自1997年以來，在我國多數(shù)地區(qū)的鵝群中相繼爆發(fā)和流行鵝副黏病毒病，經(jīng)鑒定病原為血清Ⅰ型副黏病毒，即新城疫病毒，該病定名為鵝副黏病毒病，又可稱為鵝新城疫。各種年齡的鵝對該病均易感，鵝群發(fā)病率平均為27.67%，死亡率個別可高達(dá)100%，平均死亡率為18.19%，且年齡越小其發(fā)病率和死亡率越高，給我國的養(yǎng)鵝業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前，鵝副黏病毒病防治主要以疫苗免疫為主，盡管目前有多種強(qiáng)毒疫苗和滅活疫苗用于免疫預(yù)防，但是仍然不能控制鵝副黏病毒病的發(fā)生。目前研究結(jié)果均表明，利用新城疫病毒強(qiáng)毒苗或滅活苗甚至是傳統(tǒng)的LaSota弱毒疫苗來免疫預(yù)防鵝副黏病毒病均不能起到完全的免疫保護(hù)作用。因此，對于鵝副黏病毒病我們須尋求一種新的預(yù)防思路和技術(shù)手段。隨著分子生物學(xué)及其技術(shù)方法的不斷發(fā)展，基因阻斷技術(shù)也得到了極大的發(fā)展，在哺乳動物或其他動物細(xì)胞中通過siRNA誘導(dǎo)RNAi效應(yīng)來實(shí)現(xiàn)特定基因的有效抑制，該方法已經(jīng)成為研究基因功能的重要工具。慢病毒載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)是近年來發(fā)展起來的技術(shù)，其突出的特點(diǎn)是具有較高的轉(zhuǎn)染效率、能感染靜止期細(xì)胞和較高的目的基因表達(dá)效率。本研究利用具有基因組整合特性和高侵染能力的... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

鵝源新城疫病毒NA-1株NP（A）、M（B）基因二級結(jié)構(gòu)

重組慢病毒載體測序結(jié)果

6rol628103768圖 1.4: 重組慢病毒載體測序結(jié)果圖 1.3: 慢病毒重組干擾質(zhì)粒陽性克隆 PCR 鑒定結(jié)果CR identification of pLKD-shNP or pLKD-shM recombinaker DL2000；0：pLKD-GFP; 1: pLKD-shNP268; 2: pLKD-shNP710; 4：pLKD-shM168; 5: pLKD-shM646; 6: pLKD-shcontrol (the negative control).

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Sleeping Beauty（SB）轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因（EGFP）體內(nèi)轉(zhuǎn)染雞胚胎[J]. 薛松磊,張立,謝雨琇,李慶平,馮曉軍,沈丹,宋成義,高波.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2013(02)
[2]制作石蠟切片驗(yàn)證雞胚盤顯微注射外源DNA的效果[J]. 蔣斌,孫研研,連玲,鄭江霞,楊寧.  中國家禽. 2013(01)
[3]新城疫病毒純化方法的比較研究[J]. 余祖華,丁軻,朱巧艷.  河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(09)
[4]胚盤下腔注射法將外源質(zhì)粒pEGFP-N1導(dǎo)入雞胚的研究[J]. 孫研研,蔣斌,鄭江霞,徐桂云,曲魯江,楊寧.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2010(04)
[5]RNAi靶向NP、L基因抑制鵝源副黏病毒在雞胚成纖維細(xì)胞中的復(fù)制[J]. 劉美,母連志,孟軻音,丁壯,叢彥龍,尹仁福,李志杰.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2009(06)
[6]慢病毒載體介導(dǎo)外源基因在不同細(xì)胞及雞體不同組織中的表達(dá)[J]. 徐世永,丁紅梅,孫巖,王蒙,蔡亞飛,劉紅林.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2008(03)
[7]短發(fā)夾結(jié)構(gòu)RNA對口蹄疫病毒2B基因瞬時表達(dá)的抑制[J]. 崔麗瑾,王興龍,任林柱,伍曉慧,郎需龍,張輝,梅英武,李曉燕,卜朝陽.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2008(05)
[8]針對leader序列的siRNA能夠有效抑制SARS冠狀病毒多個mRNA的表達(dá)（英文）[J]. 葉健,劉利新,薛遠(yuǎn),曲靜,高光俠,方榮祥.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2007(10)



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