為獲得動物源乳酸菌并對其益生潛能進(jìn)行評價,對藍(lán)狐源乳酸菌進(jìn)行了分離鑒定并通過測定其生長曲線、產(chǎn)酸能力、對低p H和高膽鹽環(huán)境的耐受性、在體外模擬胃腸道溶液中的存活能力、抑菌能力、抗生素抗性、對藍(lán)狐小腸上皮原代細(xì)胞的黏附能力、抗氧化性及安全性評價了菌株的益生特性。將從藍(lán)狐的腸道內(nèi)容物中分離到的1株優(yōu)勢乳酸菌命名為ZJBF003,經(jīng)菌落菌體形態(tài)、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析將其鑒定為嗜酸乳桿菌。該菌株的產(chǎn)酸能力較強(qiáng)且在37℃培養(yǎng)時能迅速進(jìn)入對數(shù)生長期;在pH為5的MRS培養(yǎng)基中耐受6 h時仍能保持較好的生長情況,在膽鹽質(zhì)量濃度為3 g/L的條件下至少可耐受6 h,且存活率接近70%,在人工模擬胃液和腸液中耐受3 h時存活率高于95%;對大腸桿菌、沙門菌、金黃色葡萄球菌具有良好的抑菌效果;對藍(lán)狐小腸上皮原代細(xì)胞的黏附能力為（39.03±6.57）CFU/cell;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率為24.80%,表明菌株ZJBF003具有一定的抗氧化活性;小鼠安全性試驗(yàn)結(jié)果表明,無毒副作用。這些特性表明,新分離的藍(lán)狐源嗜酸乳桿菌ZJBF003株具有優(yōu)良的體外... 

【文章來源】：中國獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：11 頁

【部分圖文】：

菌株ZJBF003的菌落（左）及菌體形態(tài)（右1000×）

?嗜酸乳桿菌ZJBF003在不同酸性條件下的生長情況（P＜0.01）Figure3GrowthconditionofLactobacillusacidophilusZJBF003underdifferentacidicconditions（P＜0.01）表1嗜酸乳桿菌ZJBF003的生理生化特性Table1PhysiologicalandbiochemicalcharacteristicsofLactobacillusacidophilusZJBF0032.3菌株ZJBF003的生長曲線和產(chǎn)酸曲線的繪制將菌株ZJBF003接種于MRS培養(yǎng)基中，分別于第0、1、2、3、4、5、6、8、10、12、14、24小時取樣測定培養(yǎng)液D600值，于第0、2、4、6、8、10、12、14、24小時取樣測定培養(yǎng)液pH值。結(jié)果（見圖2）顯示，菌株ZJBF003在接種后2h內(nèi)生長緩慢，3h后迅速進(jìn)入對數(shù)生長期，8h后生長速度變緩，菌株達(dá)到生長穩(wěn)定期；菌株ZJBF003在接種2h內(nèi)pH下降緩慢，從6.22下降至6.10，2～8h內(nèi)，菌液pH從6.10快速下降至3.96；10h后菌液pH變化趨于平緩，基本穩(wěn)定在3.65左右。綜上所述，菌株ZJBF003可以在14h內(nèi)達(dá)到最大生長量和較低的pH。2.4菌株ZJBF003的體外益生特性2.4.1菌株在不同酸性條件下的生長情況將菌株ZJBF003接種于MRS培養(yǎng)基中，測定其對酸度的耐受性，結(jié)果如圖3所示。菌株ZJBF003在pH≤3.0時生長完全被抑制，隨培養(yǎng)時間延長，D600值未見變化。在pH＝4.0時，菌株能夠生長，但D600值明顯低于pH＝5.0、6.0、7.0時。在pH≥5.0時，菌株ZJBF003均能正常生長，但在到達(dá)穩(wěn)定期時D600值存在一定差別，其中D600值pH＝7.0＞pH＝6.0＞pH＝5.0，活菌數(shù)與D600值變化趨勢相一致。2.4.2菌株對人工胃/腸液的耐受性由表2可知，接種于人工胃液3h后菌株的存活率為（98.21±0.35）％，活菌濃度約為4.99×107CFU/mL；接種于人工腸液3h后菌株的存活率為（98.30±0.18）％，活菌濃度約為3.35×107CFU/mL，說?

第8期蔡熙姮等：藍(lán)狐源嗜酸乳桿菌ZJBF003株的分離鑒定及其體外益生潛能的評價圖3嗜酸乳桿菌ZJBF003在不同酸性條件下的生長情況（P＜0.01）Figure3GrowthconditionofLactobacillusacidophilusZJBF003underdifferentacidicconditions（P＜0.01）表1嗜酸乳桿菌ZJBF003的生理生化特性Table1PhysiologicalandbiochemicalcharacteristicsofLactobacillusacidophilusZJBF0032.3菌株ZJBF003的生長曲線和產(chǎn)酸曲線的繪制將菌株ZJBF003接種于MRS培養(yǎng)基中，分別于第0、1、2、3、4、5、6、8、10、12、14、24小時取樣測定培養(yǎng)液D600值，于第0、2、4、6、8、10、12、14、24小時取樣測定培養(yǎng)液pH值。結(jié)果（見圖2）顯示，菌株ZJBF003在接種后2h內(nèi)生長緩慢，3h后迅速進(jìn)入對數(shù)生長期，8h后生長速度變緩，菌株達(dá)到生長穩(wěn)定期；菌株ZJBF003在接種2h內(nèi)pH下降緩慢，從6.22下降至6.10，2～8h內(nèi)，菌液pH從6.10快速下降至3.96；10h后菌液pH變化趨于平緩，基本穩(wěn)定在3.65左右。綜上所述，菌株ZJBF003可以在14h內(nèi)達(dá)到最大生長量和較低的pH。2.4菌株ZJBF003的體外益生特性2.4.1菌株在不同酸性條件下的生長情況將菌株ZJBF003接種于MRS培養(yǎng)基中，測定其對酸度的耐受性，結(jié)果如圖3所示。菌株ZJBF003在pH≤3.0時生長完全被抑制，隨培養(yǎng)時間延長，D600值未見變化。在pH＝4.0時，菌株能夠生長，但D600值明顯低于pH＝5.0、6.0、7.0時。在pH≥5.0時，菌株ZJBF003均能正常生長，但在到達(dá)穩(wěn)定期時D600值存在一定差別，其中D600值pH＝7.0＞pH＝6.0＞pH＝5.0，活菌數(shù)與D600值變化趨勢相一致。2.4.2菌株對人工胃/腸液的耐受性由表2可知，接種于人工胃液3h后菌株的存活率為（98.21±0.35）％，活菌濃度約為4.99×107CFU/mL；接種于人工腸液

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]益生菌中乳酸菌概況及檢測技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 周莉,平洋,譚靜,張亞勛,羅蓓蓓.  中國調(diào)味品. 2019(10)
[2]羅伊氏乳桿菌ZL2a株體外益生潛能的評價[J]. 賈丹,王雅,李禤,王杰,李賀海,劉軍龍,關(guān)貴全,羅建勛,殷宏,李有全.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2019(11)
[3]乳酸菌在動物營養(yǎng)中的應(yīng)用與研究進(jìn)展[J]. 湯悅,謝智銀,許阿荔,汪沐,謝鵬.  畜牧與飼料科學(xué). 2018(05)
[4]一株豬源嗜酸乳桿菌體外生長、產(chǎn)酸、抑菌、黏附及抗氧化能力的研究[J]. 趙臣,王四新,張董燕,劉輝,王晶,張偉,魏時來,季海峰.  甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(02)
[5]自然發(fā)酵泡菜汁中植物乳桿菌的分離鑒定與體外益生特性研究[J]. 侯穎,王維宇,牛明福,馬麗蘋,秦翠麗,宮強(qiáng).  動物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2017(10)
[6]嗜酸乳桿菌對生長期藍(lán)狐體增重的影響[J]. 代麗仙,李琦,鄒琦,劉偉石.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2016(09)
[7]嗜酸乳桿菌培養(yǎng)物對斷奶仔豬腸道發(fā)育及消化酶活性的影響[J]. 劉陽,熊昊,游金明,賀琴.  飼料工業(yè). 2015(24)
[8]雞源性嗜酸乳桿菌對肉雞小腸黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞的影響[J]. 祁鳳華,扇玉斌,周立強(qiáng),徐春生,張文舉.  石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(01)
[9]腸道菌群影響宿主行為的研究進(jìn)展[J]. 羅佳,金鋒.  科學(xué)通報(bào). 2014(22)
[10]魚類腸道嗜酸乳桿菌的分離及功能特性分析[J]. 王琳珺,潘道東,楊媛,吳振,曾小群.  中國食品學(xué)報(bào). 2014(05)

碩士論文
[1]不同處理豆粕及嗜酸乳桿菌對斷奶仔豬生長性能、腸黏膜屏障功能的影響[D]. 廖珂.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]酸奶及發(fā)酵劑中分離乳酸菌藥物敏感性研究[D]. 李艷莉.華南理工大學(xué) 2015
[3]羅伊氏乳桿菌生物學(xué)特性及功能性發(fā)酵乳的研究[D]. 李正華.江南大學(xué) 2008



本文編號：3601864