為確定2014年河北某豬場(chǎng)哺乳仔豬群腹瀉的病原,本研究從該發(fā)病豬場(chǎng)采集了22份臨床樣品,采用PCR方法進(jìn)行腹瀉病原的檢測(cè)。結(jié)果顯示其中17份樣品為豬流行性腹瀉病毒（PEDV）陽(yáng)性,而豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）和豬輪狀病毒（PoRV）均為陰性。選取其中5份PEDV陽(yáng)性樣品在Vero細(xì)胞中進(jìn)行病毒的分離,結(jié)果顯示,僅一份樣品在接種細(xì)胞24 h后即可觀察到細(xì)胞病變。對(duì)病變細(xì)胞進(jìn)行RT-PCR及間接免疫熒光鑒定均為PEDV陽(yáng)性。將分離的病毒株命名為He B10/2014。將其在Vero細(xì)胞中傳至F5代次后病毒增殖明顯增快,病毒滴度于感染細(xì)胞24 h達(dá)到峰值。對(duì)分離株的S基因進(jìn)行克隆和測(cè)序分析,結(jié)果顯示該病毒分離株符合國(guó)內(nèi)近年來(lái)流行病毒株S蛋白的變異特征,即在S蛋白中存在4個(gè)連續(xù)氨基酸的插入(⁵⁹QGVN⁶²)和3個(gè)氨基酸的缺失(¹⁴0N和¹⁶³NI¹⁶⁴)。本研究結(jié)果表明分離獲得的HeB10/2014株為國(guó)內(nèi)近年來(lái)新的PEDV流行株。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2016,38(04)北大核心CSCD

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 抗體、細(xì)胞及臨床樣品
    1.2 主要試劑
    1.3 樣品檢測(cè)
    1.4 病毒的分離
    1.5 病毒特異性鑒定
    1.6 病毒間接免疫熒光(IFA)鑒定
    1.7 病毒增殖曲線的繪制
    1.8 病毒S基因的克隆及測(cè)序分析
2 結(jié)果
    2.1 臨床樣品的RT-PCR檢測(cè)
    2.2 病毒分離及效價(jià)測(cè)定
    2.3 He B10/2014分離株的特異性檢測(cè)
    2.4 He B10/2014分離株的IFA鑒定
    2.5 He B10/2014 F5代分離株的增殖動(dòng)態(tài)
    2.6 He B10/2014分離株S基因序列分析
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]應(yīng)用豬胎腸單層細(xì)胞培養(yǎng)豬流行性腹瀉病毒的研究[J]. 宣華,邢德坤,王殿瀛,朱維正,趙鳳玉,鞏懷俊,費(fèi)思閣.  獸醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 1984(03)



本文編號(hào)：3581162