培養(yǎng)大鼠源H9C2心肌細(xì)胞進(jìn)行試驗,共分為6組,對照組（加入細(xì)胞培養(yǎng)液）;模型組(10^-6mol/L去甲腎上腺干預(yù)48 h);卡托普利組與模型組同樣處理后,加入卡托普利5 mg/L;五味子醇甲低、中、高劑量組與模型組同樣處理后,分別加入五味子醇甲5,10,20 mg/L,作用48 h。通過觀察HE染色細(xì)胞的形態(tài)變化,圖像分析系統(tǒng)測定心肌細(xì)胞表面積,MTT法檢測細(xì)胞存活率,Hoechst33342染色法檢測心肌細(xì)胞的凋亡率,JC-1法測定線粒體膜電位,Western blot檢測CT-I、CT-T、ET-1蛋白表達(dá)。結(jié)果顯示,五味子醇甲可降低心肌細(xì)胞凋亡率和提高心肌細(xì)胞存活率,對心肌細(xì)胞的形態(tài)具有改善作用,并下調(diào)了CT-1、CT-T、ET-1蛋白表達(dá)。結(jié)果表明,五味子醇甲對去甲腎上腺素誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用,可能通過下調(diào)CT-I、CT-T、ET-1蛋白表達(dá),降低炎性反應(yīng),減少對心肌細(xì)胞的損傷凋亡。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)學(xué)報. 2020,40(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

MTT法檢測五味子醇甲保護(hù)心肌細(xì)胞損傷的細(xì)胞存活率變化

通過Hoechst33342染色觀察五味子醇甲對損傷心肌細(xì)胞凋亡的影響(圖2),正常細(xì)胞核呈現(xiàn)均勻的藍(lán)色熒光,形狀較為規(guī)則。凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞膜被破壞,核內(nèi)DNA的結(jié)構(gòu)改變更易于結(jié)合Hoechest33342染料,而出現(xiàn)亮藍(lán)色熒光,形狀具有不規(guī)則形,染色質(zhì)皺縮,藍(lán)色團(tuán)塊出現(xiàn)碎裂。模型組(MOD)、卡托普利治療組(CA)、低劑量治療組(GL)、中劑量治療組(GM)和高劑量治療組(GH)與對照組(CON)比較細(xì)胞凋亡率均顯著性升高(P<0.01);與MOD組對比,CA、GM、GH組細(xì)胞凋亡率極顯著性降低(P<0.01),但GL組顯著性降低(P<0.05)。2.3 心肌細(xì)胞形態(tài)觀察

如下圖5所示,JC-1在CCCP熒光陽性對照組中綠色熒光明顯較強(qiáng),線粒體膜電位下降,對照組的紅色熒光較強(qiáng),線粒體膜電位上升。模型組紅色熒光和綠色熒光疊加,綠色熒光明顯增強(qiáng);卡托普利藥物組,紅色熒光較強(qiáng);五味子醇甲低、中、高劑量組紅色熒光均強(qiáng)于綠色熒光,五味子醇甲中劑量組最為明顯。紅色熒光與綠色熒光的比值,表示熒光強(qiáng)度的相對值。CA、GM組與模型組對比,均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),相對比值升高,紅色熒光強(qiáng)于綠色熒光,線粒體膜電位升高,細(xì)胞凋亡減少,但其他各組無統(tǒng)計學(xué)意義。圖4 不同處理條件下各組心肌細(xì)胞表面積的變化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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