為研究融合表達(dá)腫瘤靶向肽（RGD）、細(xì)胞穿膜肽（TAT）和白樹毒素（GEL）基因重組減毒沙門菌對乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的體外抑制作用,將重組質(zhì)粒載體pEGFP-RGD-TAT-GEL導(dǎo)入至減毒沙門菌LH430中,構(gòu)建了重組減毒沙門菌LH430-RGD-TAT-GEL。經(jīng)PCR、雙酶切鑒定正確后,將重組菌轉(zhuǎn)染MDA-MB-231細(xì)胞,提取總RNA后進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,采用PCR技術(shù)檢測目的基因的轉(zhuǎn)錄情況,細(xì)胞增殖毒性試驗檢測重組菌對MDA-MB-231細(xì)胞和HEK-293細(xì)胞的抑制率。結(jié)果顯示:被重組菌轉(zhuǎn)染后的MDA-MB-231細(xì)胞經(jīng)RT-PCR檢測,目的基因高效表達(dá),對MDA-MB-231細(xì)胞最佳抑制條件為細(xì)菌濃度1×10⁸ CFU/μL,轉(zhuǎn)染時間為48 h,且半數(shù)抑制濃度為4.643×10⁷CFU/μL。本試驗為研究細(xì)胞穿膜肽、核糖體失活蛋白和細(xì)菌聯(lián)合治療腫瘤的后續(xù)動物試驗提供試驗支持。 

【文章來源】：畜牧與獸醫(yī). 2020,52(10)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

PCR檢測各重組菌結(jié)果

重組減毒沙門菌侵染MDA-MB-231細(xì)胞后的結(jié)果(200×)

重組沙門菌各目的基因RT-PCR檢測結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]呈遞HPV16E7抗原的重組細(xì)菌外膜囊泡在TC-1腫瘤模型中的治療性干預(yù)[D]. 王世杰.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2017



本文編號：3608459