牛早期胚胎Zscan4-like基因的表達研究
發(fā)布時間：2021-12-23 23:18
體細胞核移植技術(shù)（又稱體細胞克隆技術(shù)）是動物轉(zhuǎn)基因育種重要的技術(shù)環(huán)節(jié)；雖然體細胞核移植技術(shù)已成功應(yīng)用于多種動物，但其效率至今非常低；供體細胞核不完全重編程是克隆胚胎發(fā)育異常的主要原因；受精后第一波轉(zhuǎn)錄的激活叫做合子基因組激活，標(biāo)志著胚胎發(fā)育由母型調(diào)控向合子型調(diào)控轉(zhuǎn)換，對于克隆胚胎同樣也要歷經(jīng)此過程；體細胞通過體細胞核移植技術(shù)被重編程到多能狀態(tài)，這是體細胞核被暴露在眾多未知的重編程因子中的結(jié)果，不僅成熟卵母細胞中含有許多重編程因子，而且合子基因組激活后胚胎型因子也發(fā)揮著重要的重編程作用。Zscan4基因是小鼠基因組激活時特異性的標(biāo)記基因之一，是小鼠早期胚胎發(fā)育所必須的；在小鼠ES和iPS細胞中，有一種細胞亞群瞬時高水平地表達與2-細胞期胚胎轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物相似的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，這類細胞亞群被稱為2C-like ES細胞，Zscan4基因也是這類2C-like ES細胞的標(biāo)志性基因之一；Zscan4基因不僅能夠維持小鼠ES細胞基因組的穩(wěn)定性和維持其多能性，而且Zscan4基因是小鼠iPS細胞形成過程中重要的重編程增強因子。根據(jù)美國國家生物技術(shù)信息中心（NCBI），Zscan4基因在牛上有2個同源基因，分...
【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：67 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
Zscan4同源基因的PCR檢測AB
圖 2-1 Zscan4 同源基因的 PCR 檢測Figure 2-1 Expression of Zscan4 homologous genes by PCR圖 A：Zscan4 同源基因的表達，圖 B：GAPDH 基因的表達；M1 和 M2：100 plusⅡDNALadde（r100bp，200bp，300bp，400bp，500bp，600bp，700bp，800bp，900bp，1000bp，1200bp，1500bp），1~12：心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胰腺、卵巢、睪丸、子宮、肌肉、8-細胞期 IVF 胚胎和水。Figure A: Zscan4 homologous gene expression, figure B: GAPDH gene expression; M1 and M2: 100 plusⅡ DNA Ladder(100bp，200bp，300bp，400bp，500bp，600bp，700bp，800bp，900bp，1000bp，1200bp，1500bp), 1 ~ 12: heart, liver, spleen, lung, kidney, pancreas, ovary, testis, uterus, muscle, 8-cell stage ofIVF embryos and water.A B
細胞期胚胎和 4-細胞期胚胎中的表達量平均值下調(diào)，但差異不顯著；到 8-細胞期胚胎表達大量上調(diào)，在 9 至 16 期-細胞期胚胎表達量達到最大值，隨后的桑椹胚表達量迅速下調(diào)，在囊胚表達量進一步下調(diào)。Zscan4-like 在 SCNT 早期胚胎中的相對定量 PCR 檢測結(jié)果（如圖 3-5）：Zscan4-like基因在成熟的卵母細胞中表達相對 8 細胞期胚胎較少，1-細胞期胚胎的表達量開始上調(diào)，但與卵母細胞相比差異不顯著；與 1-細胞期胚胎相比，2-細胞期胚胎的表達量下調(diào)，隨后 4-細胞期胚胎的表達量稍微上調(diào)，但差異不顯著；；到 8-細胞期胚胎開始表達大量上調(diào)，在 9 至 16 期-細胞期胚胎的表達量達到最大值，隨后的桑椹胚的表達量迅速下調(diào)，在囊胚表達量進一步下調(diào)。IVF 與 SCNT 各期中 Zscan4-like 表達比較結(jié)果（如圖 3-6）：IVF 與 SCNT 的 1-細胞期胚胎、2-細胞期胚胎、4-細胞期胚胎、8-細胞期胚胎和 9 至 16-細胞期胚胎中 Zscan4-like表達兩兩之間差異不顯著；IVF 桑葚胚中 Zscan4-like 表達比 SCNT 桑葚胚中的表達量要高，差異顯著；IVF 囊胚中 Zscan4-like 表達比 SCNT 桑葚胚中的表達量要低，差異顯著。M1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 M2 1 2 3 4 5 6 7 8 9
本文編號：3549376
【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
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Zscan4同源基因的PCR檢測AB
圖 2-1 Zscan4 同源基因的 PCR 檢測Figure 2-1 Expression of Zscan4 homologous genes by PCR圖 A：Zscan4 同源基因的表達，圖 B：GAPDH 基因的表達；M1 和 M2：100 plusⅡDNALadde（r100bp，200bp，300bp，400bp，500bp，600bp，700bp，800bp，900bp，1000bp，1200bp，1500bp），1~12：心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胰腺、卵巢、睪丸、子宮、肌肉、8-細胞期 IVF 胚胎和水。Figure A: Zscan4 homologous gene expression, figure B: GAPDH gene expression; M1 and M2: 100 plusⅡ DNA Ladder(100bp，200bp，300bp，400bp，500bp，600bp，700bp，800bp，900bp，1000bp，1200bp，1500bp), 1 ~ 12: heart, liver, spleen, lung, kidney, pancreas, ovary, testis, uterus, muscle, 8-cell stage ofIVF embryos and water.A B
細胞期胚胎和 4-細胞期胚胎中的表達量平均值下調(diào)，但差異不顯著；到 8-細胞期胚胎表達大量上調(diào)，在 9 至 16 期-細胞期胚胎表達量達到最大值，隨后的桑椹胚表達量迅速下調(diào)，在囊胚表達量進一步下調(diào)。Zscan4-like 在 SCNT 早期胚胎中的相對定量 PCR 檢測結(jié)果（如圖 3-5）：Zscan4-like基因在成熟的卵母細胞中表達相對 8 細胞期胚胎較少，1-細胞期胚胎的表達量開始上調(diào)，但與卵母細胞相比差異不顯著；與 1-細胞期胚胎相比，2-細胞期胚胎的表達量下調(diào)，隨后 4-細胞期胚胎的表達量稍微上調(diào)，但差異不顯著；；到 8-細胞期胚胎開始表達大量上調(diào)，在 9 至 16 期-細胞期胚胎的表達量達到最大值，隨后的桑椹胚的表達量迅速下調(diào)，在囊胚表達量進一步下調(diào)。IVF 與 SCNT 各期中 Zscan4-like 表達比較結(jié)果（如圖 3-6）：IVF 與 SCNT 的 1-細胞期胚胎、2-細胞期胚胎、4-細胞期胚胎、8-細胞期胚胎和 9 至 16-細胞期胚胎中 Zscan4-like表達兩兩之間差異不顯著；IVF 桑葚胚中 Zscan4-like 表達比 SCNT 桑葚胚中的表達量要高，差異顯著；IVF 囊胚中 Zscan4-like 表達比 SCNT 桑葚胚中的表達量要低，差異顯著。M1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 M2 1 2 3 4 5 6 7 8 9
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