為建立針對我國流行的12種藍(lán)舌病病毒（bluetongue virus,BTV）血清型的特異性RT-PCR檢測方法,本研究根據(jù)我國流行BTV毒株Seg-2的高度保守區(qū)域,設(shè)計(jì)出12對BTV血清型特異性擴(kuò)增引物,建立了RT-PCR方法,并對該RT-PCR方法的反應(yīng)條件、引物特異性與靈敏性進(jìn)行了優(yōu)化與驗(yàn)證;以我國分離的162株BTV為檢測對象,對其血清型進(jìn)行鑒定并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹。結(jié)果顯示,建立的BTV血清型RT-PCR具有良好的特異性與靈敏度:設(shè)計(jì)的12對引物僅與對應(yīng)血清型BTV核酸模板產(chǎn)生特異性PCR擴(kuò)增,與其余血清型毒株之間無交叉擴(kuò)增現(xiàn)象;對不同血清型BTV核酸的檢測靈敏度在1.28×102copies（BTV-2）至9.62×102copies（BTV-1）之間。對我國分離的BTV毒株的RT-PCR血清型鑒定與測序結(jié)果顯示,162株BTV分屬12種血清型（BTV-1、-2、-3、-4、-5、-7、-9、-12、-15、-16、-21與-24）,根據(jù)Seg-2序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)生樹顯示,我國流行BTV血清型毒株的Seg-2序列與對應(yīng)血清型的BTV標(biāo)準(zhǔn)參考毒聚為一簇,分屬9個(gè)基因群（A、B... 

【文章來源】：中國獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(12)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]藍(lán)舌病病毒和流行性出血病病毒雙重?zé)晒舛縍T-PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J]. 楊振興,朱建波,李占鴻,李卓然,何于雯,謝佳芮,李華春,廖德芳,楊恒.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2019(09)
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本文編號：3628133