試驗(yàn)旨在探究在山羊精液冷凍保存過程中單獨(dú)使用大豆卵磷脂（SL）、卵黃（EY）及其聯(lián)合使用的效果。以20%EY（V/V）和2%SL（m/V）為對(duì)照,在山羊凍精基礎(chǔ)稀釋液中分別添加10%EY+2%SL、20%EY+1%SL、20%EY+2%SL,冷凍解凍后分別對(duì)精子活率、精子活力、質(zhì)膜完整率、頂體完整率和線粒體活性進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)利用試劑盒檢測(cè)活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量變化。結(jié)果表明:當(dāng)冷凍稀釋液中聯(lián)合添加10%EY+2%SL,解凍后該組的精子活力、精子活率、質(zhì)膜完整率、頂體完整率和線粒體活性與20%EY和2%SL對(duì)照組無顯著性差異,較20%EY+1%SL和20%EY+2%SL聯(lián)合添加組顯著提高;與20%EY和2%SL組相比,聯(lián)合添加10%EY+2%SL組精子解凍后ROS和MDA含量和SOD活性無顯著性差異,但精子抗氧化能力較另外2個(gè)聯(lián)合添加組顯著提高。綜上,山羊精液冷凍基礎(chǔ)稀釋液中添加SL可替代或者部分替代EY,EY和SL的聯(lián)合添加對(duì)山羊凍精無協(xié)同作用,20%EY聯(lián)合添加不同濃度的SL則會(huì)加大對(duì)冷凍精子的氧化損傷。 

【文章來源】：中國畜牧雜志. 2020,56(09)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

EY和SL及其聯(lián)合添加對(duì)精子線粒體活性的影響

EY作為家畜精液冷凍保護(hù)劑，易在精液冷凍和后續(xù)體外受精過程中帶來微生物污染，且山羊精漿中的卵黃凝固酶可將EY中的卵磷脂水解為脂肪酸和溶血卵磷脂，而后者對(duì)山羊精子的活力和頂體產(chǎn)生損害作用[12]。本研究首次在冷凍稀釋液中添加SL以替換或降低EY使用濃度，結(jié)果表明冷凍稀釋液中使用2%的SL可完全替代EY，取得了與20%EY組相近的冷凍解凍效果。SL主要包括磷酯類和非磷脂類物質(zhì)，磷酯類物質(zhì)大部分為LDL。研究證實(shí)，降溫會(huì)造成精子質(zhì)膜上的磷脂發(fā)生從液晶態(tài)到凝膠態(tài)的相位轉(zhuǎn)變，降低精子膜的流動(dòng)性，導(dǎo)致膜剛性增強(qiáng)，易受冰晶物理傷害，SL中的LDL能為受損的精子膜提供外源性磷脂，從而降低精子膜相位轉(zhuǎn)變溫度，以便于冷凍過程中精子脫水，提高精子質(zhì)膜和頂體對(duì)冷凍傷害的耐受性，同時(shí)也可作為外源性磷脂來替代修補(bǔ)超低溫?fù)p傷的精子膜磷脂，從而維持質(zhì)膜的結(jié)構(gòu)和功能，防止精子冷休克[13-15]。另一方面，LDL可在細(xì)胞周圍形成保護(hù)層，以防止快速降溫細(xì)胞冰晶的形成，保護(hù)精子膜在冷凍-解凍過程中免受機(jī)械損傷[16]。本研究也證實(shí)了SL在山羊精液冷凍中具有與EY相似的冷凍保護(hù)效果。精液冷凍過程中，10%EY+2%SL組獲得了最高冷凍效率，可能與SL的添加降低EY使用濃度，減少卵黃凝固酶（EYCE）對(duì)精子的毒害作用有關(guān)。EYCE可誘導(dǎo)稀釋液中卵黃凝結(jié)，催化卵黃脂類物質(zhì)中脂肪酸的釋放，造成精液pH下降，從而導(dǎo)致孵育后精子死亡。結(jié)果表明，與單獨(dú)添加EY或SL相比較，10%EY+2%SL組解凍后精子質(zhì)膜和頂體完整性提高的主要原因可能是EY和SL的聯(lián)合添加可能會(huì)彌補(bǔ)卵磷脂單一來源的局限性，改善冷凍效果。然而，這兩種冷凍保護(hù)劑之間的相互作用尚不清楚。有研究表明，稀釋液中的EY會(huì)加速精子發(fā)生獲能反應(yīng)，降低精子存活時(shí)間，因此在冷凍過程中，降低稀釋液中的EY濃度，同時(shí)利用SL補(bǔ)充添加冷凍所需的必須成分，可更好地保護(hù)精子的頂體[17]。本實(shí)驗(yàn)中10%EY+2%SL聯(lián)合添加組亦獲得了最佳的精子活力、精子活率、質(zhì)膜完整性和頂體完整性。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]牛精液冷凍稀釋液新配方研究[D]. 蔡虹.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3559274