隱孢子蟲（Cryptosporidium）是一種廣泛寄生于多種宿主消化道、呼吸道上皮細胞的胞內(nèi)原蟲，由其引起的隱孢子蟲病（cryptosporidiosis）是一種人獸共患病。自Tyzzer于1907年首先在鼠體內(nèi)發(fā)現(xiàn)隱孢子蟲以來，已在人、禽類、哺乳動物、魚類和爬行類等240余種動物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了24個有效種和70多個基因型。目前，尚無有效的疫苗或藥物治療隱孢子蟲病，該病嚴重威脅人的健康和動物的生長發(fā)育，造成巨大的經(jīng)濟損失。了解隱孢子蟲的致病機制、宿主的免疫防御機制對該病的治療和預(yù)防可提供十分重要的參考。本研究以貝氏隱孢子蟲（C. baileyi）為研究對象，以雛雞為模型，檢測貝氏隱孢子蟲（C. baileyi）感染雛雞的氣管、脾臟中IL-17及其相關(guān)細胞因子（IL-1β、IL-6、TGF-β和STAT3）在不同時間點變化情況，以此來推測Th17細胞、IL-17及其相關(guān)細胞因子在C. baileyi感染和清除中的作用。1.為獲取純凈的貝氏隱孢子蟲卵囊，建立感染雛雞的模型，本試驗根據(jù)不同蟲種的寄生特點，采用從混合卵囊感染雛雞法氏囊和喉頭氣管中分離并純化卵囊。結(jié)果在感染雞只的法氏囊、喉頭氣管等... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

貝氏隱孢子蟲卵囊的形態(tài)（400×）

3.2.3 測序結(jié)果及種系發(fā)育分析將兩份含目的條帶的 PCR 擴增產(chǎn)物送往上海生工后，成功獲得兩個樣品 SSU rRN基因序列，經(jīng)過 Clustal 比對后二者序列相同。選取其中一個樣品的序列進一步通過在NCBI 上使用 BLAST 檢索比對后，發(fā)現(xiàn)該序列與 NCBI 上已發(fā)表的貝氏隱孢子蟲（Cbaileyi）SSU rRNA 基因序列相似度達 99%，因此，證實所分離的隱孢子蟲為貝氏隱子蟲。由圖 3-3 可以看出所分離的貝氏隱孢子蟲株（Fecal sample）與其它已公布的貝隱孢子蟲位于同一進化分枝上，從而更能證實該隱孢子蟲為貝氏隱孢子蟲（C. baileyM. DNA 標準 DL 2000；1. 糞便樣品；2. 組織樣品；C. 陰性對照M. DNA Marker DL 2000; 1. Fecal samples; 2. Tissue samples; C. Negative control圖 3-2 C. baileyi SSU rRNA 基因 PCR 擴增結(jié)果Fig. 3-2 PCR amplication of C. baileyi SSU rRNA gene

4.3 討論隱孢子蟲是胞內(nèi)寄生性原蟲，主要寄生于上皮細胞刷狀緣表面，位于由蟲體兩側(cè)微絨毛包圍融合形成的帶蟲空泡內(nèi)，不與宿主細胞漿接觸（Fayer 2004）。隱孢子蟲卵囊對外界環(huán)境抵抗力強，孢子化的卵囊脫離宿主后能夠在外界環(huán)境存活較長的時間，Jenkins等（2003）的研究表明，C. parvum 卵囊貯存在 19 ℃滅菌水中 7 個月仍有活性。而有人對 C. baileyi 的活性研究表明，保存于 4 ℃ 2.5%重鉻酸鉀溶液中的卵囊 18 個月仍可引起雛雞明顯感染（黃磊等 2012）。然而，隨著保存時間的延長，隱孢子蟲卵囊的活性也會降低，需定期對卵囊進行復(fù)蘇。目前，常采用接種易感宿主對卵囊進行復(fù)壯。當前，對于貝氏隱孢子蟲的體內(nèi)外培養(yǎng)做了不少工作，Lindsey 等（1988）建立了C. baileyi 雞胚體外培養(yǎng)模型，并探究了 C. baileyi 感染禽和哺乳動物細胞情況。Wunderlin等（Wunderlin et al. 1997）利用 C. baileyi 接種雞胚并與感染雞做了對比，比較發(fā)現(xiàn)兩個感染雞胚收獲得卵囊與一只感染的雞擴增的卵囊相當。Zhang 等（2012）利用雞胚氣管圖 4-1 兩組雛雞接種 1×105貝氏隱孢子蟲卵囊后排卵囊規(guī)律Fig. 4-1 The patterns of oocyst shedding in two chicken groups after inoculation with 1×105C. baileyi

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]關(guān)中地區(qū)牛球蟲種類和安氏隱孢子蟲基因分型研究[D]. 高曼.西北農(nóng)林科技大學 2012
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