[目的]本論文通過(guò)研究氟暴露下炎癥和氧化應(yīng)激對(duì)小鼠睪丸的影響及精子雙向電泳圖譜的構(gòu)建,以期深入探究氟的生殖毒性機(jī)制,為進(jìn)一步實(shí)施科學(xué)診斷和靶標(biāo)藥物設(shè)計(jì)提供理論依據(jù)。[方法]8周齡雄性昆明小鼠240只,隨機(jī)分成4組,即對(duì)照組、低氟組、中氟組、高氟組,對(duì)照組供給去離子水,染氟組分別供給含25、50、100mg/LNaF的去離子水。每組60只。染氟期間動(dòng)態(tài)觀察小鼠的生長(zhǎng)狀況及生長(zhǎng)性能。分別于45、90、180天后處死,取精子進(jìn)行透射電子顯微鏡及雙向電泳的研究；取180天小鼠睪丸組織進(jìn)行組織病理學(xué),QRT-PCR, ELISA以及一氧化氮（NO）含量的測(cè)定。[結(jié)果]1與對(duì)照組相比,180天氟化鈉暴露組小鼠精子畸形率成上升趨勢(shì),中氟組和高氟組差異顯著。相反,精子密度有所下降,且中氟組差異顯著。各攻氟組體重和睪丸重?zé)o顯著影響。2.睪丸HE染色后顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),對(duì)照組小鼠睪丸的曲細(xì)精管結(jié)構(gòu)正常,各級(jí)生精細(xì)胞完整,整齊排列,層次清晰。管腔內(nèi)可見到大量的成熟精子。低氟組各級(jí)生精細(xì)胞受到不同程度的損傷,排列不規(guī)則；中氟組曲精細(xì)管和生精細(xì)胞腫脹,產(chǎn)生大量的空泡；高氟組大量精子細(xì)胞落入管腔,精子減少。3.應(yīng)... 

【文章來(lái)源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

各組小鼠平均體重變化曲線

5睪丸組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)結(jié)果各組實(shí)驗(yàn)小鼠睪丸組織HE染色結(jié)果見圖1-2。從圖中可見：對(duì)照組小鼠睪丸曲細(xì)精管結(jié)構(gòu)正常，各級(jí)生精細(xì)胞整齊排列，層次清晰。精原細(xì)胞和支持細(xì)胞靠近基膜，由基膜向管腔依次排列為不同發(fā)育時(shí)期的生精細(xì)胞：精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞、球形精子細(xì)胞和延長(zhǎng)的精子細(xì)胞。管腔內(nèi)可見到大量的成熟精子。低氟組各級(jí)生精細(xì)胞損傷，排列不規(guī)則；中氟組曲精細(xì)管和生精細(xì)胞腫脹，產(chǎn)生大量的空泡；高氟組精子細(xì)胞落入管腔，精子減少。?喊： -?‘ W 鄉(xiāng)？1 ^ ：：-化、鄉(xiāng)：f 參‘口'?/. ,' ‘ M：：'：. i h -?%. --^M'■魏⑶黑謬msftJNaF ‘廣 二： lOOmg/LNaF > “：_尊麗■轉(zhuǎn)。J誠(chéng)?》‘■'. , ‘’ ‘ 、\ ‘ ’ ’ ； * “ '*■" 、 . f .1第“；十‘‘ -- >.i ：，r ■ i 翻? : i圖1-2各組小鼠睪丸HE染色結(jié)果Figure 1-2 Results of HE staining of testis in different groups2.6小鼠睪丸免疫毒性相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響2.6.1 RNA的完整性和純度各實(shí)驗(yàn)組每組隨機(jī)選取五個(gè)提取的RNA樣品瓊脂凝膠電泳。5S、18S、28S三條帶清晰可見，28S比18SRNA條帶亮度接近2: 1，各條帶間無(wú)顯著的拖尾說(shuō)明RNA沒降解也沒受到DNA污染。用核酸蛋白濃度測(cè)定儀檢測(cè)所有樣品的濃度及純度，結(jié)果顯示A260/280的比值在正常范圍之內(nèi)

2.6.5小鼠睪丸免疫毒性相關(guān)基因旳定量分析結(jié)果與睪丸免疫毒性相關(guān)基因的定量結(jié)果如圖1-3所示�？傮w來(lái)看，各組小鼠睪丸中IL-17、TNFa、IL-6、IL-1 P > IL-21和TGF-P的mRNA的表達(dá)量與對(duì)照組相比，有所升高。其中IL-17中氟組與對(duì)照組相比差異非常顯著，高氟組呈極顯著；TNFa高氟組呈非常顯著；IL-6中氟組顯著，高氟組極顯著。15-1 0.8-1 1.&1C C C.2 ** .2 .9 嫩?0 ,,, ? (0 ***(0 *** cfl - _ <0① ~r 0) 0.6* -p 0)|L i rh M _■ i! 0.4- Fi . i! ■2-= 5- ■：蘭 ■ J- _J. m養(yǎng)1

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3625085