為研究表達豬瘟病毒E2蛋白的重組PRRSV疫苗株rPRRSV-E2能否在豬群中水平傳播,本研究將15頭PRRSV抗原抗體均為陰性,PRV、CSFV和PCV2抗原陰性的35日齡健康仔豬,隨機分成3組,每組5頭。A組接種rPRRSV-E2第5代細胞毒,劑量為10^5.0TCID₅₀/頭;B組為同居感染對照組,接種DMEM;Mock組接種DMEM,單獨飼養(yǎng)。豬體免疫后第7 d采集血清、鼻拭子和肛拭子樣品,進行病毒載量和PRRSV、CSFV的抗原抗體含量測定,共持續(xù)監(jiān)測3個月;所有豬只在試驗期間每天觀察臨床癥狀。結(jié)果顯示:未接種疫苗的同居對照組豬只各時間點血清中均未檢測到PRRSV,也未檢測到針對PRRSV和CSFV的抗體。研究結(jié)果表明,rPRRSV-E2不能在豬群中水平傳播。 

【文章來源】：中國動物傳染病學報. 2020,28(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

rPRRSV-E2免疫后血清抗體水平變化情況分析

對所有試驗組的豬只鼻拭子和肛拭子樣品利用本試驗室建立的方法進行熒光定量PCR檢測。rPRRSV-E2免疫組及其同居感染觀察組中拭子樣品和空白對照組相比,病毒拷貝數(shù)均較低,無顯著差異(圖4)。對其中病毒拷貝數(shù)略高于陰性對照的樣品進行病毒分離,在MARc-145細胞上進行傳代,觀察細胞病變及IFA熒光結(jié)果,結(jié)果顯示,免疫組豬只從免疫開始至試驗結(jié)束,均未從拭子中分離到PRRSV。2.5 病理學檢查結(jié)果

表1 熒光定量RT-PCR使用引物序列Table 1 Oligonucleotides used for RT-qPCR 名稱aNamea 序列Sequence 位置bPositionb 應用Application PNPF 5＇-CCCTAGTGAGCGGCAATTGT-3＇ 15 002-15 021 qRT-PCR primer (PRRSV) PNPR 5＇-TCCAGCGCCCTGATTGAA-3＇ 15 045-15 062 qRT-PCR primer (PRRSV) NP-probe FAM-TCTGTCGTCGATCCAGA-MGB 15 023-15 039 qRT-PCR probe (PRRSV)說明:a=引物名稱的縮寫;F=上游引物,R=下游引物;b=引物在親本病毒HuN4 (EF635006) 基因組中的位置Notes:a=Abbreviations in primer names;F=forward PCR primer;R=reverse PCR primer;b=Numbers in the primer names denotes the nucleotide positions in the parental Hu N4 (EF635006)圖2 rPRRSV-E2免疫后豬只血清中病毒含量檢測結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
[1]鴨肝炎病毒A66弱毒株的水平傳播感染[J]. 張小飛,黃顯明,尹秀鳳,陸承平.  江蘇農(nóng)業(yè)學報. 2011(04)
[2]豬繁殖與呼吸綜合征病毒Taq Man-MGB熒光定量RT-PCR方法的建立和應用[J]. 韋天超,田志軍,安同慶,周艷君,肖燕,姜一峰,郝曉芳,張善瑞,彭金美,仇華吉,童光志.  中國預防獸醫(yī)學報. 2008(12)
[3]甲型肝炎減毒活疫苗病毒的水平傳播[J]. 黃小琴,曹逸云,譚順革,白惠珠,邵聰文,龍潤?quán)l(xiāng),周德久,董德祥.  中華醫(yī)學雜志. 2001(08)



本文編號：3560061