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基于自組裝單分子層的SPR免疫傳感器檢測(cè)沙丁胺醇的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2022-01-09 23:12
  沙丁胺醇(SAL)為瘦肉精的一種,添加微量沙丁胺醇于牲畜飼料內(nèi),可以增加牲畜的瘦肉量、減少脂肪。然而其殘留會(huì)導(dǎo)致人體產(chǎn)生肌肉震顫、頭痛、心悸等不良癥狀,因此在歐盟及中國的動(dòng)物飼料中已被禁用,F(xiàn)有測(cè)定SAL的方法很多,如酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)、氣相色譜-質(zhì)譜法(GC/MS)、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)等。然而這些方法大都需要昂貴的設(shè)備、熟練的技術(shù)人員和長時(shí)間的檢測(cè)分析。因此,開發(fā)簡單方便、快速靈敏、成本低廉、特異性高的分析方法已成為當(dāng)前的迫切需要。表面等離子體共振技術(shù)(SPR)最初主要通過光學(xué)上的折射率變化應(yīng)用于監(jiān)測(cè)大分子間的相互作用,如考察抗原-抗體、受體-配體、適配體-識(shí)別物之間的親和力,隨后廣泛應(yīng)用到小分子檢測(cè)領(lǐng)域,其具有快速、無標(biāo)記、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。其中SPR免疫傳感器應(yīng)用較為常見,其檢測(cè)方法主要為抑制法。定量的抗體與芯片表面的抗原結(jié)合時(shí)在SPR傳感器上產(chǎn)生一個(gè)響應(yīng)值。將這一定量的抗體與待測(cè)物混合,待測(cè)物會(huì)消耗掉一定的抗體。當(dāng)混合物再與芯片表面作用時(shí),通過計(jì)算SPR傳感器降低的響應(yīng)數(shù)值可以測(cè)算待測(cè)物的濃度。S... 

【文章來源】:齊魯工業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

基于自組裝單分子層的SPR免疫傳感器檢測(cè)沙丁胺醇的應(yīng)用


硫醇與AuNPs結(jié)合的示意圖

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第二章自組裝單分子層修飾SPR芯片12圖2.1硫醇與AuNPs結(jié)合的示意圖圖2.2SAMs修飾的金納米粒子注:硫醇修飾AuNPs的TEM和DLS表征(a~c);硫醇修飾AuNPs的UV-Vis-NIR表征(d)

示意圖,硫醇,示意圖,芯片


齊魯工業(yè)工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文132.3.2SAMs修飾的金片表征具有硫醇基團(tuán)(R–SH)的硫醇分子可以通過Au–S鍵牢固地固定在金芯片表面,由于Au-S鍵的作用,含硫醇化合物對(duì)Au具有很強(qiáng)的親和力,在SPR金片極易形成SAMs。裸金片表面的硫醇單分子層是SPR傳感器上應(yīng)用最廣泛的SAMs。具有多種表面特性(如潤濕性,可重復(fù)表面和具有表面電荷)的SAMs可以通過具有不同末端官能團(tuán)的硫醇分子簡單地制得。在本研究中,三種含巰基的化合物MPA、DMSA和DHLA用于SPR裸金片的表面修飾。硫醇與SPR金片的結(jié)合示意圖如圖2.3所示。為了研究這些硫醇修飾對(duì)SPR芯片的影響,用SEM研究了硫醇修飾的SPR芯片的表面形貌。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2.4所示。當(dāng)MPA修飾時(shí),SPR裸芯片顯示出類似于銹蝕的斑點(diǎn)形貌(圖2.4a),DMSA修飾SPR裸芯片(圖2.4b)較“平整”,DHLA修飾的SPR裸芯片最接近于裸芯片的狀態(tài)(圖2.4c),這結(jié)果說明可能在芯片前處理的過程中DMSA和DHLA修飾芯片不容易受到污染。2.3.3SAMs在金片表面的固定量表征選用MPA、DMSA和DHLA三種硫醇分子制備芯片自組裝分子膜。由于硫醇固定在芯片表面后很難測(cè)定,因此我們可以通過評(píng)估SAM構(gòu)建前后溶液中-COOH的紫外吸收值的差異來間接測(cè)量固定在芯片上的硫醇的量(圖2.5)。圖2.5為硫醇分圖2.3硫醇與SPR金片的結(jié)合示意圖圖2.4SEM掃描硫醇修飾的SPR芯片的表面形貌注:a:MPA;b:DMSA;c:DHLA

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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