豆科植物種類繁多,其中有超過450種不同黃芪屬種及其變種普遍含有3-硝基-1-丙酸（NPA）和3-硝基-1-丙醇（NPOH）硝基毒素,而家畜對這些植物具有潛在的采食性。美國西部每年由于誤食硝基毒素而引起家畜中毒所造成的經(jīng)濟(jì)損失已超20億美元。面對日趨嚴(yán)重的緊迫現(xiàn)狀,美國農(nóng)業(yè)部也為此成立專門項目用于解決有毒植物引起家畜中毒問題。前期研究發(fā)現(xiàn),至少有一種瘤胃細(xì)菌可降解此類有毒物質(zhì),但在其他動物消化道內(nèi)是否也存在降解菌卻不得而知。本試驗(yàn)選取生長于美國西部德克薩斯州College Station的瘺管Jersey（杰西）奶牛瘤胃微生物樣品和瘺管騸馬盲腸內(nèi)容物,通過使用富集培養(yǎng)基并添加4.2mM NPA或NPOH用于富集二者中能夠降解硝基毒素的細(xì)菌混合種群,對比反芻動物牛瘤胃與單胃動物馬盲腸內(nèi)微生物降解硝基毒素的能力,并使用不同氣體培養(yǎng)介質(zhì)和硝基化合物研究其對NPA代謝活性的影響,以期明晰其硝基代謝活性特征,對其降解特性及機(jī)理進(jìn)行研究。對已富集的馬盲腸微生物進(jìn)行分離培養(yǎng),分別利用傳統(tǒng)培養(yǎng)法（Plate）和Hungate滾管法（Roll tube）分離單株菌株并利用16S rRNA序列分析對已分離... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略表&中英文對照表
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 美國有毒植物概述
        1.2.1 美國主要有毒植物種類
        1.2.2 棘豆屬(Oxytropis)和黃芪屬(Astragalus)有毒植物
            1.2.2.1 聚硒黃芪
            1.2.2.2 瘋草(Locoweed)
            1.2.2.3 含脂肪族硝基化合物的黃芪
    1.3 脂肪族硝基毒素研究現(xiàn)狀
        1.3.1 米瑟毒苷(Miserotoxin)和狗角藤苷(Karakin)毒性機(jī)理
        1.3.2 動物硝基毒素中毒癥狀
        1.3.3 硝基毒素在植物中的分布
        1.3.4 瘤胃代謝及解毒潛力
    1.4 NPA和NPOH的代謝及神經(jīng)毒性
        1.4.1 NPA和NPOH在植物界中的分布與合成
        1.4.2 NPA和NPOH在動物體內(nèi)代謝
        1.4.3 NPA和NPOH對動物的神經(jīng)毒性
    1.5 研究思路
    1.6 技術(shù)路線(見示意圖)
第二章 NPA和NPOH快速定量檢測方法建立
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 試驗(yàn)動物
        2.2.2 基礎(chǔ)富集培養(yǎng)基配制
        2.2.3 微生物培養(yǎng)條件
        2.2.4 NPA和NPOH快速測定分析方法
    2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 非富集的牛瘤胃和馬盲腸微生物對NPA和NPOH代謝速率的比較
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 試驗(yàn)動物
        3.2.2 BEM培養(yǎng)基配制
        3.2.3 微生物培養(yǎng)條件
        3.2.4 樣品分析
        3.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    3.3 結(jié)果與討論
    3.4 小結(jié)
第四章 不同氣體培養(yǎng)介質(zhì)和硝基化合物對NPA代謝活性的影響
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 試驗(yàn)動物
        4.2.2 BEM培養(yǎng)基配制
        4.2.3 微生物培養(yǎng)條件
        4.2.4 樣品分析
        4.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 NPA代謝微生物種群的富集
        4.3.2 不同氣體培養(yǎng)介質(zhì)對NPA代謝活性的影響
        4.3.3 不同的硝基化合物對NPA代謝活性的影響
        4.3.4 抑制劑對富集的馬盲腸微生物硝基代謝活性的影響
    4.4 小結(jié)
第五章 馬盲腸液中硝基降解菌的分離與鑒定
    5.1 前言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 試驗(yàn)動物
        5.2.2 Plate培養(yǎng)基及Roll tube培養(yǎng)基的配制
        5.2.3 微生物培養(yǎng)條件
        5.2.4 OD值測定及生長曲線繪制
        5.2.5 馬盲腸微生物基因組DNA的提取和PCR反應(yīng)
        5.2.6 數(shù)據(jù)分析
        5.2.7 DGGE比對
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 單株菌株生長曲線
        5.3.2 馬盲腸液中NPA/nitrate富集微生物菌株16S rRNA基因序列分析結(jié)果
        5.3.3 DGGE
    5.4 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]3-硝基丙酸建模探討亨廷頓舞蹈病發(fā)病機(jī)制進(jìn)展[J]. 盛莉莉,張寶榮.  國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志. 2007(04)
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[10]瘋草中毒的研究進(jìn)展[J]. 黃玉茜,張恩然,潘維鋒.  山東科學(xué). 2003(04)

博士論文
[1]苦馬豆素降解菌分離、鑒定與特性研究[D]. 趙興華.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008



本文編號：3593892