為了研究Lmo0331蛋白在單增李斯特菌環(huán)境適應(yīng)性中發(fā)揮的作用,利用同源重組的技術(shù)構(gòu)建LM90SB2△lmo0331基因缺失株,比較在不同溫度、pH、滲透壓下的生長(zhǎng)特性和生物被膜形成能力與野毒株的差異。結(jié)果顯示,在4℃環(huán)境下及含5g/L NaCl的BHI培養(yǎng)基中,LM90SB△lmo0331缺失株的生長(zhǎng)速度顯著高于LM90SB2野毒株（P<0.05）;在pH9的堿性環(huán)境及含45mL/L乙醇的BHI培養(yǎng)基中,LM90SB2△lmo0331缺失株繁殖數(shù)量低于野毒株（P<0.05）;其他條件下,LM90SB△lmo0331缺失株與野毒株的生長(zhǎng)無(wú)顯著差異;LM90SB2和LM90SB2△lmo0331在不同時(shí)間點(diǎn)生物被膜形成密度無(wú)顯著差異。由此表明,Lmo0331蛋白可能在低溫和堿性條件下發(fā)揮不同作用,這一結(jié)果為研究LM在脅迫環(huán)境生存機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2020,41(05)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

LM90SB2△lmo0331的PCR鑒定

NaCl耐受性測(cè)定結(jié)果顯示，在5g/L NaCl滲透壓環(huán)境下，LM90SB2△lmo0331缺失株在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期生長(zhǎng)趨勢(shì)比LM90SB2野毒株生長(zhǎng)快，結(jié)果差異顯著（P<0.05），但進(jìn)入穩(wěn)定期時(shí)間基本相同；兩株菌在50g/L NaCl和70g/L NaCl滲透壓環(huán)境下生長(zhǎng)生長(zhǎng)趨勢(shì)相同（P>0.05）。在100g/L NaCl滲透壓環(huán)境下，LM90SB2和LM90SB2△lmo0331兩株菌幾乎沒(méi)有生長(zhǎng)，生長(zhǎng)完全被抑制（圖4）。2.5 LM90SB2和LM90SB2△lmo0331在不同EtOH濃度條件下的生長(zhǎng)情況

單細(xì)胞生物在外界環(huán)境急劇變化時(shí)都會(huì)發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，將有一系列蛋白質(zhì)參與抵抗這些應(yīng)激，可使在多種逆境下生存，并且較快的適應(yīng)外界環(huán)境。LM也是擁有眾多的環(huán)境適應(yīng)因子和環(huán)境適應(yīng)調(diào)節(jié)因子，所以也具有環(huán)境適應(yīng)能力，能抵抗多種惡劣環(huán)境[13]。據(jù)Popowska M等[14]研究顯示，Lmo0327是具有LRR、LPXTG結(jié)構(gòu)域的表面蛋白，缺失lmo0327基因后LM在42℃和25℃的生長(zhǎng)能力有明顯的下降。據(jù)魏麗[15]研究發(fā)現(xiàn)，LM90SB2△InlJ在pH7和pH9環(huán)境生長(zhǎng)的菌量略高于野毒株，InlJ的缺失，可以提高LM的體外生長(zhǎng)能力，同時(shí)能夠增強(qiáng)其耐堿性。但在pH5的生長(zhǎng)能力略低于野毒株，說(shuō)明InlJ可能在細(xì)菌抗酸性上有一定作用。Personnic N等[16]指出InlH在LM抵抗腸道內(nèi)的應(yīng)激環(huán)境發(fā)揮一定作用。王少輝等[17]研究顯示，InlK基因缺失導(dǎo)致LM形成生物被膜的能力降低。Lmo0331蛋白是LPXTG表面蛋白的一員，對(duì)該蛋白在參與調(diào)控LM環(huán)境應(yīng)激方面發(fā)揮的具體作用并未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。圖4 LM90SB2和LM90SB2△lmo0331在不同NaCl濃度下體外生長(zhǎng)曲線

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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