牛結(jié)核�。˙ovine Tuberculosis）主要由牛分枝桿菌（M. bovis）感染引起。牛結(jié)核病的防治和徹底根除需要靈敏、有效的診斷方法,目前以牛提純結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗和IFN-γ釋放試驗應(yīng)用最為廣泛。與皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗相比,IFN-γ釋放試驗靈敏度高,但是進口的IFN-γ檢測試劑盒價格昂貴,發(fā)展中國家的養(yǎng)殖企業(yè)難以承擔(dān)。因此,篩選能夠作為結(jié)核病診斷用的新型細胞因子,進而建立相關(guān)診斷方法,符合我國畜牧業(yè)和奶業(yè)發(fā)展的需要。研究主要以臨床結(jié)核病陽性牛和人工感染牛為試驗對象,收集外周血淋巴細胞,經(jīng)牛結(jié)核菌素（PPD-B）或重組CE蛋白刺激后,用熒光定量PCR和間接ELISA方法分別檢測外周血淋巴細胞中IL-6、IL-12A、IL-17A、IP-10和TNF-α的轉(zhuǎn)錄、表達水平,分析各細胞因子與IFN-γ轉(zhuǎn)錄、表達水平之間的相關(guān)性,初步探討其與牛分枝桿菌感染之間的關(guān)系,以期篩選到可用于牛結(jié)核病診斷的細胞因子。結(jié)果表明,臨床結(jié)核病陽性牛外周血淋巴細胞IP-10與IL-17A的nRNA相對轉(zhuǎn)錄水平顯著高于健康牛,與IFN-γ的mRNA轉(zhuǎn)錄具有良好相關(guān)性,表明IP-10與IL-17A的... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

實驗動物皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)及IFN-Y釋放試驗檢測結(jié)果

蛋白表達水平之間相關(guān)性，如表2.4。結(jié)果顯示在CE刺激后，丨FN-Y與IL-17、IP-IO、TNF-a的蛋白表達水平之間無相關(guān)性（5口^11113111"值分別為-0.1429，-0.4714和-0.2643),而且圖2.5顯示在重組蛋白CE刺激全血后，只有IFN-Y的蛋白表達水平在結(jié)核病陽性牛和健康牛之間有顯著性差異，陰性健康牛血裝中IL-17、丨P-IO、TNF-a的蛋白表達水平均高于IFN-Y,但是與結(jié)核病陽性牛樣品中的表達水平無顯著差異，因此IL-17、[P-IO、TNF-a的蛋白表達水平不適合作為牛結(jié)核病的分子標19

5頭陰性健康牛的全血或PBMC樣品）的IFN-y、IL-17、IP-10的TNF-a的mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達水平進行相關(guān)性分析，結(jié)果如圖2.6。結(jié)果顯示，IFN-y的蛋白表達水平與mRNA轉(zhuǎn)錄水平之間有一定的相關(guān)性，其spearman r為0.6286，而IL-17、IP-10. TNF-a的蛋白表達稅與mRNA轉(zhuǎn)錄水平之間并無相關(guān)性。20

【參考文獻】：
期刊論文
[1]牛結(jié)核病診斷方法的研究進展[J]. 王金果,劉愛林,周向梅,苑方重,尹曉敏,楊建民,楊利峰,趙德明.  中國畜牧獸醫(yī). 2010(07)



本文編號：3582334