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單增李斯特菌lmo0331基因缺失株的構建及對環(huán)境耐受性的影響

發(fā)布時間:2022-01-28 00:33
  為了研究Lmo0331蛋白在單增李斯特菌環(huán)境適應性中發(fā)揮的作用,利用同源重組的技術構建LM90SB2△lmo0331基因缺失株,比較在不同溫度、pH、滲透壓下的生長特性和生物被膜形成能力與野毒株的差異。結果顯示,在4℃環(huán)境下及含5g/L NaCl的BHI培養(yǎng)基中,LM90SB△lmo0331缺失株的生長速度顯著高于LM90SB2野毒株(P<0.05);在pH9的堿性環(huán)境及含45mL/L乙醇的BHI培養(yǎng)基中,LM90SB2△lmo0331缺失株繁殖數(shù)量低于野毒株(P<0.05);其他條件下,LM90SB△lmo0331缺失株與野毒株的生長無顯著差異;LM90SB2和LM90SB2△lmo0331在不同時間點生物被膜形成密度無顯著差異。由此表明,Lmo0331蛋白可能在低溫和堿性條件下發(fā)揮不同作用,這一結果為研究LM在脅迫環(huán)境生存機制奠定了基礎。 

【文章來源】:動物醫(yī)學進展. 2020,41(05)北大核心

【文章頁數(shù)】:7 頁

【部分圖文】:

單增李斯特菌lmo0331基因缺失株的構建及對環(huán)境耐受性的影響


LM90SB2△lmo0331的PCR鑒定

生長曲線,生長曲線,溫度,滲透壓


NaCl耐受性測定結果顯示,在5g/L NaCl滲透壓環(huán)境下,LM90SB2△lmo0331缺失株在對數(shù)生長期生長趨勢比LM90SB2野毒株生長快,結果差異顯著(P<0.05),但進入穩(wěn)定期時間基本相同;兩株菌在50g/L NaCl和70g/L NaCl滲透壓環(huán)境下生長生長趨勢相同(P>0.05)。在100g/L NaCl滲透壓環(huán)境下,LM90SB2和LM90SB2△lmo0331兩株菌幾乎沒有生長,生長完全被抑制(圖4)。2.5 LM90SB2和LM90SB2△lmo0331在不同EtOH濃度條件下的生長情況

曲線,曲線,環(huán)境適應,蛋白


單細胞生物在外界環(huán)境急劇變化時都會發(fā)生應激反應,將有一系列蛋白質參與抵抗這些應激,可使在多種逆境下生存,并且較快的適應外界環(huán)境。LM也是擁有眾多的環(huán)境適應因子和環(huán)境適應調(diào)節(jié)因子,所以也具有環(huán)境適應能力,能抵抗多種惡劣環(huán)境[13]。據(jù)Popowska M等[14]研究顯示,Lmo0327是具有LRR、LPXTG結構域的表面蛋白,缺失lmo0327基因后LM在42℃和25℃的生長能力有明顯的下降。據(jù)魏麗[15]研究發(fā)現(xiàn),LM90SB2△InlJ在pH7和pH9環(huán)境生長的菌量略高于野毒株,InlJ的缺失,可以提高LM的體外生長能力,同時能夠增強其耐堿性。但在pH5的生長能力略低于野毒株,說明InlJ可能在細菌抗酸性上有一定作用。Personnic N等[16]指出InlH在LM抵抗腸道內(nèi)的應激環(huán)境發(fā)揮一定作用。王少輝等[17]研究顯示,InlK基因缺失導致LM形成生物被膜的能力降低。Lmo0331蛋白是LPXTG表面蛋白的一員,對該蛋白在參與調(diào)控LM環(huán)境應激方面發(fā)揮的具體作用并未見相關報道。圖4 LM90SB2和LM90SB2△lmo0331在不同NaCl濃度下體外生長曲線

【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
[1]單核細胞增生李斯特菌RsbV基因缺失株的構建及其毒力和環(huán)境耐受性的研究[D]. 張再超.石河子大學 2013



本文編號:3613357

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