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灰倉(cāng)鼠體內(nèi)鞭毛蟲分離鑒定及驅(qū)蟲藥篩選與效果評(píng)價(jià)研究

發(fā)布時(shí)間:2022-01-01 17:08
  目的:野生灰倉(cāng)鼠是一種生活在中亞地區(qū)的野生嚙齒類動(dòng)物。屬于嚙齒目,倉(cāng)鼠科,倉(cāng)鼠亞科,倉(cāng)鼠屬。其棲息生境主要分布在荒漠平原、高山草甸。大量研究表明灰倉(cāng)鼠在鼠疫菌分離,包蟲病動(dòng)物模型等方面明顯優(yōu)于現(xiàn)有其它實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,具有良好的應(yīng)用前景。新疆實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心已對(duì)灰倉(cāng)鼠進(jìn)行多年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究。本研究擬對(duì)從新疆實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心飼養(yǎng)的封閉群灰倉(cāng)鼠體內(nèi)分離到的1株鞭毛蟲進(jìn)行形態(tài)學(xué)及基因鑒定;建立該鞭毛蟲感染動(dòng)物模型;篩選驅(qū)蟲藥物并對(duì)其驅(qū)蟲效果進(jìn)行研究。方法:建立該鞭毛蟲的體外培養(yǎng)體系,將分離到的鞭毛蟲蟲體沉淀轉(zhuǎn)到細(xì)胞皿中,加入除菌RPMI1640培養(yǎng)基,置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng);間隔2d轉(zhuǎn)種1次,每次轉(zhuǎn)種500μl,直至鞭毛蟲穩(wěn)定生長(zhǎng);對(duì)體外培養(yǎng)的鞭毛蟲直接涂片和常規(guī)姬姆薩染色后置于光學(xué)顯微鏡鏡檢,以戊二醛固定蟲體后置于透射電鏡觀察形態(tài)學(xué)特點(diǎn);提取蟲體總DNA,PCR擴(kuò)增該鞭毛蟲的16S rRNA基因,測(cè)序后與國(guó)外已報(bào)道的鞭毛蟲進(jìn)行核酸同源性分析,并應(yīng)用MEGA5.22軟件繪制系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹;使用分離培養(yǎng)的蟲體感染BALB/c小鼠建立感染動(dòng)物模型;以此動(dòng)物模型為材料研究甲硝唑、替硝唑、阿苯達(dá)唑口服乳劑、... 

【文章來源】:新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】:44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

灰倉(cāng)鼠體內(nèi)鞭毛蟲分離鑒定及驅(qū)蟲藥篩選與效果評(píng)價(jià)研究


灰倉(cāng)鼠回盲部檢出的鞭毛蟲直接涂片(×100)

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圖 2-1 灰倉(cāng)鼠回盲部檢出的鞭毛蟲直接涂片(×100)鞭毛蟲轉(zhuǎn)入 RPMI 1640 培養(yǎng)基 80%、10%胎牛血清、10%104U比例混合配制的培養(yǎng)基,置于 37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),期間轉(zhuǎn) 蟲體密度達(dá)到峰值,之后密度下降,6 d 后得到穩(wěn)定生長(zhǎng)的鞭集蟲體后,吸取 100 μl 懸液,滴在載玻片上,置于光學(xué)顯微見大量水滴形、梨形以轉(zhuǎn)圈方式游動(dòng)的蟲體,蟲體游動(dòng)活潑。觀察,可見由前向后呈波浪狀運(yùn)動(dòng)的波動(dòng)膜(圖 2-2)。

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圖 2-3 灰倉(cāng)鼠回盲部分離培養(yǎng)的鞭毛蟲蟲體(瑞氏-姬姆薩染色×1000)體培養(yǎng)液經(jīng) 2.5%戊二醛固定后,置于透射電子顯微鏡下觀察(圖均為 18 μm,寬度平均為 10 μm。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3562467

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