促性腺激素抑制激素（GnIH）能以劑量依賴的模式作用于垂體前葉減少促性腺激素的釋放,是目前發(fā)現(xiàn)的唯一能抑制生殖系統(tǒng)發(fā)育和功能的神經(jīng)肽。GnIH能從下丘腦、垂體和性腺三個方面同時對繁殖進行調(diào)節(jié)。除了繁殖方面,它還在壓力反射、攝食調(diào)節(jié)和季節(jié)性繁殖等多個方面起著重要的調(diào)節(jié)作用。為了研究GnIH對鵝繁殖的影響,本試驗檢測了GnIH及其兩個受體RFRPR和NPFFR在產(chǎn)蛋高峰期母鵝不同組織中的表達,并以鵝卵巢顆粒細胞為研究模型,通過添加不同濃度的外源GnIH處理,分析了GnIH對鵝卵巢顆粒細胞功能的影響。主要研究結果如下：（1）獲得了GnIH前體mRNA、RFRPR、NPFFR的編碼區(qū)部分CDS區(qū)序列。通過序列分析和氨基酸比對,發(fā)現(xiàn)RFRPR與NPFFR之間堿基序列的同源性為65.35%,并且都具有7個相似的氨基酸跨膜結構域。（2）分析了GnIH前體mRNA在產(chǎn)蛋高峰期母鵝不同組織的表達模式。發(fā)現(xiàn)GnIH在下丘腦中的表達最高,除了腦部外,在腎上腺、輸卵管和卵巢中也有表達,說明GnIH主要的合成場所是下丘腦。（3） RFRPR和NPFFR主要在腦部表達。RFRPR更符合GnIH免疫神經(jīng)纖維的分布,... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
主要符號說明
前言
1 文獻綜述
    1.1 GNIH的發(fā)現(xiàn)以及在腦部的定位
    1.2 GNIH受體的鑒別
    1.3 GNIH的表達與釋放
        1.3.1 褪黑激素對GnIH的調(diào)控
        1.3.2 壓力對GnIH的調(diào)控
    1.4 GNIH在垂體中的研究
    1.5 GNIH在生殖腺中的重要作用
    1.6 研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗動物
        2.1.2 主要試驗器材與軟件
        2.1.3 主要試劑和試劑盒
        2.1.4 主要試劑與配制
    2.2 試驗方法
        2.2.1 目的基因部分序列的獲得
        2.2.2 鵝顆粒細胞的培養(yǎng)
        2.2.3 不同濃度GnIH處理鵝顆粒細胞
        2.2.4 鵝各組織及顆粒細胞中GnIH相關基因mRNA表達水平檢測
        2.2.5 不同濃度GnIH處理鵝顆粒細胞后雌二醇和孕酮分泌的變化
        2.2.6 不同濃度GnIH處理鵝顆粒細胞的BrdU免疫組化染色
        2.2.7 不同濃度GnIH處理鵝顆粒細胞的TUNEL免疫組化染色
        2.2.8 GnIH對顆粒細胞活性的影響
3 結果與分析
    3.1 鵝RFRPR和NPFFR基因部分序列的獲得
        3.1.1 鵝組織RNA的提取和RT-PCR結果
        3.1.2 基因同源性分析及分子進化樹的構建
        3.1.3 蛋白質結構比對與分析
    3.2 鵝各組織中GNIH、RFRPR和NPFFR的MRNA表達水平
    3.3 GNIH對顆粒細胞類固醇激素合成與分泌的影響
        3.3.1 GnIH對顆粒細胞E_2和P_4的分泌影響
        3.3.2 GnIH對顆粒細胞類固醇激素合成相關基因的調(diào)控
    3.4 GNIH對顆粒細胞凋亡的影響
        3.4.1 GnIH對顆粒細胞活性的影響
        3.4.2 BrdU和TUNEL免疫組化實驗
        3.4.3 GnIH對增殖與凋亡相關基因的影響
    3.5 GNIH的相關調(diào)控
4 討論
    4.1 基因進化分析
    4.2 GNIH及其受體基因在鵝不同組織中的表達
    4.3 GNIH能抑制顆粒細胞類固醇激素的合成與分泌
    4.4 GNIH促進顆粒細胞凋亡
    4.5 GNIH能通過LH-R和FSH-R來實現(xiàn)對顆粒細胞的調(diào)節(jié)
5 結論
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文及著作


【參考文獻】：
期刊論文
[1]鵝GnIH基因克隆及其在卵泡發(fā)育中的表達規(guī)律研究[J]. 董霞,肖其海,劉賀賀,韓春春,王繼文,李亮.  中國家禽. 2013(07)



本文編號：3584560