集約化養(yǎng)殖密度的增加加重了家禽呼吸系統(tǒng)疾病壓力。家禽肺損傷是嚴(yán)重的呼吸系統(tǒng)病癥,通常由環(huán)境變化、應(yīng)激、病原感染等多種因素引起。其發(fā)病機(jī)制受多細(xì)胞器、細(xì)胞因子和信號(hào)通路調(diào)控。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)通路是介導(dǎo)氣道結(jié)構(gòu)細(xì)胞命運(yùn)的重要途徑,區(qū)別于其它兩條調(diào)控細(xì)胞命運(yùn)的線粒體途徑和死亡受體途徑。表觀遺傳學(xué)參與多種生命活動(dòng)（細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、凋亡）,旨在從分子水平解釋臨床癥狀。本研究中,我們利用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）誘導(dǎo)人正常肺上皮細(xì)胞（BEAS-2B）構(gòu)建體外內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic retieulumstress,ERS）模型,分析表觀遺傳修飾酶的表達(dá)變化及其生物學(xué)功能,并探討黃芪多糖（astragalus polysaccharides,APS）對(duì)LPS刺激的促炎性細(xì)胞因子的調(diào)控作用,以期為營(yíng)養(yǎng)表觀遺傳調(diào)控肺部炎癥反應(yīng)奠定理論基礎(chǔ)。試驗(yàn)一LPS誘導(dǎo)BEAS-2B細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型的構(gòu)建本試驗(yàn)首先檢測(cè)LPS刺激BEAS-2B細(xì)胞ERS發(fā)生標(biāo)志性蛋白免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白（immunoglobulin heavy chain binding protein,BIP... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

LPS/TM對(duì)BEAS-2B細(xì)胞ERS標(biāo)志蛋白BIP表達(dá)的影響；數(shù)據(jù)表示為平均值±SE（n=3），柱標(biāo)*代表差異顯著（P<0.05），**代表差異性極顯著（P<0.01），下同

24圖 3-4 PRMT1 在 LPS 誘導(dǎo)的 BEAS-2B 細(xì)胞 ERS 中的表達(dá)情況Fig. 3-4 The expression of PRMT1 in BEAS-2B cell ERS stimulated by LPS.2.4 AMI-1 處理對(duì) BEAS-2B 細(xì)胞 ERS 蛋白的影響AMI-1 抑制劑處理 BEAS-2B 細(xì)胞的結(jié)果顯示：添加 200 ng/mL LPS 聯(lián)合 10 uMMI 處理細(xì)胞 12 h 可抑制 PRMT1（P < 0.05）蛋白水平的表達(dá)圖 3-5（A），但是對(duì)磷化的 PERK（P > 0.05）無(wú)影響圖 3-5（B）。進(jìn)一步我們對(duì) PRMT1 的定位情況進(jìn)行檢測(cè)，與空白對(duì)照組相比，發(fā)現(xiàn) AMI 添加組使胞質(zhì)綠色熒光強(qiáng)度減弱圖 3-5（C）。

圖 3-5 AMI-1 處理對(duì) BEAS-2B 細(xì)胞蛋白水平的影響Fig 3-5 Effect of BEAS-2B cell protein level stimulated by AMI-1.2.5 過(guò)表達(dá) PRMT1 對(duì) BEAS-2B 細(xì)胞 ERS 蛋白的影響由圖 3-6（A，B）可知，在 PRMT1 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，PRMT1 轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水均顯著性升高（P < 0.01），而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 PERK-eIF2α 信號(hào)通路蛋白 p-PERK（及其游 eIF2α 蛋白（P < 0.05）表達(dá)減少圖 3-6（C，D）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3571726