miRNA-206對(duì)牛乳腺上皮細(xì)胞脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達(dá)及脂肪酸組成的影響
發(fā)布時(shí)間：2022-01-24 11:11
牛奶中的脂肪酸含量及成分決定著牛奶的品質(zhì),而miRNA能夠調(diào)控哺乳動(dòng)物乳腺中脂質(zhì)代謝途徑,進(jìn)而影響脂質(zhì)含量及其成分。本研究旨在通過miRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)揭示miR-206對(duì)牛（Bos taurus）乳腺上皮細(xì)胞（bovine mammary epithelial cells, BMECs）中脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達(dá)、甘油三酯含量及脂肪酸組成的影響。在牛乳腺上皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)染60 nmol/L miR-206模擬物和抑制物,應(yīng)用qRT-PCR技術(shù)和生化方法分別檢測(cè)脂質(zhì)合成相關(guān)基因的表達(dá)和細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量,使用氣相色譜檢測(cè)脂肪酸組成的變化。結(jié)果表明,miR-206模擬物抑制甘油三酯合成相關(guān)基因線粒體甘油-3-磷酸�；D(zhuǎn)移酶（glycerol-3-phosphate acyltransferase mitochondrial, GPAM）、磷酸甘油�；D(zhuǎn)移酶6 （1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase6, AGPAT6）、二酰甘油�；D(zhuǎn)移酶1 （diacylglycerol O-acyltransferase 1, DGAT1）、脂素1 （lipin ...
【文章來源】：農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2020,28(11)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】：9 頁
【部分圖文】：
mi R-206模擬物(A)和抑制物(B)對(duì)牛乳腺上皮細(xì)胞脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達(dá)的影響
mi R-206對(duì)牛乳腺上皮細(xì)胞中甘油三酯含量的影響
乳腺上皮細(xì)胞中的甘油三酯主要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成。脂肪酸從頭合成過程中產(chǎn)生的脂酰輔酶A及外源攝取的脂肪酸被酯化后形成3-磷酸甘油骨架，然后經(jīng)GPAM作用而生成溶血磷脂酸(lysobisphosphatidic acids,LPA);LPA經(jīng)AGPAT家族催化生成磷脂酸，進(jìn)而在磷脂酸酶作用下發(fā)生去磷酸化反應(yīng)生成甘油二酯，通過DGAT家族催化生成甘油三酯。本研究結(jié)果顯示，在牛乳腺上皮細(xì)胞中，過表達(dá)mi R-206使甘油三酯合成相關(guān)酶的基因表達(dá)均顯著下調(diào)，抑制mi R-206則顯著上調(diào)。GPAM是合成甘油三酯第一步反應(yīng)的限速酶，細(xì)胞內(nèi)甘油三酯水平受到GPAM酶含量的調(diào)控(Roy et al.,2002;Roy et al.,2006)，敲除GPAM可顯著降低牛胚胎成纖維細(xì)胞中甘油三酯合成和脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)(Yu et al.,2017)。AGPAT6作為AGPAT家族亞型之一，是小鼠、牛、羊等哺乳動(dòng)物組織中甘油三酯和三�；视蜕锖铣傻年P(guān)鍵酶，AGPAT6在哺乳期的表達(dá)顯著上調(diào)(Bionaz,Loor,2008a)。DGAT1催化三�；视秃铣芍械哪┒�，是甘油三酯合成的關(guān)鍵酶，存在于所有細(xì)胞類型中，在甘油三酯合成最活躍的組織和器官中表達(dá)最高(Yen et al.,2008)。多個(gè)研究結(jié)果表明，DGAT1與乳脂含量顯著相關(guān)(Tabaran et al.,2015;Pacheco-Pappenheim et al.,2019;Tzompasosa et al.,2016)，在牛肌肉細(xì)胞中過表達(dá)DGAT1可以使三�；视秃可�(Liu et al.,2007)。此外LPIN1屬于LPIN家族，主要有兩方面的功能：一是編碼Mg2+依賴性的磷脂酶，促進(jìn)甘油三酯和磷脂合成；二是作為轉(zhuǎn)錄協(xié)同刺激因子調(diào)控過氧化物酶體活化過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferators-activated receptors,PPARγ)和PPARα等，進(jìn)而調(diào)控脂肪酸細(xì)胞分化和脂類代謝，對(duì)動(dòng)物脂肪沉積有重要影響。LPIN1具有促進(jìn)甘油二酯和甘油三酯生物合成的作用(Bionaz et al.,2012)。本研究中，過表達(dá)mi R-206使上述與甘油三酯合成相關(guān)的基因表達(dá)下調(diào)，同時(shí)細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量降低。圖2 mi R-206模擬物(A)和抑制物(B)對(duì)牛乳腺上皮細(xì)胞脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達(dá)的影響
本文編號(hào)：3606468
【文章來源】：農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2020,28(11)北大核心CSCD
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【部分圖文】：
mi R-206模擬物(A)和抑制物(B)對(duì)牛乳腺上皮細(xì)胞脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達(dá)的影響
mi R-206對(duì)牛乳腺上皮細(xì)胞中甘油三酯含量的影響
乳腺上皮細(xì)胞中的甘油三酯主要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成。脂肪酸從頭合成過程中產(chǎn)生的脂酰輔酶A及外源攝取的脂肪酸被酯化后形成3-磷酸甘油骨架，然后經(jīng)GPAM作用而生成溶血磷脂酸(lysobisphosphatidic acids,LPA);LPA經(jīng)AGPAT家族催化生成磷脂酸，進(jìn)而在磷脂酸酶作用下發(fā)生去磷酸化反應(yīng)生成甘油二酯，通過DGAT家族催化生成甘油三酯。本研究結(jié)果顯示，在牛乳腺上皮細(xì)胞中，過表達(dá)mi R-206使甘油三酯合成相關(guān)酶的基因表達(dá)均顯著下調(diào)，抑制mi R-206則顯著上調(diào)。GPAM是合成甘油三酯第一步反應(yīng)的限速酶，細(xì)胞內(nèi)甘油三酯水平受到GPAM酶含量的調(diào)控(Roy et al.,2002;Roy et al.,2006)，敲除GPAM可顯著降低牛胚胎成纖維細(xì)胞中甘油三酯合成和脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)(Yu et al.,2017)。AGPAT6作為AGPAT家族亞型之一，是小鼠、牛、羊等哺乳動(dòng)物組織中甘油三酯和三�；视蜕锖铣傻年P(guān)鍵酶，AGPAT6在哺乳期的表達(dá)顯著上調(diào)(Bionaz,Loor,2008a)。DGAT1催化三�；视秃铣芍械哪┒�，是甘油三酯合成的關(guān)鍵酶，存在于所有細(xì)胞類型中，在甘油三酯合成最活躍的組織和器官中表達(dá)最高(Yen et al.,2008)。多個(gè)研究結(jié)果表明，DGAT1與乳脂含量顯著相關(guān)(Tabaran et al.,2015;Pacheco-Pappenheim et al.,2019;Tzompasosa et al.,2016)，在牛肌肉細(xì)胞中過表達(dá)DGAT1可以使三�；视秃可�(Liu et al.,2007)。此外LPIN1屬于LPIN家族，主要有兩方面的功能：一是編碼Mg2+依賴性的磷脂酶，促進(jìn)甘油三酯和磷脂合成；二是作為轉(zhuǎn)錄協(xié)同刺激因子調(diào)控過氧化物酶體活化過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferators-activated receptors,PPARγ)和PPARα等，進(jìn)而調(diào)控脂肪酸細(xì)胞分化和脂類代謝，對(duì)動(dòng)物脂肪沉積有重要影響。LPIN1具有促進(jìn)甘油二酯和甘油三酯生物合成的作用(Bionaz et al.,2012)。本研究中，過表達(dá)mi R-206使上述與甘油三酯合成相關(guān)的基因表達(dá)下調(diào)，同時(shí)細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量降低。圖2 mi R-206模擬物(A)和抑制物(B)對(duì)牛乳腺上皮細(xì)胞脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達(dá)的影響
本文編號(hào)：3606468
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