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基于FnBPA和CD11c單鏈抗體的侵入型乳酸菌構(gòu)建及其分子免疫機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2022-01-26 19:14
  豬流感(Swine influenza,SI)是由豬流感病毒(Swine influenza virus,SIV)引起的一種急性、高度接觸性呼吸道傳染病,其特征為突發(fā)咳嗽、呼吸困難、發(fā)熱及迅速轉(zhuǎn)歸。SIV是一種球狀結(jié)構(gòu)的單股負(fù)鏈RNA分節(jié)段的病毒。其中血凝素(Hemagglutinin,HA)是SIV重要的膜蛋白,可以刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體。目前,流感疫苗主要有滅活疫苗、減毒疫苗、基因工程活疫苗等,以乳酸菌作為粘膜疫苗遞送載體也有研究,但遞送抗原效率有待加強(qiáng)。本研究以植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum,L.plantarum)NC8株作為宿主菌,構(gòu)建兩種侵入型L.plantarum表達(dá)載體:一種是表達(dá)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的侵襲素,即纖連蛋白結(jié)合蛋白A(Fibronectin binding protein A,FnBPA);另一種是表達(dá)針對(duì)CD11c的單鏈抗體(single-chain variable fragment against CD11c,scFv-CD11c,簡(jiǎn)稱aCD11c)。使用兩種新型侵入型乳酸菌遞送載體,... 

【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】:140 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

基于FnBPA和CD11c單鏈抗體的侵入型乳酸菌構(gòu)建及其分子免疫機(jī)制研究


由金黃色葡萄球菌引起的FnBP依賴性細(xì)胞侵襲的機(jī)制[97]

酶切鑒定,重組質(zhì)粒,同源性


FnBPA-D 的 PCR 擴(kuò)增結(jié)marker;1:FnBPA-D 的PCR amplification of FnBer; 1: Identification of FnB用 EcoRⅠ和 HindⅢ可見能清楚的看到兩對(duì),同源性達(dá)到 100100500372bp250M 1 2bp

蛋白,稀釋濃度,抗體滴度,抗體


FnBPA 血清的抗體滴抗體滴度,我們使用始稀釋濃度,做 8 個(gè)56000 進(jìn)行稀釋時(shí),抗512000 稀釋時(shí),二者DS-PAGE 檢測(cè)純化前后1:對(duì)照;2:純化后的 FnBPA-D protein before aotein standard; 1: Control;ein in the supernatant befo

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]歐亞禽系H1N1豬流感病毒在中國(guó)的流行和遺傳進(jìn)化[J]. 蘇惠娟,李鵬,陽姹,金梅林,陳煥春,周紅波.  中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2018(12)
[2]乳酸菌作為DNA疫苗載體的研究進(jìn)展[J]. 劉晶,楊桂連,王春鳳,姜延龍.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2016(07)

博士論文
[1]靶向樹突狀細(xì)胞通用型禽流感病毒重組乳酸菌的研究[D]. 楊文濤.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015

碩士論文
[1]兩種H1N1亞型豬流感基因工程疫苗的制備及免疫效果評(píng)價(jià)[D]. 范桂芳.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]基因重組對(duì)歐洲類禽H1N1亞型豬流感病毒生物學(xué)特性的影響[D]. 汪琪.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2018
[3]一株H1N1亞型豬流感病毒的分離鑒定及其脂質(zhì)體疫苗的制備[D]. 劉清政.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[4]表面展示豬流感病毒NS1乳酸菌pSIP409-pgsA-NS1的制備及其免疫作用的研究[D]. 楊威.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號(hào):3611028

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