弓形蟲MIC10基因在速殖子時期與緩殖子時期都存在不同程度的表達(dá),但國內(nèi)對該基因的研究甚少。為了解弓形蟲MIC10基因的功能,構(gòu)建其原核表達(dá)載體,并進(jìn)行原核表達(dá)。本試驗以提取的弓形蟲DNA為模板,設(shè)計引物擴(kuò)增MIC10基因片段,連接克隆載體pMD-18T和表達(dá)載體PGEX-4T-1,PCR和雙酶切鑒定后進(jìn)行原核表達(dá)。結(jié)果表明,經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得597 bp的MIC10基因片段,構(gòu)建pMD18-T-MIC10克隆質(zhì)粒和PGEX-4T-MIC10原核表達(dá)載體,經(jīng)PCR鑒定和雙酶切鑒定正確,并在大腸桿菌中成功表達(dá),表達(dá)蛋白的分子量約為49 kD。本試驗為弓形蟲MIC10基因功能的后續(xù)研究奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來源】：畜牧與獸醫(yī). 2020,52(08)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

MIC10基因片段PCR擴(kuò)增結(jié)果

pMD18-T-MIC10 PCR鑒定

pMD18-T-MIC10雙酶切鑒定

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人畜共患弓形蟲病的防治[J]. 夏奎波.  獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2018(21)
[2]弓形蟲病流行概況及發(fā)病機理研究進(jìn)展[J]. 余洪濤,王建舉.  上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2018(05)
[3]重組剛地弓形蟲微線料體蛋白MIC10的制備與特性分析[J]. 周偉,宋麗君,沈雙,殷旭仁,許永良,劉茜,余傳信.  中國病原生物學(xué)雜志. 2018(09)
[4]弓形蟲MORN2基因敲除株的構(gòu)建及其表型鑒定[J]. 陳凱,王金磊,白夢捷,楊文彬,黃思揚.  中國畜牧獸醫(yī). 2018(09)
[5]剛地弓形蟲絲裂原活化蛋白激酶1基因克隆、表達(dá)及抗原性分析[J]. 徐鵬,曹利利,王澤東,趙權(quán).  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2016(02)

碩士論文
[1]雙抗體夾心ELISA法檢測弓形蟲循環(huán)抗原的方法建立[D]. 王海礁.吉林大學(xué) 2011



本文編號：3562691