為確定2014年河北某豬場哺乳仔豬群腹瀉的病原,本研究從該發(fā)病豬場采集了22份臨床樣品,采用PCR方法進(jìn)行腹瀉病原的檢測。結(jié)果顯示其中17份樣品為豬流行性腹瀉病毒（PEDV）陽性,而豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）和豬輪狀病毒（PoRV）均為陰性。選取其中5份PEDV陽性樣品在Vero細(xì)胞中進(jìn)行病毒的分離,結(jié)果顯示,僅一份樣品在接種細(xì)胞24 h后即可觀察到細(xì)胞病變。對病變細(xì)胞進(jìn)行RT-PCR及間接免疫熒光鑒定均為PEDV陽性。將分離的病毒株命名為He B10/2014。將其在Vero細(xì)胞中傳至F5代次后病毒增殖明顯增快,病毒滴度于感染細(xì)胞24 h達(dá)到峰值。對分離株的S基因進(jìn)行克隆和測序分析,結(jié)果顯示該病毒分離株符合國內(nèi)近年來流行病毒株S蛋白的變異特征,即在S蛋白中存在4個連續(xù)氨基酸的插入(⁵⁹QGVN⁶²)和3個氨基酸的缺失(¹⁴0N和¹⁶³NI¹⁶⁴)。本研究結(jié)果表明分離獲得的HeB10/2014株為國內(nèi)近年來新的PEDV流行株。 

【文章來源】：中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2016,38(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 抗體、細(xì)胞及臨床樣品
    1.2 主要試劑
    1.3 樣品檢測
    1.4 病毒的分離
    1.5 病毒特異性鑒定
    1.6 病毒間接免疫熒光(IFA)鑒定
    1.7 病毒增殖曲線的繪制
    1.8 病毒S基因的克隆及測序分析
2 結(jié)果
    2.1 臨床樣品的RT-PCR檢測
    2.2 病毒分離及效價測定
    2.3 He B10/2014分離株的特異性檢測
    2.4 He B10/2014分離株的IFA鑒定
    2.5 He B10/2014 F5代分離株的增殖動態(tài)
    2.6 He B10/2014分離株S基因序列分析
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]應(yīng)用豬胎腸單層細(xì)胞培養(yǎng)豬流行性腹瀉病毒的研究[J]. 宣華,邢德坤,王殿瀛,朱維正,趙鳳玉,鞏懷俊,費思閣.  獸醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 1984(03)



本文編號：3581162