牛多殺性巴氏桿菌是一種能引起牛出血性敗血癥和牛肺炎的重要病原,給肉牛養(yǎng)殖帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。根據(jù)其莢膜抗原不同可分為A、B、D、E、F等5種血清型,其中血清B和E型主要導(dǎo)致牛出血性敗血癥,血清A和F型主要引起牛呼吸系統(tǒng)疾病,導(dǎo)致牛肺炎。近年來(lái),隨著肉牛養(yǎng)殖的迅速發(fā)展,肉牛的頻繁調(diào)運(yùn)導(dǎo)致的運(yùn)輸應(yīng)激致使牛多殺性巴氏桿菌病的流行呈上升趨勢(shì)。目前,我們對(duì)牛多殺性巴氏桿菌致病機(jī)制還知之甚少,同時(shí)針對(duì)這方面的研究也較少,本文擬通過(guò)研究牛多殺性巴氏桿菌誘導(dǎo)細(xì)胞炎性的信號(hào)通路,探討牛多殺性巴氏桿菌的致病機(jī)制,為牛多殺性巴氏桿菌病新的控制策略及新型疫苗研發(fā)提供思路。本實(shí)驗(yàn)以牛多殺性巴氏桿菌A型（Pm A）和B型（Pm B）菌株分別感染小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7,通過(guò)q RT-PCR、Western Blot、ELISA等技術(shù)手段研究其炎癥機(jī)制,其主要目標(biāo)為:（1）在體外條件下,探究Pm A和Pm B是否可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的炎性反應(yīng);（2）Toll樣受體是否參與炎癥信號(hào)通路的激活;（3）NF-κB、MAPK信號(hào)通路是否參與了炎癥信號(hào)通路的調(diào)節(jié);（4）炎性小體是否參與炎癥信號(hào)通路的調(diào)節(jié);（5）細(xì)胞吞噬作用... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 牛多殺性巴氏桿菌概述
        1.1.1 牛多殺性巴氏桿菌病
        1.1.2 牛多殺性巴氏桿菌致病機(jī)制
    1.2 炎癥機(jī)制
        1.2.1 炎癥反應(yīng)
        1.2.2 炎癥反應(yīng)的重要核心–IL-1β
        1.2.3 TNF-α
        1.2.4 炎性小體
    1.3 NF-κB信號(hào)通路與炎癥反應(yīng)
    1.4 MAPK信號(hào)通路與炎癥反應(yīng)
        1.4.1 JNK信號(hào)通路
        1.4.2 P38信號(hào)通路
    1.5 Toll樣受體與炎癥反應(yīng)
        1.5.1 TLR2
        1.5.2 TLR4
    1.6 細(xì)胞吞噬作用對(duì)炎癥信號(hào)通路的影響
第二章 引言
    2.1 研究目的及意義
    2.2 研究的主要內(nèi)容
        2.2.1 Pm A、Pm B誘導(dǎo)細(xì)胞的炎癥反應(yīng)
        2.2.2 Pm A、Pm B誘導(dǎo)細(xì)胞炎癥反應(yīng)與Toll樣受體的關(guān)系
        2.2.3 Pm A、Pm B誘導(dǎo)細(xì)胞炎癥與NF-κB、MAPK信號(hào)通路關(guān)系
        2.2.4 Pm A、Pm B誘導(dǎo)細(xì)胞炎癥反應(yīng)與炎性小體的關(guān)系
        2.2.5 NF-κB、MAPK信號(hào)通路與炎性小體
        2.2.6 細(xì)胞吞噬作用與Pm A、Pm B誘導(dǎo)炎癥信號(hào)通路的激活
    2.3 技術(shù)路線
第三章 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 菌株
        3.1.2 細(xì)胞
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要儀器
    3.2 方法
        3.2.1 Pm A、Pm B的培養(yǎng)及PCR鑒定
        3.2.2 小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7 的培養(yǎng)
        3.2.3 樣本的制備
        3.2.4 提取小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7 總RNA
        3.2.5 c DNA的合成
        3.2.6 SYBR Green I實(shí)時(shí)定量PCR
        3.2.7 ELISA的檢測(cè)
        3.2.8 Western Blot檢測(cè)目的蛋白在巨噬細(xì)胞中的表達(dá)
        3.2.9 數(shù)據(jù)分析
第四章 結(jié)果與分析
    4.1 Pm A、Pm B的培養(yǎng)及PCR鑒定
    4.2 q RT-PCR擴(kuò)增曲線和熔解曲線
    4.3 Pm A、Pm B誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)
    4.4 TLR2、TLR4介導(dǎo)炎癥信號(hào)通路的激活
    4.5 NF-κB、MAPK信號(hào)通路參與炎癥信號(hào)通路的激活
    4.6 炎性小體參與Pm A、Pm B誘導(dǎo)的炎癥信號(hào)通路
        4.6.1 炎性小體接頭蛋白ASC的激活
        4.6.2 Pm A、Pm B誘導(dǎo)炎癥信號(hào)通路的激活依賴于Caspase-1
        4.6.3 NLRP3、NLRP6參與Pm A、Pm B誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)
    4.7 NF-κB、MAPK信號(hào)通路參與調(diào)控NLRP3、NLRP6炎性小體
    4.8 細(xì)胞吞噬作用參與炎癥信號(hào)通路的激活
第五章 討論與結(jié)論
    5.1 討論
    5.2 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]牛多殺性巴氏桿菌疫苗研究進(jìn)展[J]. 謝倩茹,陳穎鈺,胡長(zhǎng)敏,郭愛珍.  中國(guó)奶牛. 2015(15)
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博士論文
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[2]小鼠播散性巨細(xì)胞病毒感染的免疫應(yīng)答和致病機(jī)制研究 1)小鼠脾巨噬細(xì)胞DNA感受器AIM2識(shí)別MCMV DNA激活其炎性體通路的整體研究 2)Th17細(xì)胞在急性播散性MCMV感染致病機(jī)制中的作用[D]. 李旭芳.華中科技大學(xué) 2012

碩士論文
[1]牛多殺性巴氏桿菌A型、B型二價(jià)滅活疫苗的研究[D]. 汪漫.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]TLR誘導(dǎo)NF-κB活化上調(diào)NLRP3表達(dá)的機(jī)制研究[D]. 喬羽.山東大學(xué) 2012
[3]NLRP3炎癥復(fù)合體信號(hào)通路分子在幽門螺桿菌感染小鼠模型中表達(dá)的研究[D]. 蔣建燁.南華大學(xué) 2012
[4]TNF-α、IL-1β基因多態(tài)性和相關(guān)影響因素與軍團(tuán)菌感染關(guān)系的研究[D]. 智霞萍.山西醫(yī)科大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3588701