實(shí)驗(yàn)室前期研究表明，使用ALV-Jgp85重組亞單位疫苗能夠誘導(dǎo)雛雞和種母雞產(chǎn)生中和抗體，對(duì)雛雞具有一定的保護(hù)作用，為了能夠用于種雞的凈化，需要對(duì)免疫原和佐劑的劑量進(jìn)行條件優(yōu)化。本研究利用本實(shí)驗(yàn)室已構(gòu)建的包含ALV-Jgp85基因的大腸桿菌重組表達(dá)載體系，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后獲得大量穩(wěn)定表達(dá)的ALV-Jgp85重組目的蛋白，經(jīng)Ni柱純化方法對(duì)獲得的目的蛋白進(jìn)行純化，對(duì)純化后的蛋白進(jìn)行Western-blot分析，然后使用不同劑量的重組蛋白和不同劑量的核酸佐劑制備成亞單位疫苗，分別免疫7日齡海蘭褐小公雛和400日齡的海蘭褐種母雞和500日齡的“農(nóng)大三號(hào)”成年母雞，檢測(cè)血清抗體或母源抗體。結(jié)果顯示：（1）200μg/只、100μg/只、50μg/只三個(gè)不同劑量的CpG核酸佐劑分別與ALV-J gp85重組蛋白免疫海蘭褐種母雞后均可誘導(dǎo)ALV-J的血清抗體，血清抗體滴度和抗體陽(yáng)性率雞只比率逐漸升高，抗體滴度在首免后28天和二次加強(qiáng)免疫后14天后出現(xiàn)峰值，各免疫組陽(yáng)性雞只比率在免疫后28天達(dá)最高。而所誘導(dǎo)的抗體效應(yīng)出現(xiàn)明顯的CpG劑量差異性，其中50μg組的劑量組誘導(dǎo)的血清抗體效價(jià)顯著高于其它兩個(gè)... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

ALV-Jgp85重組蛋白的表達(dá)、純化(A)和特異性分析(B)

不同劑量CpG聯(lián)合ALV-Jgp85重組蛋白接種種母雞后誘導(dǎo)血清抗體的動(dòng)態(tài)比較

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3605614