PRRSV結(jié)構(gòu)蛋白GP5的原核表達(dá)與鑒定
發(fā)布時間:2022-01-15 19:34
利用大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)體外表達(dá)豬繁殖和呼吸障礙綜合征病毒的GP5蛋白,可為GP5蛋白的應(yīng)用奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。研究利用PCR技術(shù)獲得帶有酶切位點的gp5基因,通過酶切、連接構(gòu)建p Cold I-gp5重組質(zhì)粒,并將其轉(zhuǎn)化至BL21感受態(tài)細(xì)胞,獲得陽性單克隆后誘導(dǎo)其表達(dá),對表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行SDS-PAGE和Western Blotting分析。結(jié)果顯示,p Cold I-gp5原核表達(dá)載體構(gòu)建成功,該重組載體在大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中能夠表達(dá),并且重組蛋白GP5以可溶性蛋白的形式表達(dá)。
【文章來源】:山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(11)
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 豬PRRSV中GP5蛋白基因的克隆
1.2 p Cold I-gp5重組質(zhì)粒的構(gòu)建
1.3 BL21-GP5誘導(dǎo)表達(dá)與鑒定
2 結(jié)果與分析
2.1 GP5蛋白基因的獲取
2.2 構(gòu)建GP5重組質(zhì)粒
2.3 SDS電泳和Western Blotting結(jié)果
3 結(jié)論與討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]淺談豬繁殖與呼吸綜合征病毒中和抗體的研究進(jìn)展[J]. 李琳,冷超糧. 飼料博覽. 2020(06)
[2]豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5蛋白單抗的制備與鑒定[J]. 黃曉靜,李睿,喬松林,楊艷艷,鄧瑞廣,張改平. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2019(11)
[3]IPMA篩選豬繁殖與呼吸綜合征病毒單克隆抗體方法研究[J]. 楊艷艷,喬松林,李睿,郭軍慶,李青梅,滕蔓,王麗,趙東,李學(xué)伍,鄧瑞廣,張改平. 華北農(nóng)學(xué)報. 2019(03)
[4]PRRSV GP5蛋白在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)[J]. 許瑞勤,郭嘉,魏鳳靈,馮延,馬思續(xù),張留君,李想通,李聞,孫楊楊,楊國宇,夏平安,張改平. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2019(04)
[5]中國豬繁殖與呼吸綜合征病毒流行歷史及現(xiàn)狀[J]. 郭振華,陳鑫鑫,李睿,喬松林,郭軍慶,張改平. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2018(01)
[6]巴馬香豬超前免疫高致病性豬繁殖與呼吸綜合征弱毒疫苗的免疫效果評價[J]. 黃良宗,王淑敏,馬春全,張桂紅,顧萬軍. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2011(02)
[7]豬群暴發(fā)豬瘟與藍(lán)耳病混合感染的診斷與防制[J]. 孟帆,姚敬明,吳忻,韓一超,王娟萍,樊振華,岳磊. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(06)
[8]山東某豬場繁殖障礙性疾病的診斷研究[J]. 吳素麗,孫惠玲,張平,張培君,錢永華,高立娜. 華北農(nóng)學(xué)報. 2009(03)
[9]豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分離與初步鑒定[J]. 楊漢春,管山紅,尹曉敏,甘孟侯. 中國獸醫(yī)雜志. 1997(10)
本文編號:3591201
【文章來源】:山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(11)
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 豬PRRSV中GP5蛋白基因的克隆
1.2 p Cold I-gp5重組質(zhì)粒的構(gòu)建
1.3 BL21-GP5誘導(dǎo)表達(dá)與鑒定
2 結(jié)果與分析
2.1 GP5蛋白基因的獲取
2.2 構(gòu)建GP5重組質(zhì)粒
2.3 SDS電泳和Western Blotting結(jié)果
3 結(jié)論與討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]淺談豬繁殖與呼吸綜合征病毒中和抗體的研究進(jìn)展[J]. 李琳,冷超糧. 飼料博覽. 2020(06)
[2]豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5蛋白單抗的制備與鑒定[J]. 黃曉靜,李睿,喬松林,楊艷艷,鄧瑞廣,張改平. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2019(11)
[3]IPMA篩選豬繁殖與呼吸綜合征病毒單克隆抗體方法研究[J]. 楊艷艷,喬松林,李睿,郭軍慶,李青梅,滕蔓,王麗,趙東,李學(xué)伍,鄧瑞廣,張改平. 華北農(nóng)學(xué)報. 2019(03)
[4]PRRSV GP5蛋白在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)[J]. 許瑞勤,郭嘉,魏鳳靈,馮延,馬思續(xù),張留君,李想通,李聞,孫楊楊,楊國宇,夏平安,張改平. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2019(04)
[5]中國豬繁殖與呼吸綜合征病毒流行歷史及現(xiàn)狀[J]. 郭振華,陳鑫鑫,李睿,喬松林,郭軍慶,張改平. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2018(01)
[6]巴馬香豬超前免疫高致病性豬繁殖與呼吸綜合征弱毒疫苗的免疫效果評價[J]. 黃良宗,王淑敏,馬春全,張桂紅,顧萬軍. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2011(02)
[7]豬群暴發(fā)豬瘟與藍(lán)耳病混合感染的診斷與防制[J]. 孟帆,姚敬明,吳忻,韓一超,王娟萍,樊振華,岳磊. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(06)
[8]山東某豬場繁殖障礙性疾病的診斷研究[J]. 吳素麗,孫惠玲,張平,張培君,錢永華,高立娜. 華北農(nóng)學(xué)報. 2009(03)
[9]豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分離與初步鑒定[J]. 楊漢春,管山紅,尹曉敏,甘孟侯. 中國獸醫(yī)雜志. 1997(10)
本文編號:3591201
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