為建立能同時(shí)檢測(cè)牛諾如病毒（BNoV）、牛星狀病毒（BAstV）和牛環(huán)曲病毒（BToV）的方法,根據(jù)BNoV、BAstV和BToV基因組的保守區(qū)域設(shè)計(jì)3對(duì)特異性引物,預(yù)期特異性擴(kuò)增BNoV、BAstV和BToV的片段大小分別為542,376,698 bp,建立了BNoV、BAstV和BToV的多重PCR檢測(cè)方法。結(jié)果顯示,該方法能特異性擴(kuò)增BNoV、BAstV和BToV的目的條帶,且未擴(kuò)增出其他犢牛腹瀉病原;BNoV、BAstV和BToV的最低檢測(cè)限分別為1.34×10⁴,1.06×10⁴,1.03×10⁴拷貝/μL。對(duì)采集自河南省的221份犢牛腹瀉樣品的檢測(cè)結(jié)果顯示,BNoV、BAstV和BToV的檢出率分別為9.96%（22/221）,18.10%（40/221）和19.00%（42/221）。三者與單一PCR檢測(cè)結(jié)果相一致。結(jié)果表明,本試驗(yàn)建立的多重PCR方法可用于BNoV、BAstV和BToV的檢測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,40(10)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

BNoV、BAstV和BToV多重和單一PCR擴(kuò)增結(jié)果

多重PCR的特異性試驗(yàn)

經(jīng)核酸分析儀測(cè)定,pMD18-T-BNoV、pMD18-T-BAstV和pMD18-T-BToV的質(zhì)粒質(zhì)量濃度分別為47.6,35.7和38.3 mg/L。結(jié)果顯示,用建立的多重PCR方法對(duì)BNoV、BAstV和BToV的最低檢測(cè)限分別為1.34×104,1.06×104和1.03×104 拷貝/μL(圖3)。2.4 重復(fù)性試驗(yàn)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]牛環(huán)曲病毒RT-PCR檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[J]. 師志海,徐照學(xué),蘭亞莉,王文佳,孟紅麗,王亞州.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2019(12)



本文編號(hào)：3583570