在動(dòng)物生產(chǎn)及動(dòng)物疾病防治中,經(jīng)常發(fā)生不規(guī)范、超量使用抗生素的情況,誘使很多病原菌產(chǎn)生耐藥性�！俺�(jí)細(xì)菌”（多重耐藥性的病原菌）的產(chǎn)生使細(xì)菌耐藥問(wèn)題變得更加復(fù)雜和嚴(yán)峻。細(xì)菌耐藥性問(wèn)題有愈演愈烈的趨勢(shì),已經(jīng)嚴(yán)重威脅到公共衛(wèi)生安全及人用抗生素資源。噬菌體裂解酶能高效、快速、特異地裂解耐藥性病原菌,并且細(xì)菌對(duì)裂解酶不易產(chǎn)生耐受性。肽聚糖是細(xì)胞壁的骨架,裂解酶能催化肽聚糖,導(dǎo)致骨架斷裂,細(xì)菌裂解。革蘭氏陽(yáng)性（G+）菌的肽聚糖在細(xì)胞壁的外層,裂解酶直接與之發(fā)生作用從而裂解細(xì)菌,因此針對(duì)G+菌噬菌體裂解酶制劑便于制備。但是,革蘭氏陰性（G-）菌細(xì)胞壁外層是緊密的外膜蛋白,外膜蛋白僅允許小分子量的物質(zhì)透過(guò)。陰性菌的肽聚糖在周質(zhì)空間,因而裂解酶不能從菌外透過(guò)外膜接觸肽聚糖裂解G-菌,阻礙了針對(duì)革蘭氏陰性菌的裂解酶制劑的研發(fā)。本研究針對(duì)這一問(wèn)題進(jìn)行了研究,探索裂解酶透過(guò)G-菌外膜的方法,構(gòu)建基因工程裂解酶從菌外殺滅大腸桿菌。對(duì)自然界中能透過(guò)G-菌外膜的大分子蛋白Colicin A、Lys AB2、SPN9CC、Lys PA26、D8進(jìn)行生物信息學(xué)分析。將這5種已知蛋白的序列進(jìn)行同源性分析、比對(duì),發(fā)現(xiàn)它們的... 

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【部分圖文】：

噬菌體裂解細(xì)菌的機(jī)制流程圖（以T4噬菌體為例）

有現(xiàn)成的蛋白、肽類藥物研發(fā)經(jīng)驗(yàn)。因此噬菌體，因其優(yōu)點(diǎn)突出而發(fā)展迅速。G－菌的外膜阻礙裂解裂解酶發(fā)展較慢，陽(yáng)性菌的裂解酶研究較多。解酶的結(jié)構(gòu)與殺菌機(jī)理解酶制劑是當(dāng)前新興的研究方向，開(kāi)始于 20 世紀(jì)菌體感染細(xì)菌后期，噬菌體的一段 DNA 借助宿主這種酶大小通常為 25 kD~40 kD，它可以催化細(xì)胞壁、斷裂，進(jìn)而破壞細(xì)胞壁的骨架，并將其定義為 e多，其殺滅細(xì)菌的機(jī)制與其結(jié)構(gòu)有關(guān)[68]。下，G+菌噬菌體裂解酶有相似的結(jié)構(gòu)。它是由ain， CD)、C 端結(jié)合區(qū)( Cell wall binding domain過(guò)中間一段小肽連接在一起（如圖 1.2）。

革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)阻礙了裂解酶從菌外裂解細(xì)菌革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁與陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁不同（如圖 3.1），最外層是由糖、磷脂、蛋白質(zhì)和脂蛋白等復(fù)合物組成的外膜（outer membrane，OM）M 是一種脂質(zhì)雙分子層，其內(nèi)膜小葉由磷脂組成，外膜小葉主要由脂多糖(LP一些磷脂組成。外膜蛋白（outer membrance protein, OMP）是鑲嵌的其中白質(zhì)的統(tǒng)稱，包括脂蛋白、微孔蛋白（porin），通過(guò)微孔蛋白細(xì)菌可以與物質(zhì)進(jìn)行交互，但只有小分子化合物（分子量小于 600）才能通過(guò)孔蛋白[113胞壁的最內(nèi)層是細(xì)胞質(zhì)膜。在外膜與細(xì)胞質(zhì)膜之間是周質(zhì)空間（periplasmpace），其中有 2-3 nm 厚的肽聚糖（Peptidoglycan，PG）。革蘭氏陰性細(xì)菌聚糖化學(xué)結(jié)構(gòu)相對(duì)保守。因此，G－菌的噬菌體裂解酶對(duì)任何 G－菌株的肽都具有酶活性[114]。這與 G+菌的 PG 結(jié)構(gòu)的多樣性形成了鮮明對(duì)比。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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