集約化養(yǎng)殖密度的增加加重了家禽呼吸系統(tǒng)疾病壓力。家禽肺損傷是嚴重的呼吸系統(tǒng)病癥,通常由環(huán)境變化、應激、病原感染等多種因素引起。其發(fā)病機制受多細胞器、細胞因子和信號通路調控。內質網(wǎng)應激信號通路是介導氣道結構細胞命運的重要途徑,區(qū)別于其它兩條調控細胞命運的線粒體途徑和死亡受體途徑。表觀遺傳學參與多種生命活動（細胞生長、分化、凋亡）,旨在從分子水平解釋臨床癥狀。本研究中,我們利用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）誘導人正常肺上皮細胞（BEAS-2B）構建體外內質網(wǎng)應激（endoplasmic retieulumstress,ERS）模型,分析表觀遺傳修飾酶的表達變化及其生物學功能,并探討黃芪多糖（astragalus polysaccharides,APS）對LPS刺激的促炎性細胞因子的調控作用,以期為營養(yǎng)表觀遺傳調控肺部炎癥反應奠定理論基礎。試驗一LPS誘導BEAS-2B細胞內質網(wǎng)應激模型的構建本試驗首先檢測LPS刺激BEAS-2B細胞ERS發(fā)生標志性蛋白免疫球蛋白重鏈結合蛋白（immunoglobulin heavy chain binding protein,BIP... 

【文章來源】：西北農林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

LPS/TM對BEAS-2B細胞ERS標志蛋白BIP表達的影響；數(shù)據(jù)表示為平均值±SE（n=3），柱標*代表差異顯著（P<0.05），**代表差異性極顯著（P<0.01），下同

24圖 3-4 PRMT1 在 LPS 誘導的 BEAS-2B 細胞 ERS 中的表達情況Fig. 3-4 The expression of PRMT1 in BEAS-2B cell ERS stimulated by LPS.2.4 AMI-1 處理對 BEAS-2B 細胞 ERS 蛋白的影響AMI-1 抑制劑處理 BEAS-2B 細胞的結果顯示：添加 200 ng/mL LPS 聯(lián)合 10 uMMI 處理細胞 12 h 可抑制 PRMT1（P < 0.05）蛋白水平的表達圖 3-5（A），但是對磷化的 PERK（P > 0.05）無影響圖 3-5（B）。進一步我們對 PRMT1 的定位情況進行檢測，與空白對照組相比，發(fā)現(xiàn) AMI 添加組使胞質綠色熒光強度減弱圖 3-5（C）。

圖 3-5 AMI-1 處理對 BEAS-2B 細胞蛋白水平的影響Fig 3-5 Effect of BEAS-2B cell protein level stimulated by AMI-1.2.5 過表達 PRMT1 對 BEAS-2B 細胞 ERS 蛋白的影響由圖 3-6（A，B）可知，在 PRMT1 質粒轉染細胞后，PRMT1 轉錄水平和蛋白水均顯著性升高（P < 0.01），而內質網(wǎng)應激 PERK-eIF2α 信號通路蛋白 p-PERK（及其游 eIF2α 蛋白（P < 0.05）表達減少圖 3-6（C，D）。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3571726