口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）屬于單股正鏈RNA病毒,感染牛、豬和不同的偶蹄動(dòng)物引起口蹄疫疾病（Foot-and-mouth disease,FMD）。天然免疫系統(tǒng)的模式識(shí)別受體可以識(shí)別病毒感染時(shí)產(chǎn)生的病原相關(guān)分子。細(xì)胞溶質(zhì)里RIG-I樣模式識(shí)別受體（RIG-I-like receptors,RLRs）家族中視黃酸誘導(dǎo)基因I（retinoic acid-inducible gene I,RIG-I）和黑色素瘤分化基因5（melanoma differentiation-associated gene-5,MDA5）可識(shí)別FMDV的RNA。模式識(shí)別受體識(shí)別的病毒RNA后通過一系列的信號傳導(dǎo),誘導(dǎo)Ⅰ型干擾素（typeⅠinterferons,IFNs）的表達(dá)。Ⅰ型干擾素通過激活JAK（Janus kinase）-STAT（signal transducer and activator of transcription）信號通路,誘導(dǎo)干擾素下游多種抗病毒物質(zhì)的產(chǎn)生,其隨后發(fā)生天然免疫抗病毒應(yīng)答。本文構(gòu)建MycANXA1-pCAGGs重組質(zhì)粒,... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Summary
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 天然免疫與病毒識(shí)別
        1.1.1 天然免疫概述
        1.1.2 Ⅰ型干擾素調(diào)控的抗病毒信號傳導(dǎo)
        1.1.3 TLRs介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
        1.1.4 RLRs介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
    1.2 ANXA1的研究進(jìn)展
    1.3 口蹄疫病毒與天然免疫
    1.4 本項(xiàng)目研究意義與思路
第二章 FMDV 3A蛋白與ANXA1互作及ANXA1抑制FMDV的復(fù)制
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞
        2.1.2 病毒
        2.1.3 抗體
        2.1.4 載體
        2.1.5 主要試劑
        2.1.6 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 ANXA1引物設(shè)計(jì)
        2.2.2 豬源ANXA1基因擴(kuò)增
        2.2.3 ANXA1重組質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定
        2.2.4 Myc-ANXA1-pCAGGs在HEK-293T細(xì)胞中的表達(dá)
        2.2.5 FMDV3A蛋白與ANXA1相互作用的檢測
        2.2.6 FMDV3A蛋白與ANXA1在細(xì)胞內(nèi)的定位
        2.2.7 RNA病毒感染對內(nèi)源ANXA1的影響
        2.2.8 過表達(dá)ANXA1對FMDV的復(fù)制的影響
        2.2.9 SiRNA干擾ANXA1對FMDV復(fù)制的影響
        2.2.10 數(shù)據(jù)分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 Myc-ANXA1-pCAGGs重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.3.2 Myc-ANXA1-pCAGGs在HEK-293T細(xì)胞中的表達(dá)
        2.3.3 FMDV 3A蛋白與ANXA1相互作用
        2.3.4 FMDV 3A蛋白與ANXA1的共定位
        2.3.5 RNA病毒感染對內(nèi)源ANXA1的影響
        2.3.6 過表達(dá)ANXA1蛋白對FMDV復(fù)制的影響
        2.3.7 ANXA1下調(diào)對FMDV復(fù)制的影響
    2.4 討論
第三章 ANXA1抑制FMDV復(fù)制的分子機(jī)制
    3.1 材料
        3.1.1 細(xì)胞與病毒
        3.1.2 抗體
        3.1.3 表達(dá)載體
        3.1.4 試劑和儀器
    3.2 方法
        3.2.1 過表達(dá)ANXA1對Ⅰ型干擾素表達(dá)的影響
        3.2.2 FMDV 3A蛋白對ANXA1調(diào)控SeV誘導(dǎo)Ⅰ型干擾素表達(dá)的影響
        3.2.3 ANXA1對RLRs介導(dǎo)的IFN-β表達(dá)的影響
        3.2.4 ANXA1對TBK1和IRF3磷酸化的影響
        3.2.5 ANXA1對干擾素刺激基因(ISGs)的影響
        3.2.6 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 過表達(dá)ANXA1促進(jìn)Ⅰ型干擾素的表達(dá)
        3.3.2 3 A蛋白抑制ANXA1調(diào)控SeV誘導(dǎo)Ⅰ型干擾素的表達(dá)
        3.3.3 ANXA1促進(jìn)RLRs介導(dǎo)的IFN-β表達(dá)
        3.3.4 ANXA1促進(jìn)RNA病毒介導(dǎo)的TBK1和IRF3的磷酸化
        3.3.5 ANXA1增加了Ⅰ型干擾素刺激基因(ISGs)mRNA水平
    3.4 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
導(dǎo)師簡介



本文編號：3628119