7、SS9為研究對(duì)象,應(yīng)用噬菌體展示技術(shù)對(duì)其表面分子結(jié)合多肽(Surface molecule binding peptide, SMBP)進(jìn)行研究,為SS分型鑒定新方法的研究提供平臺(tái),同時(shí)為開發(fā)防治SS病的新型藥物提供理論基礎(chǔ)。主要試驗(yàn)如下:試驗(yàn)一通過噬菌體展示技術(shù)對(duì)SS2、SS7口SS9三者共同的SMBP或兩者(SS2和SS7、SS2和SS9、SS7和SS9)共同的SMBP進(jìn)行篩選,經(jīng)過兩輪特異性的篩選后,共挑取144個(gè)噬菌體克隆進(jìn)行ELISA方法驗(yàn)證,結(jié)果得到對(duì)應(yīng)3種類型的共同SMBP的5個(gè)陽性噬菌體克隆,其中SS2與SS7共同SMBP和SS2與SS9共同SMBP... 

【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 豬鏈球菌分型鑒定方法的研究進(jìn)展
        1.1.1 微生物學(xué)診斷
        1.1.2 清學(xué)診斷
        1.1.3 分子生物學(xué)方法
    1.2 噬菌體展示技術(shù)及其在細(xì)菌學(xué)的應(yīng)用
        1.2.1 噬菌體展示技術(shù)介紹
        1.2.2 噬菌體展示肽庫技術(shù)在病原細(xì)菌學(xué)中的應(yīng)用
        1.2.3 研究目的與意義
第二章 噬菌體展示技術(shù)篩選SS2、SS7、SS9共同SMBP
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 篩選結(jié)果
        2.2.2 ELISA初步驗(yàn)證陽性克隆
        2.2.3 瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果
        2.2.4 測(cè)序結(jié)果以及序列分析
    2.3 討論
第三章 噬菌體展示技術(shù)篩選SS2、SS7、SS9特異SMBP
    3.1 材料與方法
        3.1.1 主要試劑和材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 篩選結(jié)果
        3.2.2 結(jié)合活性鑒定
        3.2.3 特異性檢測(cè)
        3.2.4 多肽的生物信息學(xué)分析
    3.3 討論
第四章 噬菌體展示技術(shù)篩選SS2抑菌多肽
    4.1 材料與方法
        4.1.1 主要試劑和材料
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 篩選結(jié)果
        4.2.2 抗生素篩選結(jié)果
        4.2.3 對(duì)SS2有抑菌作用的多肽篩選結(jié)果
        4.2.4 多肽的序列分析結(jié)果
        4.2.5 抑菌多肽與SS2結(jié)合力檢測(cè)結(jié)果
    4.3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
符號(hào)說明
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
攻讀碩士研究生期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TetR家族調(diào)控鏈霉菌次級(jí)代謝的機(jī)制[J]. 韓曉偉,沈月毛.  微生物學(xué)通報(bào). 2013(10)
[2]豬鏈球菌2型89K毒力島研究進(jìn)展[J]. 朱靜,王長(zhǎng)軍.  微生物學(xué)通報(bào). 2013(08)
[3]抗菌肽的抗菌機(jī)理及構(gòu)效關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 尚田田,徐彥召,杭柏林,王青,趙志雨,胡建和.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2013(09)
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[6]豬2型鏈球菌病疫苗的研究進(jìn)展[J]. 王斌,聶建,李旭廷.  今日養(yǎng)豬業(yè). 2012(01)
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[10]革蘭陽性菌青霉素結(jié)合蛋白研究進(jìn)展[J]. 朱竟赫,郭文潔,劉耀川,趙敬翠,龐杰,劉明春.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2010(01)

碩士論文
[1]豬鏈球菌主要毒力基因的多重PCR檢測(cè)及其核糖體基因多態(tài)性研究[D]. 聶小想.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào):3631890

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